【关键词】：HIV1/2抗体；P24抗原；电化学发光；免疫印迹试验
The significance of HIV1/2 antibody and P24 antigen detection
[abstract] : objective to analyze and discuss the significance of HIV1/2 antibody and P24 antigen combined detection.Selection methods from August 2018 to August 2019 our hospital 62 cases of HIV patients as the research object, through ELISA method to detect antibody of HIV1/2 absorbance (OD value) to the critical value of 33 cases patients, HIV1/2 antibodies absorbance is greater than or equal to positive control of 29 cases of patients, through the electrochemical luminescence method combined detection of HIV1/2 antibodies and P24 antigen test, analyze the test results.Results 27 of the 33 patients with critical absorbance were positive for HIV1/2 antibody and P24 antigen, 6 were negative, and 28 were positive and 1 was negative for 29 patients with absorbance greater than or equal to the positive control value.Conclusion combined detection of HIV1/2 antibody and P24 antigen can detect HIV infection earlier and more accurately than ELISA method, which is of great significance and application value for early clinical diagnosis and treatment.
【 key words 】 : HIV1/2 antibody;P24 antigen;Electrochemical luminescence;Western blot test
人类免疫缺陷病毒（HIV）是1983－1984年被证实的引起获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的一种逆转录RNA病毒，该病在临床上以反复机会感染，恶性肿瘤及中枢神经系统的退行性变为主要特征，它自1981年在美国的同性恋患者中发现以来，至今已在150多个国家流行和蔓延，成为人类死亡的第4大原因，是目前全球公共卫生的首要问题。如何更早期、更准确、更简便地检测HIV感染，已成为医学界热议的话题，笔者针对联合检测HIV1/2抗体与P24抗原的先进性和准确性进行研究分析，以期为临床及时诊断治疗提供帮助。
1 材料与方法
1.1 一般资料
选取2018年8月~2019年8月我院收治62例HIV患者作为研究对象，经过ELISA法检测HIV1/2抗体吸光度（OD值）为临界值的患者33例，HIV1/2抗体吸光度大于等于阳性对照的患者29例。
1.2 仪器与试剂
罗氏全自动电化学发光免疫分析仪Elecsys系列，罗氏人类免疫缺陷病毒抗体和抗原P24诊断试剂盒，北京万泰生物药业股份有限公司HIV初筛试剂盒，上海科华生物股份有限公司HIV初筛试剂盒，杭州澳亚生物技术有限公司HIV抗体确证试剂盒（免疫印迹法）。酶标仪、洗板机。
1.3 标本采集
采用标准试管收集患者血液，如分离的血清或血浆中有沉淀出现，先作离心处理再进行分析。
1.4 标本检测
1.4.1 ELISA法检测患者血清HIV－1/2抗体
按照试剂说明书操作，检测为阳性的患者血清于第2天采用不同厂家试剂复检。
1.4.2 收集ELISA法
（1）第1次孵育
30μl标本和一份生物素抗－P24/HIV重组抗原/HIV特异性多肽单克隆抗体一起孵育，加入一份钌复合体标记的抗－P24/HIV、重组抗原/HIV特异性多肽单克隆抗体后，反应形成抗原－抗体复合体。
（2）第2次孵育
加入链亲和素包被的微粒，复合体在链亲和素和生物素相互作用下形成固相。
（3）发光强度检测
将反应液吸入检测池中，检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面，未结合的物质通过ProCell除去，在电极上加以一定的电压，使复合体化学发光，用光电倍增器检测发光的强度。
（4）定标曲线检测
通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果。
2 结 果
经ELISA法筛查患者血清HIV1/2抗体过程中，共检出33例吸光度（OD值）为临界值，29例吸光度大于等于阳性对照的患者；电化学发光法联合检测HIV1/2抗体与P24抗原（HIVCOM则发现，33例OD值为临界的患者中有27例HIV1/2抗体与P24抗原阳性，6例阴性，29例吸光度大于等于阳性对照的患者中，28例HIV1/2抗体与P24抗原阳性，1例阴性。见表1。
表1 HIVCOM与ELISA试验及WB试验结果比较
.png)
3 讨 论
HIV属逆转录病毒科慢病毒属，携带病毒的患者的免疫功能部分或完全丧失，诱发继发性感染、肿瘤等，临床表现多样，病毒具有传播快、致死率高的特点，目前已发现两种HIV病毒种类，分别为HIV1和HIV2，两种病毒结构和传播途径相似，但分布地区不同。HIV2分布于非洲西部、欧洲和美洲部分地区，而HIV1在全球范围内均有分布，通过血液、血制品、性接触传播，婴儿也为HIV病毒感染的多发群体。
目前，HIV早期病毒感染只能通过抗原检测，在感染后可通过检测抗体来进行诊断。P24为抗原检测为抗原检测的主要方式，P24为HIV的病毒衣壳蛋白，由病毒的机构蛋白基因gag基因编码，P24抗原出现于抗体产生之前，并在HIV感染的后期再度上升，在无症状的HIV感染者中，P24抗原阳性者发展为艾滋病的机会比阴性者高3倍。
本研究通过电化学发光法，对HIV1/2抗体与P24抗原进行联合检测是采用来源于聚合酶和HIV1及HIV2膜区域的重组抗原，及抗HIV1P24抗原的特异性单克隆抗体来检测血清的方法，它可以同时检测早期标志物P24抗原及后期标志物抗体，所以无论是敏感性，还是特异性都得到了很大的提高。
本文结果显示，通过HIVCOM与ELISA试验及WB试验结果比较可以看出，HIV的确认试验采用的是免疫印迹试验，该试验检测的也是患者血清中的HIV抗体，但该方法是直接将血清与提纯的HIV蛋白反应，故其灵敏度与特异性要大大高于初筛试验的酶联免疫和荧光免疫对抗体的检测，这个实验的实施步骤较为繁琐，产生较高成本，不适用大批量的患者检测，因此不能普及到临床。
综上所述，电化学发光进行HIV1/2抗体与P24抗原联合检测是目前临床的可取方法，操作步骤便捷，检测结果准确，值得在临床中推广应用。
参考文献
[1]李艳,潘彤,孔伟伟,许闫,韩红梅,袁玉华.3种HIV ELISA检测试剂灵敏度分析[J].生物医学工程与临床,2015,19(1):53-56.
[2]尤佳女,陈兵,许珂.HIV抗体确证实验不确定样本的筛查及随访[J].国际流行病学传染病学杂志[J].2019,46(1):34-38.
[3] 宋淑静,马小亮,刘亚楠,杨晓玲,李娟.区分HIV-1p24抗原和HIV抗体检测方法的临床应用[J].2017,12(7):1089-1091.
论文作者:史萍
论文发表刊物:《医师在线》2020年第01期
论文发表时间:2020/3/5
标签：抗原论文; 抗体论文; 患者论文; 光度论文; 阳性论文; 免疫论文; 血清论文; 《医师在线》2020年第01期论文;