商丘医学高等专科学校1、基础医学部病理学教研室 河南 商丘 476100 2、医学技术系3、基础医学部药理学教研室 河南 商丘476100
【摘要】目的：就神经纤毛蛋白1、2在大肠癌组织中的表达与意义进行探讨。方法：采用免疫组化定性检测60例大肠癌患者的癌组织、癌旁组织、正常组织中的NRP-1、2的表达情况，计数PCR值。结果：NRP-1、NRP-2在大肠癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达阳性率分别为71.7%、28.3%、0以及83.3%、16.7%、0，各组之间对比差异较为明显，具有统计学意义（P < 0.05）。PCR在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的计数分别为（35.67±5.27）、（14.28±3.35）、（6.85±1.6），各种间对比，差异较为明显，具有统计学意义（P < 0.05）。结论：NRP-1、2 在大肠癌的血管新生中起重要作用，并且与大肠癌侵袭和转移关系密切，在治疗大肠癌患者时可以结合这点进行治疗。
Abstract Objective: to neuropilin 1,2 and significance in colorectal carcinoma were discussed. Methods: Immunohistochemistry qualitative detection of 60 cases of patients with colorectal cancer tissues, adjacent cancer tissue, normal tissue expression of NRP-1,2, the PCR count value. Results: NRP-1, NRP-2 in colorectal cancer tissues, adjacent tissues, the positive rate of expression in normal tissues were 71.7%, 28.3% respectively, 0 and 83.3%, 16.7%, 0, comparing the differences between the groups more obviously, with statistical significance (P <0.05). PCR in colorectal carcinoma, adjacent tissues and normal tissues were counted (35.67 ± 5.27), (14.28 ± 3.35), (6.85 ± 1.6), among various contrast, the difference is more obvious, with statistical significance (P <0.05). Conclusion: NRP-1,2 play an important role in colorectal cancer angiogenesis, and invasion and metastasis of colorectal cancer are closely related, in the treatment of colorectal cancer can be combined with this treatment.
【关键词】神经纤毛蛋白1、2；大肠癌；表达与意义
【中图分类号】R181.3+5【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)08-0302-01
神经纤毛蛋白（NRPS）是一种非酪氨酸依赖性激酶，是Ⅲ型 Sema 分子与血管内皮生长因子(VEGF)家族分子共享的一类跨膜非信号传导受体[1]。VEGF家族中有两个成员，分别是NRP-1、NRP-2，其中，NRP-1主要表达的作用就是在动脉内皮细胞以及肿瘤血管新生、浸润、转移中的，而NRP-2则是表达在静脉及其淋巴管内皮细胞中，和肿瘤淋巴管新生及淋巴结转移有着较为密切的关系[2]。为此，本文也就神经纤毛蛋白1、2在大肠癌组织中的表达与意义进行了研究，具体研究报告如下。
资料与方法
1.1一般资料
选择我校附属医院2014年1月-2016年1月这期间性手术切除病并且经过病理证实的大肠癌标本作为研究对象，共60例，包括正常组织、癌组织、癌旁组织。其中，男35例，女25女；年龄38-80岁，平均年龄（55.7±10.5）岁，其中50岁以上且含50岁的患者有10例，50岁以下的患者有50例。所有患者在手术治疗之前均为接受化疗、免疫等治疗。
1.2临床病例特征
在60例大肠癌病例中，32例患者原发肿瘤直径≤5cm，28例患者原发肿瘤直径大于5cm；20例患者肿瘤位置在直肠，40例患者肿瘤位置位于结肠；50例患者肿瘤侵及浆膜及浆膜外，10例患者肿瘤侵及浆膜之内；30例患者有淋巴结转移，30例患者无淋巴结转移；20例患者为高分化癌，40例患者为中低分化癌。
1.3方法
SP免疫组织化学试剂盒、二氨基联苯胺（DAB）显色剂、 CD105 抗体都购于北京中杉金桥公司，兔抗人 NRP-1 蛋白多克隆抗体购于 Epitmics 公司，而鼠抗人 NRP-2 蛋白多克隆抗体购于武汉博士德生物工程有限公司。然后再采用显微镜、病例切片机、荧光定量PCR等仪器进行实验。在实验过程中，采用常规的石蜡包埋，4um连续切片，检测的方式采用免疫组化染色法检测NRP1、NRP2，并对其进行荧光定量检测。在免疫组化染色后，在显微镜100倍的视野下寻找微血管分布较为均匀的区域，然后在200倍的视野下选取与肿瘤和结缔组织成分区别较为明显的棕黄色的内皮细胞或者是细胞作为血管计数，记录5个视野内的微血管数，将其平均值作为病例的PCR值。
1.4评价标准
如果肿瘤细胞的胞浆和胞膜出现棕黄色颗粒，则将NRP1、NRP2定义为阳性，然后再对细胞染色强度以及细胞阳性百分率进行表达评定。其中，阳性细胞数小于5%则为0分，5%-25%则为1分，25%-50%则为2分，50%以上则为3分；棕褐色为3分，棕黄色为2分，浅黄色为1分，无染色为0分在评分之后，将这两项相加，0分就代表为阴性（-），1-2分则代表弱阳性（+），3-4分则代表中等阳性（++），5-6分则代表强阳性（+++）。
1.5统计学方法
采用SPSS 18. 0软件对临床数据进行统计分析，计数资料采用X2检验，计量资料采用t检验，数据以（?x±s）表示，P < 0.05为差异有统计学意义。
结果
2.1NRP-1、2在大肠癌组织中的表达及与临床病理参数之间的关系
NRP-1、2在大肠癌组织中可表达于肿瘤细胞胞质和胞膜，也可以分别表达于组织中动脉的内皮细胞或者是淋巴管内皮细胞，呈淡黄至棕黄色颗粒状。60例大肠癌组织中NRP-1阳性表达患者有43（71.7%）例，癌旁组织阳性表达患者为17（28.3%）例，正常组织为0例；癌组织中NRP-2阳性表达患者有50（83.3）例，癌旁组织阳性表达患者为10（16.7）例，正常组织为0例。NRP-1、2在大肠癌组织中阳性表达率明显高于其癌旁组织及其正常组织的阳性表达率，差异较为显著，具有统计学意义（P < 0.05），详情见表1。NRP1、NRP2表达率和患者的年龄、性别等因素无关。
2.2PCR计数与临床病理参数的关系
经过实验证明，计数大肠癌组织的PCR值，60例大肠癌组织中PCR值为（35.67±5.27），癌旁组织中则为（14.28±3.35），正常组织为（6.85±1.6），大肠癌中的PCR值明显高于另外两种，数据差异显著，具有统计学意义（P < 0.05）。浸润到浆膜及以外、有淋巴结转移的患者其PCR的表达增加十分明显。
2.3PCR计数与NRP-1、2表达间的相关分析
大肠癌组织中 NRP-1、NRP-2 二者的表达评分与PCR值均呈现出正相的关系，P<0.05，都和大肠癌组织血管新生有关。
讨论
在消化系统恶性肿瘤中，大肠癌是较为常见的肿瘤之一，发病率一直居高不下，在治疗大肠癌患者时多是采用手术治疗的方式[3]-[5]。现如今，有相关人员认为恶性肿瘤的发生和发展都依赖于肿瘤组织新生血管的形成，为肿瘤生长提供所需的营养物质及氧气，也是影响到肿瘤细胞浸润和转移的重要因素。
本研究主要从蛋白表达水平来探讨 NRP-1、2与大肠癌组织新生血管及浸润转移的关系，经过研究调查显示，在大肠癌组织中，PCR值升高那么 NRP-1、2的蛋白表达水平也会随着而增加，两者之间所呈现出的关系是正相的；同时，大肠癌的浸润深度以及淋巴转移也会影响到 NRP-1、2的表达，但是，NRP1、NRP2表达率和患者的年龄、性别等因素无关。因此，NPRS与大肠癌组织血管新生有着密切的关联，能够促进癌组织的侵袭及转移。为此，在对大肠癌患者进行治疗的过程中，可以针对NPRS的表达对其进行治疗。
综上所述，NRP-1、2 在大肠癌的血管新生中起重要作用，并且与大肠癌侵袭和转移关系密切，在治疗大肠癌患者时可以结合这点进行治疗。
【参考文献】
[1]王琰琰. 老年子宫内膜样癌患者术后组织神经纤毛蛋白1、2和锌指E-盒结合同源异形盒-1的表达及意义[J]. 中国老年学杂志, 2014，56(11):2926-2928.
[2]徐卫国, 王宇鹏, 郭志义,等. 大肠癌组织中神经纤毛蛋白2的表达及其与肿瘤淋巴管生成和淋巴道转移的相关性[J]. 中华医学杂志, 2012, 92(46):382-384.
[3]苗娜(综述), 徐卫国(审校). 神经纤毛蛋白与肿瘤转移及靶向治疗的研究进展[J]. 中国综合临床, 2015(2):3234-3235.
[4]董娟聪, 张海芹, 高辉,等. 神经纤毛蛋白1对非小细胞肺癌放射敏感性的影响[J]. 中华放射医学与防护杂志, 2014, 34(11):120-121.
[5]叶春涛, 嵇鸣, 王臣. 脑胶质瘤CT灌注成像时脑血流容积值与术后组织中癌胚抗原相关细胞黏附分子、神经纤毛蛋白和血管内皮生长因子表达的关系[J]. 中国老年学杂志, 2014,53(16):4676-4677.
论文作者:刘伟1 李静2陈永顺3
论文发表刊物:《中国医院药学杂志》2016年8月
论文发表时间:2016/10/25
标签：组织论文; 大肠癌论文; 患者论文; 纤毛论文; 肿瘤论文; 阳性论文; 蛋白论文; 《中国医院药学杂志》2016年8月论文;