（广东省广州市妇女儿童医疗中心 广东 广州 510623）
【摘要】 目的：探讨血清白介素-32（IL-32）检测在小儿哮喘患者中的临床意义。方法：2011年2月-2013年2月在我院儿科门诊和病房收治的儿童哮喘患者90例，作为哮喘组，其中女40例，男50例，平均年龄为7.5±2.2岁。另选30例正常儿童作为对照组，其中女12例，男18例，平均年龄为7.0±2.5岁。酶联免疫法检测血清IL-32和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的水平。此外，哮喘患儿进行支气管激发试验。分析哮喘患儿IL-32水平与MMP-9、哮喘分级和气道反应性的相关性。结果：与正常儿童相比，哮喘患儿血清IL-32和MMP-9水平明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。哮喘病情三级和四级患儿血清IL-32水平明显高于一级和二级患儿，四级患儿血清IL-32水平明显高于二级患儿（P<0.05）。哮喘患儿血清IL-32与MMP-9水平呈正相关，相关系数r=0.659，P<0.05；IL-32水平与哮喘病情分级呈正相关，r=0.725，P<0.05；IL-32水平与气道反应性严重程度指标PC20FEV1呈正相关，r=0.522，P<0.05。结论：血清IL-32水平检测能反映小儿哮喘患者病情评估具有积极意义，并与气道重塑有关。
【关键词】 IL-32；小儿；哮喘；气道反应性
【中图分类号】R72 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）03-0014-02
The clinical significance of serum interleukin-32 detection in children with asthma
Wang Min , Wan Linghua .
Corresponding author:Wan Linghua
【Abstract】Objective To explore the clinical significance of serum Interleukin-32 (IL-32) detection in children with asthma.Methods 90 children with asthma were included in the present study (40 female,50 male, aged 7.5±2.2 ), which were as the asthma group. 30 normal children were as the control group (12 female,18 male, aged 7.0±2.5 ). IL-32 and matrix metallopeptidase?-9 were detected by Enzyme-linked Immunosorbent assay. Bronchial provocation test was performed in children with asthma. The correlation between IL-32 and MMP-9, asthma grade and airway reactivity was analyzed.Results In comparison to the normal children, the serum levels of IL-32 and MMP-9 were significantly increased in children with asthma. Serum levels of IL-32 were significantly higher in grade three and four children than those in grade one and two children. Serum IL-32 was significantly correlated with MMP-9, asthma grade, and PC20FEV1 (reflected the severity of airway reactivity).Conclusion Serum IL-32 could be used for condition assessment and drug efficacy in children with asthma. In addition, IL-32 might be associated with airway remodeling.
【Keywords】 Interleukin-32;Children;Asthma;Airway reactivity
支气管哮喘是儿童时期最常见的呼吸道慢性疾病之一。随着人类生活方式的改变，我国儿童哮喘总患病率呈上升趋势，目前上升为0.11%～2.03%[1]。支气管哮喘可以发生于任何年龄，儿童支气管哮喘多数始发于4-5岁，并可伴发肺气肿、严重可以肺心病及呼吸衰竭，影响儿童的生长发育[2]，因此有必要积极防治小儿支气管哮喘。哮喘病情的严重程度评估有利于及时采取更为有效的治疗措施，从而得到控制疾病的目的。白介素-32（Interleukin -32，IL-32）是2005年才发现的一种细胞因子[3]。最近的研究显示慢性阻塞性肺部疾病（COPD）患者血清IL-32水平升高[4]；动物实验证实哮喘小鼠肺组织IL-32表达水平上调[5]。因此本研究尝试探讨儿童哮喘患者血清IL-32水平能否作为病情评估和气道重塑指标。
1.研究对象和方法
1.1 研究对象
2011年2月-2013年2月在我院儿科门诊和病房收治的儿童哮喘患者90例，作为哮喘组，其中女40例，男50例，平均年龄为7.5±2.2岁。所有患者符合全国儿科哮喘防治协作组规定的儿童哮喘诊断标准[6]。此外按照哮喘病情严重程度分为四级：一级（轻度间歇）、二级（轻度持续）、三级（中度持续）、四级（重度持续）[6]。另选30例正常儿童作为对照组，其中女12例，男18例，平均年龄为7.0±2.5岁。对照组和哮喘组儿童在性别、年龄等方面无统计学差异，具有可比性。所有患儿的监护人均签署知情同意书。
1.2 IL-32和MMP-9检测
采集所有测试者晨起空腹静脉血3ml，室温静置30min后，3000转/min离心15min，收集上层血清，置于-20℃保存备用。血清MMP-9的测定采用酶联免疫法（双抗体夹心法），试剂盒来源于美国ADL公司。血清IL-32的测定采用酶联免疫法（双抗体夹心法），试剂盒来源于美国R&D公司。严格按照说明步骤操作，酶标仪450nm处测定OD值，根据标准曲线和OD值，计算样品的实际浓度。
1.3 气道反应性检测
按照文献所述[7]，对受试者进行气道反应性检测。受试者试验前12h应停用口受体激动剂、氨茶碱口服与吸入，长效氨茶碱制剂应停药48h。第一秒用力呼气容积（FEV1）大于70%的患者，方可进行支气管激发试验，重度持续哮喘患儿避免进行支气管激发试验。雾化吸人生理盐水后的FEV1作为对照值，继之再由低到高依次吸人不同浓度的乙酞甲胆碱稀释剂（九步法），每个浓度吸人后均测定对应的FEV1，直至FEV1较对照值下降）20%，为支气管激发试验阳性，此时的激发药物浓度记做PC20 FEV1作为是衡量气道高反应性的程度，然后吸人支气管扩张剂加以缓解。
1.4 统计学分析
应用SPSS13.0统计软件进行统计分析。主要统计指标均进行正态性检验，计量资料用均数±标准差表示，两组比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK检验；IL-32和MMP-9水平、IL-32与气道反应性指标PC20FEV1的相关性采用Pearson简单相关分析；IL-32水平与哮喘严重程度相关分析采用Spearman等级相关分析。P<0.05为有统计学意义。
2.结果
2.1 哮喘患儿血清IL-32及MMP-9水平的变化
结果显示，与正常儿童相比，哮喘患儿血清IL-32和MMP-9水平明显升高，差异具有统计学意义，P<0.05，见表1。
2.3 气道反应性检测结果
一共有70例患儿进行了支气管激发试验，平均PC20FEV1为0.15±0.21mg/ml。
2.4 哮喘患儿血清IL-32与MMP-9、哮喘病情分级和气道反应性的相关性分析
相关分析结果显示，哮喘患儿血清IL-32与MMP-9水平呈正相关，相关系数r=0.659，P<0.05；IL-32水平与哮喘病情分级呈正相关，r=0.725，P<0.05；IL-32水平与气道反应性严重程度指标PC20FEV1呈正相关，r=0.522，P<0.05。
3.讨论
哮喘是以气道炎症、气道高反应性和气流阻塞为特征的变态反应性疾病，其中炎症是哮喘的本质。2005年美国科罗拉多大学健康科学中心医学部的Kim 发现了一种新型的白介素，并命名为IL-32[3]。随后越来越多研究证实IL-32是一种前炎性反应细胞因子，与很多炎症性和自身免疫性的疾病密切相关，并显示上皮细胞是其主要和广泛的来源。譬如IL-32参与了如类风湿性关节炎，克罗恩病的发病[8，9]。我们的研究结果显示哮喘患儿血清IL-32水平明显升高，这与最近的一项动物实验的结果相一致[5]。该研究发现哮喘小鼠肺组织IL-32水平明显上调，并且采用布奈地德干预后，哮喘小鼠肺组织IL-32水平明显下降。结合我们的临床研究，提示了IL-32参与了哮喘的发生，而哮喘患儿外周血IL-32水平的升高可能来源与肺组织表达上调的IL-32。我们进一步分析了不同哮喘病情分级患儿血清IL-32水平，发现病情越严重的患儿，血清IL-32水平越高，进一步的相关性分析也证实了这一点，血清IL-32水平与哮喘病情分级呈正相关。说明了血清IL-32水平可以用于哮喘病情的评估和药物疗效的判断。
支气管激发试验测定气道的反应性能在一定程度上间接反映气道的炎症，是确诊哮喘、评估哮喘的严重程度、药物治疗疗效判断及停药的指标之一。研究证实哮喘临床指标达到完全控制的时间早于气道反应性达到理想水平的时间，气道反应性指标在联合治疗长期随访以及调整治疗方案中的价值优于临床症状和肺功能[10]。本研究尝试分析了血清IL-32水平与气道反应性的相关性，结果显示了IL-32水平与气道反应性呈正相关，进一步验证了血清IL-32水平检测在临床应用中的重要价值。气道重塑是支气管哮喘重要病理特征之一。MMP-9被认为与哮喘的气道重塑密切相关。生理状态下MMP-9在血管壁上表达极弱；发生气道炎症时，肺组织的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、血管内皮细胞等细胞被激活，从而促进MMP-9 的高表达，过度降解细胞外基质，破坏基底膜，而促进气道重塑[11]。多项研究证实了MMP-9与哮喘的气道重塑有关。譬如，哮喘患者痰液MMP-9水平明显升高[11]，哮喘大鼠肺组织MMP-9表达水平明显上调[12]等。本研究也得到类似的结果，哮喘患儿血清MMP-9水平明显升高，并且与IL-32呈正相关。这说明了IL-32与气道重塑也有关。但是IL-32如何参与了气道重塑，需要进一步的研究。
总的来说，本研究证实了血清IL-32水平与哮喘患儿病情严重程度、气道反应性和气道重塑均有关，提示了其可以用于哮喘病情的评估和药物疗效的判断，血清IL-32检测具有重要的临床价值。
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论文作者:王敏,汪玲华（通讯作者
论文发表刊物:《医药前沿》2017年1月第3期
论文发表时间:2017/2/20
标签：哮喘论文; 血清论文; 气道论文; 水平论文; 患儿论文; 支气管哮喘论文; 病情论文; 《医药前沿》2017年1月第3期论文;