常德市疾病预防控制中心 湖南常德 415000
【摘 要】目的：在高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术下，测定富硒食品中无机硒和有机硒的含量。方法：采用纯水提取富硒食品中的无机硒，通过透析作用分离小分子量的硒化合物与样品基体。结果：硒（IV）和硒（VI）检出限分别为6.67μg/kg和9.95μg/kg。结论：高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术可以满足富硒食品中无机硒和有机硒含量的测定。
【关键词】高效液相色谱；电感耦合等离子体质谱联用技术；富硒食品；
Determination of inorganic selenium and organic selenium in foods rich in selenium by high
performance liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry
Huang?daoping?Shen?ping
Changde?center?for?disease?control?and?prevention，changde，hunan 415000
Abstract：Objective：to determine the content of inorganic selenium and organic selenium in selenium-rich foods by high performance liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry（ICP-MS）. Methods：inorganic selenium was extracted from selenium-rich food by pure water，and low molecular weight selenium compounds and sample matrix were separated by dialysis. Results：the detection limits of selenium（IV）and selenium（VI）were 6.67 μ g / kg and 9.95 μ g / kg.，respectively. Conclusion：high performance liquid chromatography（HPLC）coupled with inductively coupled plasma mass spectrometry（ICP-MS）can be used for the determination of inorganic selenium and organic selenium in se-enriched foods.
硒是人体必需的微量元素之一，市场上很多富硒食品都属于人工添加，无法保证食品的安全性以及可靠性，因此，强化对富硒食品中无机硒和有机硒的含量测定非常必要。
1.材料与方法
1.1材料
1.1.1样品来源
所有样品均来自于各大超市。普通样品包括：矿泉水、大米以及红茶等。富硒样品包括：富硒大米、富硒西兰花、富硒鸡蛋等标有“富硒”字样的食品。
1.1.2主要仪器与试剂
YM-T2000CT型多用途恒温超声提取机（上海豫明仪器有限公司）、旋转蒸发仪等。硒（IV）标准溶液（1000μg/ml）、硒（VI）标准溶液（878μg/ml）等均购自美国 InorganicVentures公司。
1.2方法
1.2.1样品制备
对试验的样品进行烘干、粉碎，再进行筛选，然后精准称量5g放于离心管中，加入20 ml的超纯水进行混匀，放到90℃水浴震荡，先进行30min稳定提取之后，再利用超声进行20min的提取。提取完成后，将提取液放进透析袋中，并在透析袋中浸入100 ml的纯水，浸泡8h，收集全部渗透液，将透析袋再次浸入100 ml的纯水中重复上述操作，对2次透析液进行收集合并，利用旋转蒸发仪进行浓缩，定容到10 ml进行检测试验。
1.2.2仪器条件
色谱条件：Hamilton PＲP-X100分析柱和预柱（250mm×4mm，10μm）；流动相为5mmol/L柠檬酸铵中加2%甲醇，柠檬酸和氨水准确调节pH=4.9，流速1ml/min，进样量100μl。
2.结果与分析
2.1流动相的选择及其酸度的影响
本试验流动相为5mmol/L柠檬酸铵，并在其中加入了2%的甲醇，实验取得了良好的效果，对硒酸根和亚硒酸根进行了有效分离。由于pH条件不同，各种硒形态的离子存在形式也存在很大的差异，故而流动相的pH值对硒形态的分离效果有着非常严重的影响，具体如图1。
图 1 流动相pH值对5种硒形态保留时间的影响
2.2样品的测定
在具体的试验过程中，采用总硒含量减去无机硒含量的方法，来对硒食品中有机硒的含量进行测算。试验中，通过对市场上购买的硒食品进行测量，具体如表1所示。通过对下表的进一步分析可知，针对总硒含量的测定，选择了GB5009.93—2010方法，然后通过两次的试验和测定，最终得出的结果均值。而针对无机硒的含量，也是应用同样的手段，经过了三次的试验所得出的均值。
表 1 富硒食品检测结果
3、讨论
在本次的研究和试验所应用方法可以对硒（VI）含量进行测定，有效防止了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定无机硒需要处理转换硒（VI）的过程中由于转换效率会影响试验的灵敏度。本次的研究和试验，通过采用透析方法，可以降低大分子干绕，样品提高检测灵敏度，更有利于减少和消除对复杂的基体样品检测过程中的干扰。由于多方因素的制约，本试验也存在如透析效率等一些不利的影响因素，在今后的试验研究过程中，这一方法仍然需要进一步的优化和改进。
本方法通过建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用方法，将食品中不同的硒形态进行有效分离，能较为准确的测定待测食品中总硒和无机硒的含量，最终准确得出富硒食品中有机硒含量。由于市面上存在人工添加硒元素的富硒产品（以无机硒为主），采用本试验建立的方法可以准确测定富硒食品中无机硒和有机硒的含量，因此能为富硒产品质量甄别和监督提供合理依据，有利于市场的稳定和发展。
参考文献：
[1]张颖，杨清清，宋毅，等.高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定富硒食品中无机硒和有机硒的含量[J].中国食品卫生杂志，2017，29（12）：1181-1185.
[2]熊珺，覃毅磊，龚亮，等.超声辅助酶法提取-高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用分析食品中无机硒和硒氨基酸6种硒形态[J].食品科技，2016，28（12）：266-272.
[3]仲娜.电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）及高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术（HPLC-ICP/MS）用于富硒生物样品中硒的化学形态组成及分布规律研究[D].中国海洋大学，2018.
[4]吕昭玮，胡亚漉.高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用（HPLC-ICP-MS）技术应用于人工养殖富硒海带中硒的研究[J].食品界，2017，28（12）：1146-1147.
[5]曹玉嫔，闫丽珍，黄红丽，等.超声辅助提取结合高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术测定牛蒡和三七中硒形态[J].分析化学，2018，23（19）：1329-1334.
论文作者:黄道平,沈平
论文发表刊物:《中国结合医学杂志》2019年2期
论文发表时间:2019/4/24
标签：等离子体论文; 色谱论文; 高效论文; 食品论文; 电感论文; 无机论文; 含量论文; 《中国结合医学杂志》2019年2期论文;