张智俊[1]2000年在《新疆甜瓜转ACC脱氨酶基因的研究》文中提出通过对激素水平,子叶年龄,外植体种类,光照时间,培养温度等影响植株再生因子的研究,建立了甜瓜无性再生体系。然后通过对转化过程中卡那霉素,氨苄青霉素用量,侵染和共培养时间的研究,确立了以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的转化体系。按照该体系,用农杆菌侵染三种甜瓜‘皇后’、‘迦师瓜’、‘红蜜脆’培养8天的子叶块,接种在MS附加1.0mg/L BA,75mg/L卡那霉素和200mg/L氨苄青霉素的培养基上,在温度27±1℃,光照2000lx条件下,20天左右出现不定芽的分化;继续将这些不定芽接种在MS附加0.1mg/L IBA,50mg/L卡那霉素和200mg/L氨苄青霉素的培养基上,诱导根的产生,最终获得了转化植株。通过对转化植株的PCR扩增检测证明,1kb的ACC脱氨酶基因已经整合到甜瓜基因组中。
李晓荣[2]2002年在《新疆哈密瓜转ACC脱氨酶基因的研究》文中研究表明ACC脱氨酶可以将乙烯的前体物质ACC降解为丁酮酸和氨气,从而降低植物体内的乙烯含量,达到控制果实成熟的目的。本实验是利用农杆菌介导的方法,将ACC脱氨酶基因导入新疆哈密瓜的两个品种:皇后和卡拉克塞(伽师瓜)。以5天的子叶作为外植体,在浓度OD=0.4的菌液中侵染5-8min,共培养2天,经过脱菌,分化,继代及生根培养后,得到完整的抗卡那霉素转化植株。加入AgNO3和AS,可以提高芽的分化率。移栽实验表明,炼苗后经过水培的植株其成活率高,且后期生长较迅速。其中转化植株的生根及生长速度比对照植株慢。通过卡那霉素抗性鉴定、转化植株总DNA的PCR分析,ACC脱氨酶基因已整合到哈密瓜的基因组中。过氧化物同工酶结果表明,转化植株的过氧化物同工酶电泳条带比对照植株的有所增加,可能是ACC脱氨酶基因的导入使得某些基因得以表达。乙烯测定结果初步证明,转基因植株对乙烯(伤乙烯)的生成有抑制作用。
参考文献:
[1]. 新疆甜瓜转ACC脱氨酶基因的研究[D]. 张智俊. 新疆农业大学. 2000
[2]. 新疆哈密瓜转ACC脱氨酶基因的研究[D]. 李晓荣. 新疆农业大学. 2002