陈磊 庞永 褚利平 金国
（山东省枣庄矿业集团中心医院 山东 枣庄 277000）
【摘要】 目的：探究羚羊角中脂肪酸类成分和具体的分析方法。方法：于市场选取赛加羚羊角1例，采用溶剂法对羚羊角中脂类成分进行提取，通过甲酯化，利用气相色谱-质谱联用技术对脂类进行分离并鉴定成分，并通过归一化法计算出百分比。结果：羚羊角脂肪酸类成分有9种，占羚羊角总脂的85.38%，其中饱和脂肪酸有6种，占67.34%，不饱和脂肪酸3种，占18.04%；羚羊角中脂肪酸主要成分为硬脂酸、棕榈酸以及油酸，占80.58%。结论：采用气相色谱-质谱联用法（GC-MSD）分析鉴定羚羊角中脂肪酸成分，鉴定结果可靠。
【关键词】羚羊角；脂肪酸；GC-MSD；成分分析
【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）13-0056-01
羚羊角是一种常用中药，当今市场上售正品的原动物为赛加羚羊[1]；羚羊角在医疗中具有平肝熄风、清肝明目、凉血解毒、清热镇痉、平肝熄风以及解毒消肿的功效；羚羊角中含有角蛋磷酸钙、赖氨酸以及脂肪酸等多种成分，研究并鉴定羚羊角中脂肪酸类的主要成分，为进一步加强医学研究，提升医疗水平具有重要作用，本次研究选取1例赛加羚羊角作为研究对象，采用GC-MSD对其脂肪酸成分进行分析鉴定，现报道如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
于市场选取赛加羚羊角1例作为研究对象，经药品检验所主任医师鉴定为赛加羚羊角，具有以下特点：①通天眼特征；②角表面具有轮生环节，凹凸有致，纹顺环纹处顺序环生，光滑自然；③骨塞连结骨质处与血窠相连接，镶嵌紧密，骨塞白色，基部似桃形；④色泽丝纹，通体光润如玉，呈白色和黄白色，表面除轮生环节外，还具细丝纹，有条不紊。
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1.2 方法
成分鉴定仪器为6890气相色谱仪（美国安捷伦），MSD Chemstation，全自动进口样器7683B，以及NIST02质谱数据库；本次研究所用的氯仿、正己烷、硫酸、甲醇以及无水硫酸钠等均属于分析纯程度。
1.2.1样品
选取称重样品粉末约2.0g，经过2号筛，放置在具塞三角烧瓶中；将甲醇和氯仿以1:2的比例混合（CM混合液）约60ml添加入具塞三角烧瓶中，并将烧瓶与提取装置相连接，于60℃的水浴中开始加热，从水微沸开始计时进行回流提取至60min，取下烧瓶，采用玻璃过滤器对提取液进行过滤，采用另外烧瓶收集；利用CM混合液清洗烧瓶和滤器残渣，与滤液合并，蒸发烧瓶将溶剂回收，通过烘箱烘烤至恒重；利用定量的CM混合液溶解，之后精密吸取一定体积的溶液（提取脂肪）为30㎎，放置于具塞试管内，在80℃的水浴中蒸干，添加2ml的5%硫酸甲醇溶液，晃动使均匀，将其置于60℃的水浴中进行甲酯化约1h；添加正己烷2ml，晃动后静置，将正己烷层收集，添加少许无水硫酸钠，密封保存。
1.2.2测定
HP-5MS毛细管柱(30mx320μm，0.25μm)；载气：高纯氦；流速为1.0m1·min-1，属于恒流模式；进样口：温度为250℃，分流比为10：l，自动进样器进样，进样量为1μl；柱温：程序温度升高，初始温度为160℃，保持3min，之后再以10℃·min-1的速度升温至250℃，保持8 min左右；检测器：5973质谱联用仪，离子源温度为230℃，四极杆温度为160℃；电子能量70 eV；SCAN模式，质量范围为40-550 m/z。
2.结果
将研究得出的质谱碎片采用NIST02质谱数据库通过计算机进行检索，对脂类各成分进行分析鉴定，之后依据色谱图的图示面积用归一化法进行计算，得出：羚羊角脂肪酸类成分主要有9种，占羚羊角总脂的85.38%，其中包括十四烷酸甲酯（1.21%），9-甲基十四烷酸甲酯（0.59%），十六烷酸甲酯（棕榈酸甲酯）（45.12%），11-十六碳烯酸甲酯（棕榈烯酸甲酯）（0.85%），9,12-十八碳二烯酸甲酯（亚油酸甲酯）（0.70%），14-甲基十六烷酸甲酯（0.57%），9-十八碳烯酸甲酯（油酸甲酯）（16.49%），十八烷酸甲酯（硬脂酸甲酯）（18.97%）和二十烷酸甲酯（花生酸甲酯）（0.88%）；且饱和脂肪酸有6种（十四烷酸、9-甲基十四烷酸、十六烷酸、14-甲基十六烷酸、十八烷酸和二十烷酸），占67.34%，不饱和脂肪酸3种（11-十六碳烯酸、9,12-十八碳二烯酸和9-十八碳烯酸），占18.04%；羚羊角中脂肪酸主要成分为硬脂酸、棕榈酸以及油酸，占总脂的80.58%。
3.讨论
赛加羚羊是一种国际保护动物，随着现阶段环境的污染和动物资源的缺乏，羚羊愈发稀少，对逐步深入的医学研究和探寻羚羊角医疗药用的进程造成阻碍；为进一步研究羚羊角的主要成分，提高医疗价值，本次研究选取1例赛加羚羊角为研究对象，分别采用索氏提取法、氯仿-甲醇混合法等提取出羚羊角中的主要脂类成分，结果发现氯仿-甲醇混合提取法效率最高，效果最好，于是选取此种提取方法，并根据试验情况选取适当的60℃水浴回流提取60min；之后选取最佳甲醇法即硫酸甲醇法实施甲酯化，配合2ml的5%硫酸甲醇溶液进行催化，控制反应温度和反应时间分别为60℃和1h；研究最后采用 HP-5MS毛细管柱(30mx320μm，0.25μm)升温法进行试验，并优化MSD测定条件。本次研究结果发现羚羊角中脂肪酸成分有9种，占总脂的85.38%，其中饱和脂肪酸6种，不饱和脂肪酸3种；占最大比例的脂肪酸为硬脂酸、棕榈酸和油酸3种，占总脂的80.58%；硬脂酸是自然界广泛存在的一种脂肪酸，几乎所有油脂中都有含量不等的硬脂酸，棕榈酸是一种饱和高级脂肪酸；有医学研究证实油酸和亚油酸的脂质过氧化作用具有抗肿瘤活性，能够有效调节人体心血管系统，如抗心律失常，而且对血脂和糖代谢具有调节和促进作用。
总而言之，采用GC-MSD分析鉴定羚羊角中脂肪酸成分，鉴定结果客观、可靠，操作方便，对羚羊角的脂肪酸成分做了详细阐述，对羚羊角这一医学领域的持续研究和临床应用具有重要指导意义。
【参考文献】
[1]徐爱仁，胡晓炜，马卫成，等.羚羊角脂类成分的提取与甲酯化条件优化[J].医药导报.2011,30（04）：433-436.
论文作者:陈磊,庞永,褚利平,金国
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第13期供稿
论文发表时间:2015/7/24
标签：羚羊角论文; 脂肪酸论文; 甲酯论文; 成分论文; 烧瓶论文; 甲醇论文; 鉴定论文; 《医药前沿》2015年第13期供稿论文;