王金文 刘敏 杜静 齐文晶 李佳佳
大庆油田总医院 163000
摘要：目的 研究分析肠球菌属细菌临床分离情况及耐药性特征，为临床合理使用抗菌药物及控制感染提供依据。方法 回顾性分析1220株引起医院感染的肠球菌属细菌。采用vitek 2全自动微生物分析仪做菌株鉴定和药敏试验，采用MIC法筛检高水平氨基糖苷类耐药菌株，采用WHONET 5.6进行数据分析。结果 共检出1220株肠球菌，其中粪肠球菌675株，占55.3%，屎肠球菌445株，占36.5%，肠球菌属细菌在各临床标本中的分布以尿液为主，占57.5%。屎肠球菌总体耐药率较高，其中对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率均超过90%，明显高于粪肠球菌对这4种抗菌药物的耐药率（<17%）。粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀的耐药率为100.0%，而屎肠球菌的耐药率为12.6%。两种细菌均未发现对万古霉素耐药菌株，但发现3株耐利奈唑胺的粪肠球菌。粪肠球菌对高水平庆大霉素耐药菌株和高水平链霉素耐药菌株的筛检率分别为54.1%和27.3%，而屎肠球菌的筛检率分别为58.2%和56.9%。结论 肠球菌属细菌对常用抗菌药物的耐药情况不容乐观，监测肠球菌属的临床分布及耐药状况对临床治疗肠球菌属细菌感染具有重要的指导意义。
关键词：粪肠球菌；屎肠球菌；抗菌药物；耐药性
[Objective] to study and analyze the clinical isolation and drug resistance characteristics of Enterococcus bacteria，so as to provide evidence for rational use of antibiotics and control of infection. Methods 1220 strains of enterococci causing nosocomial infection were retrospectively analyzed. The VITEK 2 automatic microorganism analyzer was used for strain identification and drug sensitivity test. The high level glucoside resistant strains were screened by MIC method，and the data were analyzed by WHONET 5.6. Results 1220 strains of Enterococcus were detected，including 675 Enterococcus faecalis，55.3%，445 Enterococcus faecium，36.5%. The distribution of Enterococcus in all clinical specimens was mainly urine，accounting for 57.5%. The resistance rate of Enterococcus faecium was higher than that of penicillin，ampicillin，ciprofloxacin and levofloxacin，which was more than 90%，which was significantly higher than that of Enterococcus faecalis（<17%）for these 4 kinds of antibiotics. Enterococcus faecalis of quinupristin / leptin resistance Dafoe rate was 100%，and the drug resistance of Enterococcus faecium was 12.6%. Two kinds of bacteria were not found to vancomycin resistant strains，but found that 3 strains of linezolid resistant Enterococcus faecalis. The screening rates of Enterococcus faecalis for high level gentamicin resistant and high level streptomycin resistant strains were 54.1% and 27.3% respectively，while the screening rate of Enterococcus faecium was 58.2% and 56.9%，respectively. Conclusion the antimicrobial resistance of enterococci is not optimistic. Monitoring the clinical distribution and drug resistance of Enterococcus is of great guiding significance for the clinical treatment of Enterococcus bacteria infection.
[Keywords] Enterococcus faecalis；Enterococcus faecium；antimicrobial agents；drug resistance.
肠球菌属细菌主要由粪肠球菌和屎肠球菌组成，是人和动物肠道内的正常菌群，也是引起医院感染的重要条件致病菌，肠球菌异位寄生可以引起尿路感染、败血症、心内膜炎、创面及腹腔感染等[1]。由于粪肠球菌与屎肠球菌具有不同的耐药特征，并且近年来肠球菌的耐药性问题日趋严重，特别是耐万古霉素肠球菌（VRE）的出现，给临床对肠球菌感染的治疗造成极大的困难[2]。因此，对肠球菌属细菌的临床分布及耐药性进行动态监测，对指导临床合理用药十分重要。
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1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株来源 收集2015～2017年本院住院患者送检标本中检出的肠球菌1220株，剔除同一患者相同部位检出的重复菌株。标本类型包括尿液、血液、胆汁、脓液及创口分泌物、引流液等。
1.1.2 仪器与试剂vitek 2全自动微生物鉴定和药敏分析仪及配套GP革兰阳性菌鉴定卡及AST-GP67革兰阳性药敏卡由梅里埃公司生产。
1.1.3 质控菌株 质控菌株为粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC29213。
1.2 方法
1.2.1 菌株鉴定及药敏试验 按《全国临床检验操作规程》进行肠球菌属细菌的培养分离，使用vitek 2全自动微生物鉴定和药敏分析仪、配套GP革兰阳性菌鉴定卡及AST-GP67革兰阳性药敏卡进行菌种鉴定和药敏试验。
1.2.2 高水平氨基糖苷类耐药（HLAR）检测 采用CLSI推荐的肉汤微量稀释法检测高浓度庆大霉素（500 μg/mL）和高浓度链霉素（1 000 μg/mL）的耐药情况，如菌株有任何生长，则判断为耐药。
1.3 统计学处理
采用世界卫生组织（WHO）推荐的WHONET 5.6进行统计分析。
2 结果
2.1 肠球菌属细菌在不同标本中的分布
1220株肠球菌属细菌中，来自尿液标本最多，占总标本的57.5%，位列第2和第3位的是脓液及创口分泌物和血液标本，分别占16.8%和8.5%。
2.2 肠球菌属细菌的菌株分布
1220株肠球菌属细菌中，以粪肠球菌和屎肠球菌为主，两者合计占总检出肠球菌的91.8%，分别占55.3%和36.5%。
2.3 粪肠球菌和屎肠球菌对12种抗菌药物的耐药性
675株粪肠球菌和445株屎肠球菌对12种抗菌药物表现出不同程度的耐药性。其中屎肠球菌总体耐药率较高，其对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星和红霉素的耐药率均超过90%，而粪肠球菌对以上抗菌药物的耐药率除红霉素外均低于17%。对于奎奴普丁/达福普汀和四环素的耐药情况，粪肠球菌和屎肠球菌也有较大差异，粪肠球菌的耐药率（分别为100.0%和81.5%）明显高于屎肠球菌耐药率（分别为12.6%和46.7%）。两种菌株均未发现对万古霉素耐药菌株，但发现3株利奈唑胺耐药的粪肠球菌。
2.4 HLAR菌株筛检结果
675株粪肠球菌中筛检出高水平庆大霉素耐药菌株365株，占54.1%，筛选出高水平链霉素耐药菌株184株，占27.3%。445株屎肠球菌中筛检出高水平庆大霉素耐药菌株259株，占58.2%，筛选出高水平链霉素耐药菌株253株，占56.9%。
3 讨论
近年来，住院患者因肠球菌属细菌引起的医院感染日逐增多，患者入院时病情危重、前期应用头孢三代抗菌药物、有侵入性操作和血清白蛋白低水平是肠球菌属医院感染的独立危险因素[3]。本研究中，肠球菌主要来源于尿液标本（占57.5%），与国内外报道基本一致[4]，肠球菌主要在一些留置导尿管、患有尿道结石、长期住院患者的尿液标本中分离出，已成为引起尿路感染仅次于大肠埃希菌的第2位病原菌。肠球菌的临床标本来源除尿液外依次为脓液及创口分泌物（16.8%）、血液（8.5%）和胆汁（7.5%）等，与杨怀德[4，5]等报道存在一定的区别。在肠球菌属菌种分布方面，我国粪肠球菌与屎肠球的检出率接近，且屎肠球菌的检出率有逐年上升趋势[6]，已有屎肠球菌的检出率高于粪肠球菌的相关报道[7，8]，但本资料1220株肠球菌属细菌中粪肠球菌的检出率为55.3%，高于屎肠球菌的36.5%检出率，与张正银等[9]报道基本一致，可能与肠球菌属细菌感染的不同地区差异、标本来源和疾病谱等有关[1]。
从表3可见，粪肠球菌和屎肠球菌对抗菌药物有不同的耐药特征，并且屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药性比粪肠球菌多，如屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均超过90%，而粪肠球菌对上述抗菌药物的耐药率均低于17%，两者有明显差别，与国内报道基本一致[10，11]，有研究表明，屎肠球菌表现出对青霉素和氨苄西林的高耐药可能与该菌能产生低亲和力的青霉素结合蛋白（PBPS）有关[12]，而对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药主要是由药物的主动外排和药物靶位-Ⅱ型拓扑异构酶的改变所致[1]。屎肠球菌对利福平与红霉素的耐药率（分别为75.1%和94.9%）也高于粪肠球菌的耐药率（分别为40.4%和75.9%），但对奎奴普丁/达福普汀的耐药情况却相反，奎奴普丁/达福普汀属于链阳霉素类药物，是针对万古霉素耐药肠球菌而开发的一种新药，其作用机制是抑制肠球菌早期和晚期的蛋白合成[8]，本研究中，屎肠球菌对奎奴普丁/达福普汀的耐药率为12.6%，而粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀却有100.0%的耐药率，究其原因可能与粪肠球菌的核糖体50S亚基的结合率降低有关。
本研究结果显示，粪肠球菌和屎肠球菌对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率比较高，其中粪肠球菌分别为54.1%、27.3%，屎肠球菌分别为58.2%、56.9%，与朱立军[13]报道相近。肠球菌对高浓度氨基糖苷类耐药的主要机制可能与这些肠球菌产生氨基糖苷类修饰酶有关[14]，而该酶的产生会导致作用于细胞壁的青霉素类或糖肽类与氨基糖苷类联合使用时失去协同作用[15]，因此监测肠球菌对氨基糖苷类是否高水平耐药对临床治疗具有十分重要的意义。
论文作者:王金文,刘敏,杜静,齐文晶,李佳佳
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第9期
论文发表时间:2018/6/12
标签：球菌论文; 菌株论文; 细菌论文; 检出论文; 标本论文; 药物论文; 环丙沙星论文; 《中国误诊学杂志》2018年第9期论文;