黑龙江省铁力市人民医院 152500
摘要：目的：分析ANA和自身免疫性肝病相关抗体联合检测对自身免疫性肝病诊断的价值。方法：用间接免疫荧光法检测29例原发性胆汁性肝硬化组（PBC组）和53例非自身免疫性肝病组的血清抗线粒体抗体（AMA）、抗核抗体（ANA）；用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测11例自身免疫性肝炎组（AIH组）和53例非自身免疫性肝病组的血清抗平滑肌抗体（ASMA）、抗核抗体（ANA）和肝抗原抗体（SLA）。结果：PBC组的AMA（96.5%），ANA中的核膜型、着丝点型、核多点型的阳性检出率明显高于非自身免疫性肝病组，差异均有统计学意义（P<0.05），其中PBC组1例AMA阴性者ANA为核膜型；AIH组的ASMA（90.9%）、ANA中肌动蛋白型的阳性检出率明显高于非自身免疫性肝病组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：AMA、ASMA对自身免疫性肝病诊断有意义，ANA的某些核型对自身免疫性肝病诊断有提示指导意义，故联合检测能提高自身免疫性肝病检出率。
关键词：自身免疫性肝病；抗核抗体；抗线粒体抗体；抗平滑肌抗体
[Abstract] Objective：to analyze the value of combined detection of ANA and autoimmune liver disease associated antibodies in the diagnosis of autoimmune liver disease. Methods：using indirect immunofluorescence assay in 29 cases of primary biliary cirrhosis group（PBC group）and 53 cases of non autoimmune liver disease group serum anti mitochondrial antibody（AMA），antinuclear antibody（ANA）；by indirect immunofluorescence and Western blot assay in 11 cases of autoimmune liver disease group（AIH group）and 53 cases of non autoimmune liver disease group serum anti smooth muscle antibody（ASMA），antinuclear antibody（ANA）and liver antigen（SLA）. Results：in PBC group，AMA（96.5%），nuclear membrane in ANA，centromere type，multi type nuclear positive rate was significantly higher than that of non autoimmune liver disease group，the differences were statistically significant（P<0.05），including 1 cases of PBC group AMA negative ANA membrane type；AIH group（ASMA 90.9%），actin ANA positive rate was significantly higher than that of non autoimmune liver disease group，the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion：AMA and ASMA have significant significance in the diagnosis of autoimmune liver disease. Some karyotype of ANA can be helpful for the diagnosis of autoimmune liver disease. Therefore，combined detection can improve the detection rate of autoimmune liver disease.
Autoimmune liver disease；antinuclear antibodies；anti mitochondrial antibodies；anti smooth muscle antibodies
自身免疫性肝病是机体自身免疫反应过度造成肝组织损伤，出现肝功能异常及相应症状体征的一组慢性肝脏疾病，包括由肝细胞受累的自身免疫性肝炎（AIH）和主要因肝内、肝外胆管细胞受累的原发性胆汁性肝硬化（PBC）和原发性硬化性胆管炎，三种疾病均可表现为严重的肝脏病变，并可进展至肝硬化[1]。近年来由于临床经验的积累和实验诊断技术的进步，我国人群诊断出此类疾病的人数逐渐增多。本文对笔者所在医院AIH和PBC患者进行了自身免疫性肝病相关抗体和抗核抗体（ANA）的检测。
1 资料与方法
1.1 一般资料
在笔者所在医院选取PBC组29例（已确诊PBC患者，男12例，女17例，均有肝硬化临床表现）、AIH组11例（已确诊AIH患者，男8例，女3例）、非自身免疫性肝病组53例（随机选取非自免肝的其他自身免疫性疾病患者，包括系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿性关节炎）。
1.2 方法
PBC组和非自身免疫性肝病组均用德国欧蒙试剂间接免疫荧光法检测AMA和ANA。AIH组和非自身免疫性肝病组均用德国欧蒙试剂间接免疫荧光法检测ASMA和ANA，用德国欧蒙试剂免疫印迹法检测SLA。
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1.3 统计学处理
采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 AMA和ANA在PBC组和非自身免疫性肝病组的阳性检出率
AMA和ANA中核膜型、着丝点型、核多点型的阳性检出率分别为96.55%、31.03%、34.48%、20.69%，明显高于非自身免疫性肝病组，差异均有统计学意义（P<0.05）。
2.2 ASMA和ANA在AIH组和非自身免疫性肝病组的阳性检出率
AIH组的ASMA、ANA的肌动蛋白型的阳性检出率分别为90.91%、54.55%，明显高于非自身免疫性肝病组，差异有统计学意义（P<0.05）。
3 讨论
PBC是一种慢性肝内胆汁淤积性疾病，多累及中老年女性，绝大多数患者往往在疾病晚期才得以确诊。2000年美国肝病学会（AASLD）制定的PBC诊断指导中认为：抗线粒体抗体（AMA）阳性是本病重要的免疫学诊断指标，95.00%～98.00%的PBC患者AMA抗体均为阳性[2]。本文PBC组AMA阳性率96.55%也验证了这一点。
Sp100抗体靶抗原是分子量为100KD的可溶性酸性磷酸化核蛋白，Sp100抗体在AMA阴性的PBC患者中阳性率为60.00%，显著高于AMA阳性的患者（20.00%），因而对AMA阴性的PBC患者的诊断具有重要意义[3]。本文PBC组ANA核多点型阳性检出率显著高于非自身免疫性肝病组，核多点型靶抗原正是Sp100。
抗gp210抗体的靶抗原位于核孔复合物上的210KD跨膜糖蛋白，所识别的表位是gp210羟基末端上的15个氮基酸残基，该自身抗体被一致认为是PBC的高度特异性抗体，其特异性可高达95.00%。有50.00%AMA阴性的PBC患者血清中都能检测到抗gp210抗体，提示预后不良，可作为PBC患者的预后指标[2]。抗gp210抗体在ANA中呈现核膜型，本文PBC组ANA核膜型阳性检出率显著高于非自身免疫性肝病组，且1例AMA阴性者ANA也为核膜型，本实验如果继续进行，可应用ELISA法检测核包膜蛋白抗体是否为抗gp210抗体。
抗着丝点抗体（ACA）是系统性硬化症的亚型，是CREST综合征的特异性抗体，PBC常与之重叠发生率10.00%～15.00%[4]。本文PBC组ANA着丝点型阳性检出率34.48%，显著高于非自身免疫性肝病组，也高于参考文献数据的15.00%。
综上，PBC相关自身抗体AMA、Sp100抗体、抗gp210抗体分别对PBC确诊和预后有重要意义，联合检测AMA和ANA可增加诊断特异性，也可减少AMA（-）PBC的漏检，ANA的相应荧光核型应引起临床医生的注意而进一步确认。
AIH与自身免疫有关，多发于中、青年女性[5]，以高丙种球蛋白血症、多种自身抗体和汇管区界面为主的肝脏炎症性疾病，易进展为肝硬化，病死率较高，但对免疫抑制剂治疗有效，因此早期诊断十分重要。国际自身免疫性肝炎小组[6]根据血清中自身抗体的种类分为3种亚型：Ⅰ型是抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（ASMA）阳性为主要特征；Ⅱ型是抗肝肾微粒抗体I型抗体（LKM-1）、抗肝细胞溶质抗原I型抗体（LC-1）阳性为主要特征；Ⅲ型是血清中出现抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗体为主要特征。
高滴度的ASMA对Ⅰ型AIH有重要诊断意义，靶抗原分为肌动蛋白和非肌动蛋白[4]，ANA肌动蛋白型可提高ASMA疾病诊断特异性，高滴度ASMA与ANA同时出现对AIH的诊断率达100%[5]。本文可见AIH组ASMA、ANA的肌动蛋白阳性检出率分别为90.91%、54.55%明显高于非自身免疫性肝病组。
SLA/LP是AIH最特异的指标，虽然阳性率只有10.00%～30.00%，但其阳性预示值几乎为100%[7]，对AIH具有很高的特异性，并且在病毒性肝炎患者中表现为阴性反应[8]。本文AIH组SLA阳性率9.09%，与参考文献数据基本相符，但与非自身免疫性肝病组比较，差异无统计学意义（P>0.05），判断原因可能为AIH组病例数较少，理论t值较小，字2检验连续性校正，会在以后的研究继续积累病例。
LKM-1抗体在AIH发病机制中的作用还不甚明了，在慢性丙型肝炎患者血清中约有6.00%的患者可检测出LKM-1抗体[2]，但LKM-1抗体在AIH中的浓度滴度要比慢性丙型肝炎高，通常采用间接免疫荧光法和ELISA检测[9]。本文AIH组未检出LKM-1抗体，可能与AIH在我国主要以I型为主，Ⅱ型AIH非常少见有关。
参考文献：
[1]夏明.从自身免疫性肝病抗体检测看其与病毒性肝病的相关性. 中国民康医学，2014，12（17）：50-51.
[2]周厚清，董敏.自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断价值.中国热带医学，2010，11（2）：159-161.
[3]曾东良，莫宝妹，姜焕好，等.自身抗体检测在慢性肝病诊断中的意义.海南医学，2011，9（20）：117-119.
[4]林英，陆美琴，陈艳清，等.DSG-Ⅰ型肝病治疗仪辅助治护慢乙肝临床观察[J].中医药临床杂志，2012，24（9）：849-850.
[5]倪童天，曲颖，宗蕾，等.BILT肝病治疗仪治疗非酒精性脂肪性肝病32例[J].世界华人消化杂志，2010，18（34）：3699-3703.
[6]高式国.针灸穴名解[M].北京：人民军医出版社，2014，1（3）：186，172-173.
[7]]中华中医药学会内科肝胆病学组，世界中医药联合学会肝病专业委员会，中国中西医结合学会肝病分组.慢性乙型肝炎中医诊疗专家共识（2012年1月）[J].临床肝胆病杂志，2012，28（3）：164-168.
论文作者:邹桂华
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第14期
论文发表时间:2017/10/20
标签：抗体论文; 免疫性论文; 肝病论文; 阳性论文; 检出论文; 高于论文; 患者论文; 《中国误诊学杂志》2017年第14期论文;