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【摘要】目的：探究并对比3种实验室检查方法在肺炎支原体检测上的差异。方法：择取2014年12月到2016年12月期间于笔者医院治疗肺炎的60例患儿，分别采集其呼吸道分泌物、血清、肺泡灌洗液作为样本，先后为其实施三种实验室检查方法，分别为：（1）MP咽拭子快速培养；（2）使用酶联免疫吸附法进行MP的IgM、IgG定量测定；（3）支气管灌洗液实时荧光定量聚合酶链反应检测。对比三种方法的阳性检出率。结果：咽拭子培养法的阳性检出率为48.33%（29/60），ELISA法的阳性检出率为51.67%（31/60），FQ-PCR法的阳性检出率为58.33%（35/60），三种方法的阳性检出率较为相近，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：使用咽拭子培养法、ELISA法与FQ-PCR法进行检查，可提高诊断准确性。
【关键词】肺炎支原体；实验室检查；咽拭子快速培养法；酶联免疫吸附法；支气管灌洗液实时荧光定量聚合酶链反应检测
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）16-0124-02
支原体肺炎乃呼吸系统常见病，其病原体为肺炎支原体——一种介于病毒与细菌之间的微生物，其通过唾沫飞溅进行呼吸道传播，以婴幼儿、青少年为高发群体，以秋冬为高发季节，以阵发性刺激性咳嗽、咽喉痛、发热等症状为主要表现[1]。通过临床观察可以发现，肺炎支原体除了可以引起普通肺炎，还能引起重度双侧肺炎以及一些更加严重的并发症，使患者健康受到严重损害。本文选择2014年12月-2016年12月期间收治的60例肺炎患儿，为其实行咽拭子快速培养法、ELISA法与FQ-PCR法分别进行实验室检查，试对这三种方法的检查结果进行对照分析。
1.资料与方法
1.1 一般资料
择取2014年12月到2016年12月期间于笔者医院治疗肺炎的60例患儿，回顾分析其临床基本资料：（1）性别构成：男性患儿34例，女性患儿26例；（2）年龄分布：最小者6个月月龄，最大者12岁，平均（6.84±1.22）岁；（3）病程：最短7日，最长28日，平均（14.58±2.64）日。注：所有患儿均被确诊为呼吸道感染，均出现发热、咳嗽等症状。
1.2 方法
1.2.1咽拭子快速培养法 于清晨为尚未洗漱的患儿进行样本采集，将无菌棉拭子在患儿咽部轻拭，取得咽部分泌物作为样本，以无菌生理盐水进行初步处理，随后在准备好的、经过预温的培养基内接种样本，24小时后观察培养结果。若培养液从原来的红色转变为黄色，则意味着检测结果为阳性；若培养液的颜色一直保持红色而没有发生变化，则意味着检测结果为阴性。
1.2.2 ELISA法 为患儿采集2mL的静脉血液，按照试剂说明书严格进行检测，检测方法为酶联免疫吸附法，检测前将血清分离，放入索玛PR-521酶标分析仪与产自深圳科润达的试剂盒中进行IgM与IgG的定量检测。半小时后，将血清中的补体IgG与类风湿因子去除，计算其OD值。若OD值大于临界值，则检出结果为阳性，反之若OD值低于临界值则检出结果为阴性。
1.2.3 FQ-PCR法 将感染患儿的支气管灌洗液采集起来，制成样本。依据说明书严格进行样本核算提取：首先给予样本以震荡混匀操作、离心沉淀操作；将上清液提取出来，放入细胞裂解液，待DNA被提取后给予PCR扩增处理；绘制扩增曲线，计算CT值。检出结果若为CT值＜36、扩增曲线为“S”形，则可判定为检出结果为阳性；反之，则可判定为检出结果为阴性。
1.3 观察指标
对比咽拭子快速培养法、ELISA法与FQ-PCR法三种实验室检查方法的阳性检出率。
1.4 统计学方法
参与实验的患者其临床数据均行统计学软件包——给予检验。所涉及的计数资料以（n，%）表示，以卡方值检验。假若两组患者的实验数据经过统计计算结果为P＜0.05，那么表明分组结果存在统计学差异。
2.结果
见表1，咽拭子培养法的阳性检出率为48.33%（29/60），ELISA法为51.67%（31/60），FQ-PCR法为58.33%（35/60），三种方法的阳性检出率较为相近，差异无统计学意义（P＞0.05）。
3.讨论
肺炎支原体是一种原核微生物，虽属细胞型，但却缺少细胞壁，可独立生活，介于病毒、细胞二者之间，一般针对细胞壁起效的抗生素对于肺炎支原体是没有治疗效果的。肺炎支原体所引起的呼吸道感染并不会出现特异性的临床表现，诸如咳嗽、发热、咽痛等症状缺乏特异性与典型性，很难通过直接观察进行确诊，必须要将样本送入实验室后进行分析才可得出准确的结论[2]。咽拭子快速培养法是肺炎支原体的传统检查方法，同时也是诊断支原体肺炎的“金标准”，但是这种方法检出率较低，且需要时间长，实验室条件高，不适合临床使用。肺炎支原体感染人体时，人体会产生特异性抗体，临床可以使用酶联免疫吸附法进行IgM、IgG检测，这种方法对1周病程以上的患儿比较有效，若病程为3～4周，这时抗体释放量达到顶峰，便可以有效诊断出具体的结果。但是，也正是因为具有此特点，所以病程不同的患儿其检查结果也有所不同[3]。FQ-PCR法是三种方法中敏感性与特异性最高的一种方法，可以快速检出病原体内部的核酸水平，不会发生交叉反应。见结果，三种方法的阳性检出率分别为48.33%、51.67%、58.33%，差异不明显（P＞0.05），可见这种方法均可用作实验室检查。咽拭子培养法耗时长，阳性率低，需要实验室条件，一般不推荐临床应用。FQ-PCR检测方法具有敏感性与特异性最高的优点，但需要性支气管镜灌洗，临床接受程度差，不易临床推广。酶联免疫吸附法具有操作简便、检测时间短，推荐临床应用。
4.结语
咽拭子培养法、ELISA法与FQ-PCR法均有应用价值，联用这三种方法可以有效提高实验室的诊断准确率。
表1 三种方法的检出结果对比（n，%）
【参考文献】
[1]龚亚东，马庆庆，林牧.儿童肺炎支原体感染3种检测方法对比分析[J].现代医药卫生，2017，33(02)：251-253.
[2]尚晓东，刘晓华，宋明艳，等.儿童肺炎支原体的3种检测方法对比分析与临床检验学研究[J].中国医药指南，2016，14(26)：126-127.
[3]巫素婷，钟文清.三种方法检测儿童肺炎支原体的比较分析[J].广西医学，2012，34(07)：933-934.
论文作者:时海洋1,张霞2,亓志华2
论文发表刊物:《心理医生》2017年16期
论文发表时间:2017/8/11
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