黑龙江省齐齐哈尔市结核病防治院 161002
摘要：收集结核性胸膜炎患者的胸腔积液，并且对胸腔积液采取胸水结核分枝杆菌培养、药物敏感性试验及Xpert MTB/RIF技术的检测方法。药物敏感性试验一般采用的方法为比例法。将1毫升的溶液放置在前处理管内，随后根据溶液浓度和体积，加入SR样本处理液，SR样本处理液体积一般为样本溶液的二倍，随后晃动十五秒到三十秒，放置十五分钟。将反应盒打开后，抽取二毫升的溶液慢慢添加到反应盒内，然后将反应盒放置于检测部位处，Xpert MTB/RIF技术仪器会自动工作。应用Xpert MTB/RIF技术检测结核性胸膜炎患者胸腔积液时，具有诊断准确、速度快、反应快等等优势，可以提高结核性胸膜炎患者的诊断率和治疗率，让患者能够及时的采取相应的治疗措施，避免发生错误诊断，因此Xpert MTB/RIF技术检测对结核性胸膜炎患者的诊断具有至关重要的作用。
关键词：结核性胸膜炎；结核分枝杆菌；GeneXpert MTB/RIF技术；早期诊断
任何原因导致胸膜腔内出现过多的液体称胸腔积液，俗称胸水。引起胸腔积液的原因有多种多样，其中最为常见的原因为结核性胸膜炎。结核性胸膜炎是结核分枝杆菌及其自溶产物、代谢产物进入超敏感机体的胸膜腔而引起的胸膜炎症。结核性胸膜炎是一种常见病，发病率比较高。占胸腔积液54.8%，早期诊断、早期治疗不仅能够提高患者的治疗率，还可以改善患者愈后。但是，由于但结核性胸膜炎的胸膜活检阳性及胸水结核菌检查阳性率低，无法及时进行诊断和治疗，从而给患者带来损伤。胸水Xpert MTB/RIF检测技术的优势为诊断准确、速度快、反应快等等，因此研究Xpert MTB/RIF技术检测胸腔积液对结核性胸膜炎诊断的临床价值可以提高结核性胸膜炎的诊断率和治疗率。
一、Xpert MTB/RIF技术检测胸腔积液诊断结核性胸膜炎的方法
收集结核性胸膜炎患者的胸腔积液，并且对胸腔积液采取胸水结核分枝杆菌培养、药物敏感性试验及Xpert MTB/RIF技术的检测方法。
（一）胸水结核分枝杆菌培养
将结核性胸膜炎患者的胸腔积液五毫升放入到特定试管内，将试管口盖紧，随后加速晃动十次到二十次，将试管放入到常温环境下培养，培养时间长为十五分钟。
（二）药物敏感性试验及菌种鉴定
药物敏感性试验一般采用的方法为比例法。使用接种环，从胸水结合杆菌培养基上取少量结核分枝杆菌，将其研磨后，根据标准麦氏管比制成1毫克/毫升的溶液，随后将该溶液稀释为10-?毫克/毫升和10-4毫克/毫升，随后将该溶液接种到培养基上，培养基分为实验组和对照组，对照组为空白培养基，实验组为含有40微克/毫升的罗氏固体培养基，将培养基放入到常温环境下培养，培养时间长为四周。随后观察培养基的变化。每批药物敏感性试验用H37Rv作为敏感对照，从而判断含有药物的培养基是否具有功能，如果空白培养基上生长的菌落数量低于二十个，则需要再次进行实验。菌种鉴定与药物敏感性试验同时进行，去上述初次配置成功的1毫克/毫升溶液进行稀释，稀释倍数为100倍，取0.1毫升溶液放置于噻吩-2-羧酸肼和对硝基苯甲酸培养基上，将培养基放入到常温环境下培养，培养时间长为四周。随后观察培养基的变化。
（三）Xpert MTB/RIF技术
将1毫升的溶液放置在前处理管内，随后根据溶液浓度和体积，加入SR样本处理液，SR样本处理液体积一般为样本溶液的二倍，随后晃动十五秒到三十秒，放置十五分钟。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆将反应盒打开后，抽取二毫升的溶液慢慢添加到反应盒内，然后将反应盒放置于检测部位处，Xpert MTB/RIF技术仪器会自动工作。等待仪器检测完成后，可以直接观察检测结果。
二、Xpert MTB/RIF技术检测胸腔积液诊断结核性胸膜炎的结果
结核性胸膜炎胸腔积液经GeneXpert MTB/RIF技术检测阳性率为68.9％，而其他疾病引起的胸腔积液经GeneXpert MTB/RIF技术检测阳性率为3.4％，与其他疾病引起的胸腔积液的胸水Xpert MTB/RIF检测结果相比，结核性胸膜炎患者诊断的诊断率为68.9％，特异性可高达97.1％。而结核性胸膜炎胸腔积液结核分枝杆菌培养的诊断率为23.1％，胸腔积液涂片的诊断率为10.2％。
三、应用Xpert MTB/RIF技术检测胸腔积液对结核性胸膜炎诊断的临床价值
结核性胸膜炎是结核分枝杆菌及其自溶产物、代谢产物进入超敏感机体的胸膜腔而引起的胸膜炎症。结核性胸膜炎是一种常见病，发病率比较高。占胸腔积液54.8%，早期诊断、早期治疗不仅能够提高患者的治疗率，还可以改善患者愈后。但是，由于但结核性胸膜炎的胸膜活检阳性及胸水结核菌检查阳性率低，无法及时进行诊断和治疗，从而给患者带来损伤。结核性胸膜炎患者一般通过临床表现、痰培养、X线片等等多种检查方式确定结果，其中痰培养是诊断的金标准，但是痰培养的诊断率比较低，并且需要的时间比较长，无法长期广泛使用，甚至容易延误患者诊治过程。
胸水Xpert MTB/RIF检测技术的优势为诊断准确、速度快、反应快等等，MTB/RIF检测诊断系统工作原理包括荧光探针技术和反转录聚合酶链式反应等等，结核分枝杆菌基因链上具有利福平耐药密切相关的rpoB基因片段，Xpert MTB/RIF技术主要是通过针对性复制增加该基因片段的数量直到仪器检测出来。溶液内结核分枝杆菌的数量主要是通过聚合酶链式反应循环阈值来观察的，测量方法为半定量，一般胸水Xpert MTB/RIF检测技术检测时间为一百分钟，一百分钟后便可以观察检测结果。根据实验结果研究可了解，与其他疾病引起的胸腔积液的胸水Xpert MTB/RIF检测结果相比，结核性胸膜炎患者诊断的诊断率为68.9％，特异性可高达97.1％。而结核性胸膜炎胸腔积液结核分枝杆菌培养的诊断率为23.1％，胸腔积液涂片的诊断率为10.2％。因此，胸水Xpert MTB/RIF检测结果的准确性远远高于胸腔积液涂片和结核性胸膜炎胸腔积液结核分枝杆菌培养。
Xpert MTB/RIF技术包括检测溶液配置、DNA扩增以及结核分枝杆菌检测等多个步骤，检测溶液配置、DNA扩增均由自动化完成。Xpert MTB/RIF的反应盒可以装载各种类型、各种体积的溶液，并且将原始溶液进行浓缩，经过这一步骤以及溶液的提纯可以提高Xpert MTB/RIF技术的敏感性和准确率。溶液内的DNA经提炼后加入到反应管内，并且通过复制增加其数量，直到被仪器所检测出来，Xpert MTB/RIF技术对DNA数量变化比较敏感，当其数量发生变化时，仪器可以快速做出反应并且给出结果，可以减少结核性胸膜炎患者检查时间，增加了检查速度以及敏感性、准确性。通过两个小时一系列检查，Xpert MTB/RIF技术可以直接从结核性胸膜炎患者胸腔积液内检测出其是否含有结核分枝杆菌，可以观察到患者对利福平是否有耐药性。
四、结束语
综上所述，应用Xpert MTB/RIF技术检测结核性胸膜炎患者胸腔积液时，具有诊断准确、速度快、反应快等等优势，可以提高结核性胸膜炎患者的诊断率和治疗率，让患者能够及时的采取相应的治疗措施，避免发生错误诊断，因此Xpert MTB/RIF技术检测对结核性胸膜炎患者的诊断具有至关重要的作用。
参考文献：
[1]王永忠，柳龙银，张宏宇，等.结核分枝杆菌实时荧光核酸恒温扩增检测方法的建立及应用[J].江苏医药，2011，37（23）：2820-2822.
[2]郑强，李朝金，苟莉，等.多种肺结核临床实验室诊断方法的比较分析[J].国际检验医学杂志，2014，35（21）：2941-2942.
[3]雷云.荧光PCR诊断肺结核的临床应用研究[J].临床肺科杂志，2014，19（7）：1278-1279.
[4]张玉平，丁显平，张丽嫒，等.T-SPOT、TB、痰涂片和TB-DNA检测在肺结核诊断中的比较研究[J].成都医学院学报，2013，8（1）：49-51.
[5]杨新明，邹文玮.不同方法检查痰中结核分枝杆菌的结果及分析[J].实验与检验医学，2010，2（3）：303-304.
[6]赵雁林，王黎霞.分枝杆菌分离培养标准化操作程序及质量保证手册[M].北京：人民卫生出版社，2013：3-12.
[7]王德翠，陈子芳，陈琦，张公文。GeneXpert MTB/RIF技术在结核性胸膜炎诊断及利福平耐药检测中的价值[J].《国际呼吸杂志》，2015，35（14）：1071-1074。
论文作者:孙玉,张太阳,荀玉洁,吴彤彬,张晓庆,肖为美,张
论文发表刊物:《健康世界》2017年第7期
论文发表时间:2017/6/16
标签：胸膜炎论文; 胸腔论文; 分枝论文; 溶液论文; 杆菌论文; 结核性论文; 积液论文; 《健康世界》2017年第7期论文;