巩凡1 程锁利1 吕强2 王立峰1 魏松英1
（1宁夏人民医院 750011）
（2石嘴山中心医院 753600）
【摘要】 目的：观察兔激素性股骨头缺血性坏死骨质中SREBP-1c及PPARγ的表达。方法：使用醋酸泼尼松龙制备兔激素性股骨头缺血性坏死动物模型，采用实时荧光定量PCR 检测PPARγ、SREBP-1c在骨组织中的表达情况。结果：PPARγ、SREBP-1c的表达量在骨组织中较正常组织中显著增多（P＜0.05）；实验组中PPARγ表达量比SREBP-1c mRNA 显著增多（P＜0.05）。结论：SREBP-1c及PPARγ的信号转导途径影响脂肪细胞的分化，其在兔激素性股骨头坏死脂质代谢中发挥重要的作用。
【关键词】激素性股骨头坏死；PPARγ；SREBP-1c
【中图分类号】R68 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）22-0025-02
Expression of SREBP - 1 c and PPARγin Rabbit glucocorticoid-induced avascular necrosis
Gong Fan, Cheng Suoli1, Li Lifeng, Wei Songying .The People's Hospital of Ningxia, Yinchuan750011,China; Lv Qiang. The Center Hospital of Shizuishan , Ningcia, Shizuishan753600,Chian
【Abstract】 Objective To observe the expression of SREBP - 1 c and PPARγin Rabbit glucocorticoid-induced avascular necrosis. Methods Prednisolone acetate was used to establish the animal model of rabbit glucocorticoid-induced avascular necrosis, and the expression of SREBP - 1 c and PPARγin bone tissue were detected by real-time fluorescent quantitative PCR assay. Results The expression of PPAR γ mRNA?in bone tissue were higher than normal tissue (P <0.05); The expression?of PPAR?γ was higher than in the SREBP-1c in the experimental group (P＜0.05). Conclusion Signal transduction pathway of SREBP-1c and PPAR?γplay an important role in glucocorticoid induced avascular necrosis lipid metabolism by effecting fat differentiation.
【Key Words】 Sanfh ; PPARγ; SREBP-1c
激素性股骨头缺血性坏死（SANFH）是一种大量应用皮质类固醇类激素后造成的以全身无菌性骨坏死为特征的疾病，其中以髋关节发生率最高。目前对SANFH病因学研究有多种学说，以脂肪代谢紊乱学说为主[1]。SREBPs及PPARs是脂类代谢的主要途径之一，本实验通过制造兔激素性股骨头缺血性坏死模型，检测模型中股骨头内SREBP-1c及PPARγ的表达，探讨脂类代谢异常在激素性股骨头坏死中的作用途径。
1.材料和方法
1.1 材料
健康成年新西兰大白兔由宁夏医科大学动物试验中心提供；马血清来自郑州益康生物工程有限公司；醋酸泼尼松龙：中国浙江仙据制药股份有限公司；青霉素钠：石药集团中诺药业；标准马血清：郑州益康生物工程有限公司；兔饲料：北京科澳协力饲料有限公司。
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1.2 实验动物
健康的成年新西兰大白兔10只，雌雄各半，体重2.5～3.0kg，作为模型组(M组)。分笼喂养，按统一标准饲养。试验前适应性饲养3天。每只使用马血清10ml/kg，经兔耳缘静脉注射一次，间隔两周后再注射一次。继续喂养两周后肌肉注射醋酸泼尼松龙8mg/kg，间隔一天注射一次，共16次。继续喂养，以最后一次注射激素起3周处死实验动物，取双侧股骨头液氮保存。为预防感染，所有试验动物每周给予肌肉注射青霉素钠20万单位/只。随机抽取实验动物雌雄各一只作病理学确定。另取同种的10只，雌雄各半，作为对照组（K组）。
1.3 PPARγ、SREBP-1c 的检测方法
所有组织标本取材后，立即编号放入液氮中保存。对标本中过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）、固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP－1c）mRNA的表达量进行检测。内参为β-actin。
1.4 观查项目
股骨头坏死的病理学确定，即骨小梁中大量空骨陷窝的形成或核固缩现象同时周围脂肪组织出现坏死[2]。
1.5 统计学处
采用SPSS 11.5 统计软件，计量资料以均数±标准差表示，采用行t检验，P≤0.05 为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 病理学检查
在光学显微镜下可见兔股骨头内骨小梁变细、断裂，骨小梁中骨细胞细胞核浓聚，偏向一侧。骨小梁中空骨陷窝增多。骨髓中脂肪细胞增大、融合。可见髓腔内出血。符合激素性股骨头缺血性坏死病理学诊断。
2.2 PPARγ、SREBP-1c 的表达
PPARγ、SREBP-1c的表达量在骨组织中较正常组织中显著增多（P＜0.05）；实验组中PPARγ表达量比SREBP-1c mRNA 显著增多（P＜0.05）
表2 两组股骨头中PPARγ、SREBP-1c 的表达
K组M组t值P值
PPARγ0.175±0.0380.3179±0.0153.2710.019
SREBP-1c0.189±0.0210.220 ±0.0342.5800.023
t值 0.03713.919
P值0.7920.047
3.讨论
3.1 PPARs与脂类代谢
PPARs是核激素受体超家族成员，包括PPARα、PPARβ／δ 和PPARγ 3 种表型，PPARγ参与脂肪细胞的分化[3]。PPARγ能够诱导脂肪前体细胞向脂肪细胞分化，但在前脂肪细胞中其并不表达，如果前脂肪细胞需要分化时其先于其他基因表达。没有PPARγ，前脂肪细胞不能分化成脂肪细胞。所以PPARγ起着关键性作用。
在本次实验中我们发现模型组PPARγ的表达量明显多于对照组，说明激素可以上调股骨头内PPARγ的表达，随着PPARγ的高表达，骨髓间充质干细胞及脂肪前体细胞向脂肪细胞分化，同时骨髓间充质干细胞被抑制向成骨细胞分化，从而抑制骨的自我修复作用。解释了临床中早期行外科干预治疗骨的自我修复仍不理想的原因。
3.2 SREBP-1c与脂类代谢
SREBPs是一种核转录因子，属于高度保守的“碱性螺旋- 环-螺旋-亮氨酸拉链”转录因子家族中的一员，有3种形式的异构体，即SREBP-1a、SREBP-1c和 SREBP-2。SREBP-1c是脂肪酸和脂肪合成中至关重要的调控因子，SREBP-1c的表达调节脂肪酸和甘油三酯的合成。
在本次实验中模型组SREBP－1c的表达也高于对照组，说明股骨头内的细胞已经在激素的影响下促进脂肪酸和甘油三酯的合成。模型组之间PPARγ的表达高于SREBP-1c的表达，这可能与基因的作用不同有关。
综合以上，在兔激素性股骨头坏死中，PPARs的表达是股骨头内脂质代谢异常的可能信号通路之一，但此次试验并没有进一步研究这一信号通路的全过程。同时SREBPs的高表达可能与脂滴的堆积有关，但骨髓腔内细胞组成复杂，其具体的作用点并没有阐述。这些将是今后试验的重点。
【参考文献】
[1] 陈汉尧,齐振熙,吴敏瑞等.激素性股骨头缺血坏死基础与临床研究进展[J].创伤与急诊电子杂志,2013, (4).
[2] 孙伟.股骨头坏死的病因、病理和发病机制[J].中华全科医师杂志,2006, (2):75-77.
[3] 杨智,刘昭前.PPARγ在脂肪细胞分化和糖脂代谢中的作用[J]. 国际病理科学与临床杂志,2008, 28(1):14-18.
[基金项目] 宁夏回族自治区自然科学基金项目；项目编号：NZ13185
论文作者:巩凡1,程锁利1,吕强2,王立峰1,魏松英1
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第22期供稿
论文发表时间:2015/10/14
标签：激素论文; 脂肪论文; 股骨头论文; 细胞论文; 缺血性论文; 股骨头坏死论文; 小梁论文; 《医药前沿》2015年第22期供稿论文;