一、人胎胰腺促性腺激素释放激素免疫反应细胞的形态测量分析（论文文献综述）
王玉辉[1]（2021）在《渐变高低温对黑线仓鼠KiSS-1/GPR54基因表达和免疫功能的影响》文中研究指明动物的免疫系统能防御环境中病原体的攻击,决定着动物的存活。动物的繁殖是非常消耗能量的生理过程,是重要的适合度组分。环境温度是影响动物免疫和繁殖的重要生态因子。前期研究发现,动物的免疫与繁殖能力均存在季节性变化,然而在高温、低温条件下免疫与繁殖之间的关系一直不清楚。本文以分布于中国北方,具有季节性繁殖特点的黑线仓鼠（Cricetulus barabeniss）为研究对象,通过逐渐降低或升高温度以模拟温度的季节变化,然后检测免疫学指标包括天然免疫、细胞免疫、体液免疫和细胞因子等以反映生存能力,检测下丘脑、卵巢、子宫中KiSS-1、Gn RH和GPR54繁殖相关基因的表达,以反映繁殖能力,主要结果如下:1.低温不影响黑线仓鼠的体重、体温,低温组摄食量从21天开始显着增加,低温组小肠及内容物、结肠及内容物也显着增加。黑线仓鼠的体重、体温也不受高温的影响,高温组摄食量从21天开始显着降低,高温组胃及内容物显着增加。高低温对胸腺和脾脏等器官鲜重均无显着性影响。2.低温不影响黑线仓鼠的血糖水平、雌二醇（E2）和皮质酮（CORT）浓度,其血糖水平、血清瘦素和皮质酮浓度也不受高温的影响,但低温组瘦素（LEP）浓度显着增加,高温组血清雌二醇浓度显着低于其他两组。3.低温降低了黑线仓鼠的血清杀菌能力,但不影响白细胞总数、PHA（植物血球凝集素）反应和血清Ig G、Ig M浓度,IL-4、IFN-γ、TNF-α含量也不受低温的影响。高温显着降低黑线仓鼠的血清Ig M浓度,24h后的PHA反应显着增强,白细胞总数、血清Ig G浓度、血清杀菌能力、血清IL-4、IFN-γ、TNF-α含量不受高温影响。高低温对黑线仓鼠血清IL-2含量具有显着性影响。相关性分析结果显示:瘦素浓度与血清IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α含量呈显着正相关。雌二醇浓度与24小时后的PHA反应呈显着负相关,与IL-2、TNF-α呈显着正相关,这表明瘦素、雌二醇可能促进IL-2的分泌,高温条件下黑线仓鼠PHA反应的增强可能与雌二醇浓度的下降有关。4.低温不影响黑线仓鼠下丘脑中KiSS-1、Gn RH、GPR54基因的表达,卵巢和子宫中KiSS-1、Gn RH、GPR54基因表达也不受低温的影响。高温不影响黑线仓鼠下丘脑中KiSS-1、Gn RH、GPR54基因的表达,卵巢和子宫中KiSS-1、Gn RH、GPR54基因的表达也不受高温的影响。血糖与下丘脑GPR54、卵巢GPR54呈显着正相关,提示血糖可能促进下丘脑、卵巢中GPR54基因的表达。5.相关性分析发现,天然免疫与下丘脑Gn RH表达呈显着正相关、与卵巢Gn RH表达呈显着负相关,Ig M与下丘脑Gn RH表达呈显着负相关,IL-2与子宫KiSS-1表达呈显着正相关,IL-4与卵巢KiSS-1表达呈显着正相关,其他免疫指标如天然免疫、PHA反应、体液免疫与下丘脑、卵巢和子宫中KiSS-1、Gn RH以及GPR54基因的表达均无相关性,这些结果暗示在渐变高低温条件下免疫和繁殖之间可能不存在权衡。总之,我们的研究结果表明低温抑制了黑线仓鼠的先天免疫,高温抑制了黑线仓鼠的体液免疫,增强了24h后的细胞免疫。高低温不影响黑线仓鼠KiSS-1、Gn RH、GPR54繁殖相关基因的表达,并且渐变高低温条件下免疫和繁殖之间可能不存在权衡。
杨海燕[2]（2020）在《低水平血清泌乳素与PCOS患者代谢紊乱和IVF-ET结局的关系及相关机制研究》文中研究表明第一章低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者代谢紊乱的相关性研究研究背景:泌乳素（prolactin,PRL）除了在调节乳房发育和泌乳方面起良好作用外,已有其他300多种独立功能得到证实。研究表明PRL在机体代谢中起重要的调控作用,但是处于正常生理范围内和超出正常生理范围时血清PRL和代谢风险的关系是不一样的。超出生理范围的高PRL血症患者的PRL水平越高,越容易出现胰岛素抵抗、肥胖、动脉粥样硬化及骨质疏松等代谢问题;但是当血清PRL处于正常生理范围之内时,它和代谢风险的关系则会变得相反,PRL水平越低,发展成代谢综合征和2型糖尿病等不良代谢结局的可能性反而越大。也就是说血清PRL水平过高或过低都会引起代谢紊乱,但是处于正常生理范围内的低水平血清PRL和代谢紊乱的关系往往容易被忽视。多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是育龄期妇女最常见的内分泌代谢紊乱性疾病,与胰岛素抵抗、糖耐量异常、高血脂、高血压和心血管疾病等的发生密切相关,发病机制至今还不清楚。由于血清PRL在机体代谢中起重要的调控作用,PRL和PCOS患者代谢紊乱的相关性值得进一步研究和探讨。PCOS患者常常伴发高PRL血症,高PRL血症与PCOS代谢紊乱的相关研究已经很多,在临床上也已经备受关注,但是血清PRL处于正常生理范围内的那部分PCOS患者的PRL水平与代谢的关系却从未被关注。当处于正常生理范围之内时,PCOS患者的血清PRL水平与正常人群相比究竟如何及其与代谢紊乱究竟存在怎样的关系不得而知,至今也未见报道。本研究首次对这些问题进行探讨,以血清PRL水平处于正常生理范围内的大样本的PCOS不孕患者作为研究对象来分析这些患者的血清PRL水平和正常人群的差异及其与代谢紊乱的相关性,从而为今后研究PRL的代谢调控机制和PCOS的发病机制提供理论依据。研究目的:回顾性分析PCOS不孕患者的血清PRL水平及其与代谢紊乱的相关性。研究方法:以2007年1月至2018年8月在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心第一次行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）治疗并且血清PRL水平在正常生理范围内的2052例PCOS不孕患者作为研究对象,以同期9696例血清PRL水平也在正常生理范围内的输卵管性不孕患者作为对照,回顾性分析这11748例不孕患者的血清PRL、血压、体重指数（body mass index,BMI）、基础内分泌激素、空腹血脂、空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、肝功能及甲状腺激素等指标的水平;再对其中792例有完整腰围、臀围、空腹胰岛素（fasting insulin,FINS）资料的PCOS不孕患者的腰围、臀围、FINS、稳态模式评估法测定胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）及HOMA-β细胞功能指数（HOMA-β）等指标进行回顾性分析。研究结果:1、对2052例PCOS不孕患者的回顾性分析发现,控制BMI的影响后,不同年龄段的PCOS不孕患者的血清PRL水平均明显低于对照组（P<0.05）。再以血清PRL四分位数为标准分组后比较各项指标发现,PCOS不孕患者的血清PRL水平越低,促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、LH/卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine ainotransferase,ALT）、γ-谷氨酰转移酶（glutamyltransferase,γ-GGT）、血清游离三碘甲腺原氨酸（free triiodothyronine,FT3）及 FT3/血清游离甲状腺素（free thyroxine,FT4）越高,FPG、血清促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone,TSH）及FT4越低（P<0.05）。纠正年龄和BMI影响后的多元线性回归分析发现血清PRL与FPG、TSH及FT4正相关,与LH及LH/FSH负相关（P<0.05）。2、对792例PCOS不孕患者的回顾性分析则发现,血清PRL水平越低,PCOS不孕患者的腰围、臀围、FINS、HOMA-IR及HOMA-β则越高（P<0.05）。纠正年龄和BMI影响后的多元线性回归分析发现血清PRL与FINS、HOMA-IR及HOMA-β 负相关（P<0.05）。结论:当处于正常生理范围之内时,PCOS不孕患者的血清PRL水平要明显低于正常人群。而低水平血清PRL可能是增加PCOS不孕患者代谢风险的一个重要因素,也是预测胰岛素抵抗和β细胞功能障碍的良好指标。第二章 低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者体外受精-胚胎移植治疗结局的相关性研究研究背景:内分泌及代谢紊乱与流产、死胎等不良孕产史密切相关。研究表明糖、脂等代谢的异常不仅能改变血清生化组分,还会在卵泡液这一微环境层面产生负面影响,最终降低临床妊娠率。泌乳素（PRL）在机体代谢调控中起重要作用,超出正常生理范围的高PRL血症以及正常生理范围内低水平血清PRL都会对代谢产生不良影响,那么过高或过低的血清PRL是否也可能因此对妊娠结局产生不良影响?是否也可能因此影响体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的治疗结局?到目前为止这些问题从未被关注,也未见相关研究报道。高PRL血症可通过下丘脑-垂体-卵巢轴影响卵泡发育和黄体功能从而对妊娠结局产生不良影响,已在临床上受到足够的重视和有效的治疗,而正常生理范围内低水平血清PRL与妊娠及IVF-ET治疗结局的相关性往往容易被忽视,更值得关注和进一步的研究探讨。我们的前期临床研究已经证实多囊卵巢综合征（PCOS）不孕患者的血清PRL水平低于正常人群,并与代谢紊乱密切相关。本研究首次对正常生理范围内低水平血清PRL和PCOS不孕患者及输卵管性不孕患者这两类比较有代表性的不孕人群的IVF-ET治疗结局的可能关系做初步探讨,希望为今后探索有效的改善妊娠结局的治疗方案提供理论依据。研究目的:回顾性分析正常生理范围内低水平血清PRL对PCOS不孕患者及输卵管性不孕患者IVF-ET治疗结局的影响。研究方法:以2007年1月至2018年8月在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心第一次行IVF-ET治疗并均行新鲜胚胎移植、血清PRL水平均在正常生理范围内的1414例PCOS不孕患者和7430例输卵管性不孕患者作为研究对象,回顾性分析血清PRL水平与这些不孕患者IVF-ET治疗结局的关系。研究结果:1、以血清PRL中位数为标准对1414例PCOS不孕患者分组后比较各项指标发现,血清PRL水平越低的患者血清LH、促性腺激素（gonadotropin,Gn）使用总量和使用天数越大,人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）注射日血E2水平越低,差异均有显着性（P<0.05）。而获卵数、卵子成熟率、临床妊娠率、胚胎种植率及活产率随着血清PRL水平的降低呈现出下降的趋势,流产率则呈现出升高的趋势,但是差异均没有达到显着性。当以活产率作为最终的观察指标,在纠正年龄和BMI等多个影响因素后发现PCOS不孕患者的活产率与T负相关,与优质胚胎数正相关,获卵数在7-15个之间的不孕患者活产率最为理想（P<0.05）。而血清PRL水平虽然与活产率呈现出负相关的趋势,但是差异没有达到显着性。2、以血清PRL中位数为标准对7430例输卵管性不孕患者分组后比较各项指标发现,血清PRL水平越低的患者血清睾酮（testosterone,T）、窦卵泡计数（antral follicle count,AFC）、hCG 注射日血雌二醇（estradiol,E2）、获卵数、卵子成熟率、优质胚胎数、临床妊娠率、胚胎种植率及活产率越低,血清LH、Gn使用总量及流产率则越高,差异均有显着性（P<0.05）。当以活产率作为最终的观察指标,在纠正年龄和BMI等多个影响因素后发现,输卵管性不孕患者的活产率与年龄及T负相关,与AFC及优质胚胎数正相关（P<0.05）。而血清PRL水平虽然与活产率呈现出负相关的趋势,但是差异没有达到显着性。结论:正常生理范围内低水平血清PRL在一定程度上影响了 PCOS不孕患者和输卵管性不孕患者的超促排卵反应性和实验室结果,并和活产率呈现出负相关趋势,但是还没有足够的证据表明低血清PRL是活产率的独立影响因素。低血清PRL与IVF-ET治疗结局的关系还需要进一步研究证实。第三章泌乳素及其受体介导JAK2/STAT5通路对脂肪代谢的影响及机制研究研究背景:泌乳素（PRL）通过和受体结合启动相应的细胞内信号传导通路对目标基因产生作用,从而实现它众多的生物学功能。研究表明PRL与代谢密切相关,但是由于PRL受体的的多样性以及不同类型的受体具有不同的调控机制等原因导致PRL和受体结合后启动的信号通路及调控方式极其复杂。PRL及其受体具体通过什么途径来调控代谢到目前为止都还不清楚。酪氨酸激酶（Janus kinase,JAK）/转录激活因子（signal transducer and activators of transcription,STAT）通路是PRL第一个确定的信号转导通路,也是其他众多细胞因子和生长因子信号传导的共同途径,广泛参与细胞增殖、分化及凋亡等重要生物学过程,并在能量代谢中起重要调控作用。PRL的代谢调控机制至今还不清楚,JAK/STAT通路又和代谢密切相关,所以PRL及其受体介导的JAK/STAT信号通路对代谢的调控作用成为我们关注的重点。既往研究发现PRL能够激活JAK2/STAT5通路调节乳腺上皮细胞乳糖、乳脂和乳蛋白的合成及分泌,但是相关研究比较零星,并主要集中在乳腺发育和乳腺癌研究方面。此外,关于PRL调控乳脂等相关基因转录作用的研究一直集中在乳腺上皮细胞上,对脂肪细胞代谢的研究却几乎未被关注。脂肪组织在机体内分泌和代谢中起重要作用,选择脂肪细胞进行PRL及其受体介导JAK2/STAT5信号通路调节代谢相关机制的研究可能更有意义。另外,在PRL/PRLR介导的JAK2/STAT5信号传导通路中会产生一种剂-效关系特性,而在不同的物种、组织和细胞中PRL通过JAK2/STAT5通路产生正常效应所需要的浓度都不一样,但是具体什么物种、什么组织和什么细胞产生正常效应需要多少PRL浓度都还不清楚,仅有的几项零星的研究也均在摸索过程中,值得进一步研究探讨。此外,JAK/STAT信号通路的异常激活在某些疾病的发生过程中可能存在关键的调控作用,比如肿瘤和白血病。过高或过低的血清PRL都会引起PCOS患者代谢紊乱,它们是否有可能通过JAK2/STAT5通路的异常激活在PCOS的发生发展中起作用也还不清楚,相关研究未见报道。胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）是PCOS代谢异常的基本特征和病理生理过程的中心环节,本研究利用成熟脂肪细胞建立IR模型,首次尝试用不同浓度RPL及PRLR过表达处理IR模型细胞来观察JAK2/STAT5信号通路的变化以及对脂代谢的影响,仅希望能对RPL与脂代谢的关系及相关机制做一个简单粗略的探讨,为将来更好的探索PRL的代谢调控机制和PCOS的发病机制以及代谢相关性疾病的有效临床治疗方案指明一个研究的方向。研究目的:探讨PRL及其受体介导JAK2/STAT5通路对脂肪代谢的影响及作用机制。研究方法:通过油酸诱导分化,将SW872前脂肪细胞诱导成成熟脂肪细胞,并利用油红0进行鉴定,然后通过油酸孵育建立IR模型。分别用高、中、低浓度的PRL干预IR模型细胞,Western blot检测干预24h和48h后PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5及p-STAT5蛋白的表达情况,甘油三酯（troglyceride,TG）试剂盒检测细胞内TG的含量。再构建PRLR过表达载体,将载体及空载转染至成熟脂肪细胞中,Western blot验证转染效率。随后油酸孵育 24 小时进入 IR 状态。Western blot 检测 PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5 及p-STAT5蛋白的表达,TG试剂盒检测细胞内TG的含量。研究结果:油红0染色结果显示高浓度和中浓度PRL干预组的脂质含量明显高于IR模型组（P<0.05）。PRL干预24h和48h后细胞中的TG含量与模型组相比显着增加,且随着PRL浓度的增加,TG含量也随之增加（P<0.05）。Western blot结果显示,在PRL干预24h和48h时,与对照组相比,IR模型组中PRLR、p-JAK2和p-STAT5表达量显着降低;与模型组相比,高浓度PRL干预组中PRLR、p-JAK2和p-STAT5表达量显着增加（P<0.05）。过表达PRLR显着增加IR模型中TG含量（P<0.05）。Western blot结果显示,与对照组相比,IR模型组中PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5和p-STAT5表达水平显着降低;与模型组相比,PRLR过表达组中PRLR、JAK2、p-JAK2、STAT5和p-STAT5表达水平显着增加（P<0.05）。研究结论:PRL及其受体与脂肪代谢有关。JAK2/STAT5信号通路在脂肪代谢中起重要的调控作用。PRL干预及PRLR过表达可以通过JAK2/STAT5通路的异常激活增加脂肪细胞中TG的沉积,影响脂肪代谢。但是PRL在脂肪细胞中产生正常效应所需要的浓度以及PRL及其受体介导的JAK2/STAT5通路的异常激活与PCOS发生发展的相关性都还需要更深入的研究来探讨。
刘亚红[3]（2020）在《环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨》文中认为背景镍（Nickel,Ni）暴露通过对水、空气、土壤的污染日渐成为威胁生态环境和人类健康的研究热点,由于其对机体内分泌代谢状态的干扰效应,已被列入环境内分泌干扰物（Environmental endocrine disrupting chemicals,EEDs）之一。内分泌腺体特别是甲状腺和胰腺通过严密反馈机制调控着机体三大物质的代谢平衡,是能量代谢的核心调控器官。Ni对机体代谢调控的干扰往往与胰腺、甲状腺组织的细胞凋亡和增殖紧密相关。目的本研究通过设计一系列不同剂量硫酸镍（Nickel sulfate,NiSO4）处理的细胞模型,探讨Ni致人甲状腺滤泡上皮细胞（Nthy-ori 3-1,Nthy）及胰腺导管上皮细胞（h TERT-HPNE,HPNE）损伤的剂量及时间效应关系,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,并通过检测线粒体膜电位,探讨Ni所致人Nthy细胞及人HPNE细胞凋亡与线粒体凋亡通路之间的相关性。然后构建不同剂量NiSO4染毒的大鼠动物模型,通过检测Ni染毒后大鼠甲状腺和胰腺的功能及组织形态学的变化,评估Ni对大鼠代谢损伤的毒性效应;并同步检测Ni暴露环境下大鼠甲状腺及胰腺组织细胞凋亡相关指标在mRNA及蛋白质水平的表达,以期阐明Ni暴露代谢损伤发生发展的可能机制,为寻找有效的预防和干预Ni代谢损伤提供科学依据。方法本研究采用人Nthy细胞及HPNE细胞系,通过CCK-8法检测不同剂量NiSO4对人Nthy及HPNE细胞活力的影响,筛选NiSO4的适宜损伤浓度及损伤时间,构建Ni损伤细胞模型。Hoechst 33258荧光染色法、Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术观察Ni对人Nthy细胞和HPNE细胞凋亡的影响。利用流式细胞术及激光共聚焦显微镜测定干预前后细胞线粒体膜电位变化,探讨Ni损伤人Nthy及HPNE细胞与线粒体凋亡的关系。将32只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为四组:对照组（N）、低剂量组（L）、中剂量组（M）、高剂量组（H）,每组8只,对照组腹腔注射5 ml/kg生理盐水,染毒组分别等体积（5 ml/kg）腹腔注射2.5、5.0、10.0 mg/kg NiSO4,1次/日,连续40日。观察亚慢性NiSO4染毒后大鼠一般情况、体重变化、甲状腺功能、胰岛功能、甲状腺及胰腺组织形态学变化,并采用实时荧光定量PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）及免疫组化法检测甲状腺及胰腺组织凋亡相关因子（Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas）mRNA和蛋白水平的表达。结果1.NiSO4对人Nthy细胞及HPNE细胞的活力有较为明显的时间依赖效应和剂量反应关系。随着NiSO4的暴露剂量升高或者暴露时间延长,细胞活力明显降低,细胞形态变圆,贴壁细胞数目减少,出现细胞凋亡,甚至死亡。2.用不同浓度的NiSO4处理人Nthy细胞和HPNE细胞24h及48h,24h-640μM、48h-480μM及48h-640μM浓度可引起人Nthy细胞细胞凋亡增加,48h-640μM浓度可引起HPNE细胞凋亡增加,而各浓度组均能降低其线粒体膜电位水平,影响人Nthy细胞及HPNE细胞能量代谢。3.连续腹腔注射NiSO4 40天后,高剂量组大鼠甲状腺组织及胰腺组织病理均出现明显改变,且NiSO4导致大鼠的甲状腺功能及胰腺功能异常。与对照组相比,各染毒组大鼠的游离T4（Free thyroxine,FT4）和促甲状腺激素（Thyroid Stimulating Hormone,TSH）均降低,差异有统计学意义（P<0.05）,但各组间游离T3（Free triiodothyronine,FT3）差异无统计学意义（P>0.05）。对胰岛功能的影响,与对照组比较,中、高剂量NiSO4染毒后,大鼠随机血糖随NiSO4剂量增高而增高,差异有统计学意义（P<0.05）,而血清胰岛素及C肽水平均下降（P<0.05）。4.NiSO4染毒后,大鼠甲状腺组织Caspase-3的mRNA表达水平较对照组升高,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量NiSO4染毒组Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平均高于其它各组,差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组相比,高剂量NiSO4染毒组Bcl-2的mRNA表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组和各NiSO4染毒组Bax基因的表达水平无统计学差异（P>0.05）。Bcl-2/Bax mRNA比值随着NiSO4染毒剂量的增加而下降,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,高剂量NiSO4组Fas的mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,并显着高于其他剂量组（P<0.01）。大鼠甲状腺Caspase-3、Fas和Bax蛋白表达水平与mRNA表达一致。低、中、高剂量NiSO4组的Bcl-2蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,但各剂量NiSO4染毒组之间差异无统计学意义（P>0.05）。5.中、高剂量NiSO4染毒组大鼠胰腺组织Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均显着高于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平仅在高剂量NiSO4染毒组显着高于其它各组（P<0.01）。与对照组相比,各剂量NiSO4染毒组Fas的mRNA表达水平显着增加（P<0.01）,中、高剂量NiSO4染毒组Bcl-2的mRNA表达显着降低（P<0.01）。中、高剂量NiSO4染毒组Fas蛋白表达水平均显着高于对照组（P<0.01）,各组间Bcl-2的蛋白表达水平无统计学差异（P>0.05）。Bax mRNA及蛋白表达水平与对照组相比均无统计学差异（P>0.05）。Bcl-2/Bax的mRNA比值随着暴露剂量的增加而显着降低,差异有统计学意义（P<0.01）,而仅高剂量NiSO4染毒组Bcl-2/Bax蛋白比值低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.NiSO4通过降低人Nthy细胞及HPNE细胞的线粒体膜电位水平致使细胞发生凋亡,且凋亡作用的产生呈现剂量依赖性,从而影响人Nthy细胞及HPNE细胞能量代谢。2.NiSO4作为内分泌干扰物可通过细胞凋亡诱导大鼠甲状腺及胰腺损伤,导致大鼠甲状腺功能和胰岛功能异常。3.NiSO4可能通过介导Caspase依赖线粒体凋亡途径和Fas信号通路诱导大鼠甲状腺组织及胰腺组织发生细胞凋亡。
张玉林[4]（2020）在《人羊膜上皮细胞修复大鼠卵巢功能不全的实验研究》文中研究说明每年全球范围内有多达百万女性罹患癌症,其中大约10%的女性患者在育龄期。化学治疗的应用使癌症患者的生存率明显提高,约90%年轻的早期癌症患者在治疗后可以存活,但是化学治疗引起的远期并发症的风险却不可忽视。其中,最突出的远期影响包括因为化学治疗所引起的原发性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency,POI）或卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）所致的早绝经和不育,极大地影响育龄期患者的生存质量。因此,在不妨碍癌症治疗的原则上,提高此类患者的生存质量、保护卵巢功能和生育力已经成为临床上医生与患者共同面临的难题。基础实验及临床病例表明,在杀灭癌症细胞的同时,许多化学治疗药物可以不同程度地损伤卵巢功能、使卵巢结构紊乱、卵巢纤维化明显、影响卵泡的启动、生长发育及成熟过程,但其具体机制仍不十分清楚。目前,临床上预防或者治疗化疗相关卵巢功能不全主要的方法有:促性腺激素释放激素类似物治疗、性激素替代治疗及生育力冷冻保存技术。促性腺激素释放激素类似物治疗预防化疗引起的卵巢功能不全目前只在乳腺癌中观察到有一定效果;性激素替代治疗只能改善患者的围绝经期症状,不能改善卵巢功能及生育能力;而生育力冷冻保存技术受到患者年龄、身体状态及婚姻状态等的制约,因此每种方法都有其局限性,尚不能广泛应用于临床。随着再生医学的兴起及发展,干细胞已经在多种疾病中证实有组织修复及组织再生的作用。目前,多个研究表明,干细胞移植在改善卵巢功能、修复卵巢组织结构及促进生育力方面具有一定的作用,但其机制仍不清楚。近年来,人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells,h AECs）的发现及研究为再生医学领域指引了新的研究方向。由于羊膜为医疗废物、来源丰富、获取简单、无道德伦理的制约,且h AECs具有一定干细胞特性、免疫原性低且未发现致瘤性,因此h AECs在再生医学领域具有广阔的应用前景,有望成为修复化疗所致卵巢功能不全的新方法。据报道,h AECs可以分泌多种细胞因子,这些细胞因子可能参与增殖、免疫调节、细胞凋亡和血管生成过程,并可以通过静脉移植、原位注射或腹腔注射h AECs或h AECs条件培养基改善卵巢功能,但其具体机制仍不十分清楚。第一部分 hAECs的原代细胞提取及生物学特性目的提取h AECs并培养、鉴定,为后续实验提供细胞移植的种子细胞。方法征得孕妇及家属同意并书面签署知情同意书后,收集经剖腹产分娩的羊膜组织,采用胰酶消化法获取h AECs;通过观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物的表达,对分离培养的h AECs进行鉴定;通过细胞免疫荧光检测h AECs表达卵泡刺激素受体（Follicle-stimulating hormone receptor,FSHR）的情况。结果分离纯化的h AECs呈铺路石样,细胞大小及形态均一,呈圆形或多角形,并呈集落样生长;4代后细胞渐呈梭形,细胞增殖减慢;h AECs高表达干细胞标志物（SSEA4,Nanog）、上皮细胞标志物（CD324,CD326）;而低表达间充质细胞标志物（CD105）、造血干细胞标志物（CD34、CD45）和免疫学标志物（HLA-DR）;h AECs可以表达颗粒细胞的标志物FSHR。结论h AECs来源丰富,具有干细胞及上皮细胞特性,低免疫原性,无成瘤性,在干细胞治疗领域中具有广阔的应用前景。第二部分 环磷酰胺诱导大鼠卵巢损伤模型的建立目的建立稳定的环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的动物模型。方法将8-10周龄有规律动情周期的SD大鼠随机分为4组（环磷酰胺注射第1天记为D1）:对照组（D1-D15 0.9%生理盐水）;低剂量环磷酰胺损伤组（D1 50mg/kg,D2-D15 8mg/kg）;中剂量环磷酰胺损伤组（D1 100mg/kg,D2-D15 8mg/kg）;高剂量环磷酰胺损伤组（D1200mg/kg,D2-D15 8mg/kg）。（1）观察大鼠一般状态,称量体重及卵巢重量,绘制大鼠的生存曲线;（2）检测大鼠的动情周期改变,分析环磷酰胺对大鼠卵巢的毒性作用;（3）化学发光法检测化疗结束后3天及2周的血清雌激素E2水平,了解环磷酰胺对大鼠内分泌功能的作用;（4）Elisa检测化疗结束后2周的血清AMH及FSH水平,了解环磷酰胺对大鼠内分泌功能的作用;（5）HE染色观察大鼠卵巢组织学改变及卵泡计数,评估环磷酰胺对卵巢组织学的损伤情况及对卵泡的作用。结果（1）低剂量环磷酰胺组大鼠体重及卵巢重量降低,死亡率低,中、高剂量环磷酰胺组大鼠死亡率高,故选用低剂量环磷酰胺构造卵巢功能不全的模型;（2）模型组大鼠的血清雌激素E2水平较对照组在化疗结束后3天有所下降,在化疗结束后2周明显下降;（3）模型组大鼠的血清AMH较对照组在化疗结束后2周明显下降,而FSH水平较对照组在化疗结束后2周明显上升;（4）模型组及对照组大鼠在化疗开始前均有规律的动情周期,化疗开始后1周,模型组约54%的大鼠出现异常的动情周期,化疗结束后1周模型组仍有46%的大鼠表现为异常的动情周期,而此过程对照组大鼠均有正常的动情周期;（5）环磷酰胺给药后卵巢组织损伤明显,卵巢纤维化明显,模型组较对照组窦前卵泡、窦卵泡明显减少,而闭锁卵泡显着增加。结论低剂量环磷酰胺经腹腔注射（D1 50mg/kg,D2-D15 8mg/kg）,可以建立稳定的环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的模型。第三部分 hAECs修复大鼠卵巢卵巢功能不全的有效性研究目的探究h AECs修复环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的有效性及对生育力的影响,并初步探究h AECs治疗的机制。方法选用PHK26荧光染料成功标记第1代h AECs,用于h AECs移植的体内追踪。将8-10周龄的SD大鼠纳入实验,将大鼠随机分为4组,以第1次腹腔注射环磷酰胺或生理盐水记为第1天（D1）。对照组（D1-15腹腔注射0.9%生理盐水,D16尾静脉注射PBS,双卵巢原位注射PBS）;模型组（D1-15腹腔注射环磷酰胺,D16尾静脉注射PBS,双卵巢原位注射PBS）;h AECs经尾静脉移植组（D1-15腹腔注射环磷酰胺,D16尾静脉注射h AECs,双卵巢原位注射PBS）;h AECs经卵巢原位移植组（D1-15腹腔注射环磷酰胺,D16尾静脉注射PBS,双卵巢原位注射h AECs）。（1）实验中观察大鼠一般状态,称取大鼠体重及卵巢重量;（2）卵巢组织冰冻切片后观察细胞移植后24小时及2周后PKH26标记的h AECs在卵巢中的存活与分布情况;（3）Elisa检测血清中AMH及FSH水平,分析h AECs移植对大鼠内分泌功能的影响;（4）阴道涂片检测大鼠动情周期改变,了解h AECs移植对下丘脑-垂体-性腺轴的完整性的作用;（5）HE染色观察卵巢组织学改变及卵泡计数,评估h AECs修复大鼠卵巢组织结构的效果;（6）免疫组化检测AMH、FSHR及Klotho蛋白在卵巢的分布及表达情况,初步探究h AECs移植修复卵巢损伤可能的机制;（7）大鼠合笼实验探究并记录大鼠胚胎的数量,评估h AECs移植对大鼠生育力的作用。结果（1）PKH26标记的h AECs可以向损伤的卵巢迁移,在细胞移植后24小时、2周均可以观察到红色荧光,移植的h AECs主要分布于卵巢间质区;（2）h AECs移植后可以在一定程度上提高损伤大鼠的体重及卵巢重量;（3）与模型组相比,h AECs移植可以升高损伤大鼠血清AMH水平,并降低血清FSH水平,改善卵巢功能不全大鼠的内分泌功能;（4）h AECs移植可降低损伤大鼠的异常动情周期,降低环磷酰胺所致的卵巢毒性作用;（5）h AECs移植使窦前卵泡、窦卵泡数量增加,闭锁卵泡数量减少,对卵巢组织有修复作用;（6）与模型组相比,h AECs移植可使卵巢组织AMH、FSHR及Klotho蛋白的表达水平上调;（7）h AECs尾静脉移植组、h AECs原位注射组及模型组大鼠的胚胎数量较对照组显着减少,尾静脉移植细胞组大鼠合笼后胚胎数较模型组明显增加,原位注射细胞组大鼠的胚胎数量较模型组略有增加。结论h AECs移植可以修复损伤的卵巢功能和结构,增加窦前及窦卵泡的数量,减少闭锁卵泡的数量;h AECs静脉移植可以显着改善受损大鼠的生育力功能;h AECs移植可以使卵巢组织AMH、FSHR及Klotho蛋白的表达水平上调,可能与抑制原始卵泡过度激活、促进生长卵泡发育、成熟及调节颗粒细胞的功能有关。第四部分 hAECs修复大鼠卵巢功能不全的机制研究目的h AECs修复大鼠卵巢功能不全的可能机制,希望为化疗引起的卵巢损伤的治疗提供相关理论基础,为临床上修复损伤的卵巢功能提供新的思路和策略。方法在已经证实h AECs在修复环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的可行性后,本实验选用RNA SEQ进行三组卵巢组织的测序,每组含3例卵巢组织。三组分别为h AECs尾静脉移植组、h AECs原位注射组及模型组,在h AECs移植后2周取卵巢组织进行测序及进一步验证。（1）卵巢组织的总RNA提取、逆转录、合成双链c DNA、扩增及测序,生物信息学分析h AECs治疗组与模型组的差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）,对差异表达基因的GO（Gene Ontology）及KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）分析,了解差异基因的功能及可能涉及的通路;（2）RT-q PCR验证部分差异表达基因,进一步明确差异基因的表达水平;（3）免疫组化及Western Blot验证显着富集的类固醇激素合成通路的蛋白表达水平,从基因及蛋白表达水平探究h AECs治疗的潜在机制。结果（1）m RNA测序发现h AECs尾静脉移植组和模型组共有783个表达差异的基因,其中有619个上调的差异基因及164个下调的差异基因。而原位注射h AECs组与模型组之间有168个差异表达基因,其中116个上调的差异基因和52个下调的差异基因;（2）GO分析显示,h AECs尾静脉移植组与模型组的DEGs主要富集于离子通道活性和跨膜转运蛋白活性,而原位注射h AECs组与模型组的DEGs显着富集类固醇激素生物合成过程和类固醇激素代谢过程。KEGG分析显示,h AECs尾静脉移植组与模型组的DEGs在核糖体、蛋白消化和吸收通路、神经活动配体-受体相互作用通路及c AMP信号通路显着富集;而原位注射h AECs组与模型组的DEGs主要参与类固醇激素生物合成通路;（3）绘制维恩图发现尾静脉注射细胞组与原位注射细胞组相对于模型组共同差异表达的基因共有4个,包括2个上调和2个下调的基因。在进一步的q PCR验证中,2个上调差异基因IRF7（regulatory factor 7）与Mx1（Mx dynamin-like GTPase 1）表达与测序结果一致,即IRF7与Mx1在尾静脉注射细胞组与原位注射细胞组的表达均显着增加,相对于模型组卵巢组织的表达。而另两个下调差异基因MFAP31（microfibril-associated glycoprotein 3-like）及CITED2（c AMP-responsive element-binding protein（CREBBP）/p300-interactingtrans-activator 2 with glutamic acid（E）and aspartic acid（D）-rich tai）在q PCR的验证中,三组无显着差异;（4）KEGG分析显示原位注射组与模型组间DEGs主要富集于类固醇激素生物合成通路,进一步q PCR发现,Msmo1、SQLE、NSDH1、FDFT1、TM7SF2在原位注射组显着上调,而其他三个基因DHCR24,CYP51,HSD17B7仍然高于模型组,这与测序结果比较一致;m RNA测序结果显示,与模型组相比,原位注射h AECs组中与合成雌激素和黄体酮的关键酶如Star、Cyp11a1、Cyp19a1和Hsd17b1的表达值（FPKM值）也升高。此外,我们还观察分析了3组中血管内皮生长因子受体1（Vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1）、VEGFR2和VEGFR3的表达。VEGFR1（原位注射h AECs组）和VEGFR2（静脉移植h AECs组）的表达分别较模型组显着升高（P<0.05）,而VEGFR3在3组间无差异;（5）免疫组化和western blotting分析发现,原位注射细胞组与模型组之间DEGs显着富集的类固醇激素生物合成通路的其中2个酶角鲨烯单加氧酶（Squalene monooxygenase,SQLE）和法尼基二磷酸法尼基转移酶1（Farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1）主要在卵巢黄体组织的颗粒细胞中表达,原位注射组的表达较模型组显着升高（P<0.01）。结论h AECs移植可能通过上调AMH表达,减少原始卵泡的过度激活;增加FSHR及KL蛋白表达,维持生长卵泡的发育及促进卵泡成熟;高通量测序结果显示h AECs移植对核糖体、蛋白消化、蛋白吸收、神经活性配体-受体相互作用、c AMP信号通路、甾体生物合成通路等均有影响,促进类固醇激素合成、卵泡发育和排卵;此外,h AECs移植还可通过上调促血管及抗炎因子IRF7、Mx1、VEGFR1及VEGFR2,促进血管生成,减少炎症等发挥修复作用。
叶城[5]（2020）在《草鱼大脑和垂体中神经肽挖掘及速激肽功能鉴定》文中认为在脊椎动物中,大脑和垂体是机体内极其重要的器官。大脑可以通过合成与释放神经肽调节垂体激素的合成与分泌,进而参与机体生长、生殖、应激和免疫等生理过程的调控。与哺乳动物不同,鱼类的下丘脑-垂体轴缺失了门脉系统,因此调控垂体激素合成与分泌的上游神经肽变得更为庞大和复杂。基于此,本研究以草鱼（Ctenopharyngodon idellus）为研究对象,首先,通过组织切片技术分析草鱼不同大脑亚区及垂体的形态和显微结构,并结合生物信息学方法初步探究草鱼各脑区和垂体的功能及各脑区间的相互关系。接着,基于草鱼基因组数据库和草鱼大脑各亚区和垂体的转录组数据,挖掘草鱼大脑和垂体中的神经肽编码基因及其相关受体信息,并对它们在草鱼大脑不同亚区和垂体内的分布进行分析。最后,以挖掘出的速激肽家族的神经肽为切入点,分别研究了TAC3编码产物NKB和NKBRP以及TAC4编码产物HK1和HK2在草鱼垂体内的功能及其作用机制。主要研究结果如下:1、草鱼大脑和垂体的形态学和组织学H.E染色切片结果显示,草鱼大脑主要由6个亚区构成,包括嗅球、端脑、视顶盖、下丘脑、小脑和延脑。与软骨鱼类和哺乳类不同,草鱼大脑和垂体间无下丘脑-垂体门脉系统,下丘脑的神经元直接伸入并终止于前腺垂体内。通过分析草鱼不同脑区和垂体的转录组测序数据,本研究发现嗅球可能与生殖和免疫有关;端脑可能参与食欲和生殖的调控;视顶盖不仅在视觉系统中发挥重要功能,并可能涉及摄食行为的调控;下丘脑在摄食和生殖过程中扮演重要角色;延脑与听觉系统有关;垂体在能量代谢、器官发育和生殖过程中起关键作用。相关性分析结果显示,下丘脑和端脑不仅在结构上高度相关,其功能也存在重叠性,表明端脑和下丘脑可能是硬骨鱼类摄食和生殖的调控中心。2、结合草鱼基因组数据库和草鱼大脑各亚区及垂体的转录组数据,本研究系统地挖掘了来自23个家族共计91个神经肽前体编码基因,以及上述神经肽相对应的112个受体基因。基于RNA-seq数据,对上述基因在草鱼6个不同大脑亚区和垂体内的转录本表达水平进行分析。最后,结合已有研究和本研究的结果,对神经肽及其受体在草鱼大脑和垂体的主要合成区域和功能行使位置进行了预测。3、以草鱼垂体细胞为研究对象,转录组分析表明NKB能够诱导垂体内729个基因的差异表达,这些基因涉及了激素活性、食物摄入、信号转导和代谢等。体外细胞培养和RT-q PCR结果显示,NKB在草鱼垂体细胞中可以以时间和剂量依赖的方式诱导四种厌食肽（UTS1、CART、POMCb和NMB）m RNA的表达。受体选择性和受体后信号通路实验结果显示,NKB对草鱼垂体中UTS1、CART、POMCb和NMB表达的刺激作用均能由NK3R介导。这些反应激活了腺苷酸环化酶/蛋白激酶A（c AMP/PKA）通路、磷脂酶C/肌醇1,3,5-三磷酸/蛋白激酶C（PLC/IP3/PKC）通路和Ca2+/钙调蛋白/Ca M-依赖性蛋白激酶II(Ca2+/Ca M/Ca MK-II)通路。此外,腹腔注射NKBa能够显着诱导草鱼垂体内这四种厌食肽m RNA表达。此外,摄食实验结果显示,草鱼进食后下丘脑内的TAC3a和TAC3b m RNA表达显着提高。这些结果表明,NKB是一个饱感因子,它能够通过调节垂体中厌食肽的表达参与硬骨鱼类摄食调节。4、以草鱼为研究对象,本研究从草鱼大脑和垂体中克隆得到TAC4基因及其受体NK1Rb和NK3Ra1。序列分析显示草鱼TAC4能够编码HK1和HK2成熟肽。组织表达分析表明TAC4在下丘脑、嗅球和延脑中高表达,受体NK1Rb、NK3Ra2和NK3Rb等均在垂体中有较高的表达,预示TAC4在草鱼垂体中可能发挥重要功能。通过在HEK293T细胞膜上表达NKRs,HK2对6个NKRs均有较高的激活效率,其中对NK2R应是HK2的特异性受体;而HK1仅能微弱激活NK2R、NK3Ra2和NK3Rb。转录组测序和生物信息学分析结果显示,HK2能够诱导垂体细胞内1051个基因差异表达,这些基因主要涉及食欲的负调节、激素活性、受体配体结合和G蛋白偶联受体信号通路等。在草鱼垂体原代细胞中,HK2能够以时间依赖性和剂量依赖性的方式促进PRL、SLα、UTS1、NMB1、CART2和SN2 m RNA表达,而HK1对上述基因均无显着反应。为了解析HK1在草鱼垂体内的失活原因,本研究将含VFGLM基序的HK1修改为FFGLM基序的HK1突变体（HK1-M）。受体-配体反应表明,不同于HK1,HK1-M对6个NKRs展现了很高的激活效率。同时,HK1-M能够显着诱导草鱼垂体细胞内UTS1、PRL和SLαm RNA表达。此外,HK1和HK2共处理垂体细胞实验显示,HK1不能有效阻断HK2在垂体中的功能,表明HK1不是HK2的内源性拮抗剂。综上结果表明,HK2可以直接作用于草鱼垂体细胞,通过受体NKRs的介导,促进垂体内PRL、SLα、UTS1、CART2、NMB1和SN2的m RNA表达;而HK1因其FXGLM序列突变致使其功能丢失。综上所述,本研究建立了草鱼不同大脑亚区和垂体的解剖学和转录组数据库,对草鱼不同脑区以及垂体的结构和功能做出了初步分析,深入挖掘了草鱼大脑和垂体内的神经肽前体及其受体基因,并以速激肽家族为切入点,研究了TAC3编码产物和TAC4编码产物在垂体中的功能及作用机制。本研究有助于丰富我们对鱼类大脑不同亚区显微结构和功能的认识,为进一步深入研究鱼类神经肽的功能提供了基础。
潘雪[6]（2020）在《多囊卵巢综合征与心理应激相关性及补肾解郁调冲法干预的实验研究》文中研究表明目的1系统查阅、整理国内外多囊卵巢综合征（PCOS）相关文献,并通过对PCOS与心理应激相关性的分析阐释,为临床诊治PCOS提供参考依据及新思路。2通过横断面研究分析PCOS的中医证候分布特点;以慢性心理应激为切入点,对各中医证型与生活质量、心理状态及人格特征进行相关性分析,探讨PCOS中医各证型与慢性心理应激的关系,明确“肾虚肝郁”在PCOS中的重要病机作用,为中医辨证治疗提供理论基础。3应用来曲唑联合慢性温和不可预知应激（CUMS）法建立动物模型证实慢性心理应激对PCOS的重要影响;以此模型为研究对象,结合生殖与心理应激方面指标,探讨补肾解郁调冲方对模型大鼠的治疗作用及疗效机制;以内质网应激（ERS）诱导的卵巢颗粒细胞凋亡通路PERK-ATF4-CHOP为研究新靶点,探讨补肾解郁调冲方对PCOS合并慢性应激大鼠的疗效机制。方法1临床研究对309例PCOS患者的临床信息进行采集及整理;采用健康调查简表（SF-36）、焦虑/抑郁自评量表（SAS/SDS）、艾森克人格问卷简式量表中国版（EPQ-RSC）对患者的生活质量、焦虑及抑郁情绪变化、人格特征进行调查;分析PCOS患者的中医证候特点及不同证型PCOS患者在生活质量、心理健康、人格特征方面的差异性;应用Logistic回归分析,探究肾虚肝郁型PCOS与发病相关因素、焦虑抑郁情况及人格特征的依存关系。2实验研究以CUMS方法模拟慢性心理应激,以来曲唑构建PCOS大鼠模型。将大鼠随机分为空白组、慢性应激组（CUMS）、PCOS组、PCOS合并慢性应激组（PCOS+CUMS）。以行为学、卵巢组织病理学、血清性激素、海马组织神经递质等为指标进行模型对比及评价。应用PCOS+CUMS动物模型进行疗效机制研究。除正常组外,将成模大鼠随机分为模型组、达英-35组、单纯补肾（即补肾）组、补肾解郁调冲（即补肾解郁）低、中、高剂量组。进行行为学检测,测定各组大鼠卵巢体积、卵巢质量;以HE染色观察卵巢组织病理形态;ELISA法测定血清LH、FSH、FT水平;HPLC-ECD测定海马组织中NE、5-HT 及 5-HIAA 水平。选取补肾解郁低、中、高剂量组中疗效较佳的组别与其余各组进行疗效机制研究,以Tunel法检测卵巢颗粒细胞凋亡情况;免疫组化法检测GRP78、CHOP蛋白在卵巢组织中的表达及定位;Western Blot法检测卵巢组织中CHOP、GRP78、PERK、ATF4蛋白的表达水平。结果1临床研究（1）本研究有效病例为309例,27-33岁年龄段患者所占比例最高（55.34%）,文化程度以大专及以上为主（91.26%）,脑力劳动者居多（75.4%）;肥胖患者占比为36.89%,67.96%的患者无运动习惯,月经紊乱者占比为95.47%,有不孕病史者占29.13%,其中原发性不孕者占不孕症患者的64.44%,继发性不孕者为35.56%;（2）309例PCOS患者中,肾虚肝郁证占比最高（37.22%）,其次为痰瘀互结证（23.30%）、脾虚痰湿证（20.39%）、肾虚血瘀证（19.09%）;（3）不同证型间文化程度、工作性质、BMI存在差异（p<0.05）;大专及以上者在肾虚肝郁证中占比最高（95.65%）;脑力劳动者在肾虚肝郁证、脾虚痰湿证中占比较高,分别为80.95%、80.87%;脾虚痰湿证、痰瘀互结证PCOS患者BMI高于肾虚肝郁证、肾虚血瘀证（p<0.05）;（4）在SF-36方面,总体健康（GH）、情感职能（RE）、精神健康（MH）、活力（VT）维度得分较低;存在焦虑状态者占PCOS患者总人数的28.8%,抑郁状态者占40.13%;（5）不同中医证型在VT及MH方面存在统计学差异（p<0.05）;肾虚肝郁证VT维度及MH维度得分低于脾虚痰湿证（p<0.05）;肾虚肝郁型PCOS患者SF-36心理健康总分低于其余3个证型,SAS及SDS评分高于其余3个证型（p<0.05）;（6）各中医证型间EPQ-RSC中E、N、P维度得分差异具有统计学意义（p<0.05）。脾虚痰湿证的E维度得分最高,肾虚肝郁证最低;肾虚肝郁证的N、P维度得分最高,脾虚痰湿证最低;（7）进一步对中医证型占比最高之肾虚肝郁证进行Logistic回归分析,年龄、文化程度、工作性质、BMI、抑郁情况、神经质N与肾虚肝郁证有关（p<0.05）。年龄偏小（以34-40岁为参照）、体重偏低（以超重、肥胖为参照）、抑郁状态与肾虚肝郁证呈正相关;高中及中专学历（以大专及以上为参照）、工作以体力劳动为主（以无业参照）、情绪稳定或人格为神经质中间型（以情绪不稳定者为参照）与肾虚肝郁证呈负相关。2实验一PCOS组、PCOS+CUMS组大鼠体质量、血清FT水平、LH/FSH比值高于空白组（p<0.05）;PCOS+CUMS组较PCOS组卵巢组织多囊样改变更加明显;CUMS组、-PCOS+CUMS组大鼠水平运动得分、垂直运动得分、蔗糖偏嗜度及海马组织中NE、5-HT含量低于空白组（p<0.05）,5-HIAA含量、5-HIAA/5-HT比值高于空白组（p<0.05）;3实验二（1）体质量、卵巢体积及卵巢质量:模型组大鼠体质量、左侧卵巢体积及卵巢质量较正常组明显增加（p<0.05）;与模型组比较,达英-35组、补肾组及补肾解郁中剂量组大鼠体质量明显降低（p<0.05）,补肾解郁中剂量组大鼠左侧卵巢体积及卵巢质量明显减小（p<0.05）;（2）卵巢组织病理学:模型组可见多个囊状扩张卵泡,颗粒细胞排列松散,层数减少;补肾解郁中、高剂量组可见正常形态的卵泡及黄体,囊性扩张卵泡少见,颗粒细胞排列整齐,层数较模型组增多;（3）性激素:模型组大鼠LH、FT水平及LH/FSH比值较正常组升高（p<0.05）;与模型组比较,达英-35组及补肾解郁中剂量组大鼠FT水平明显降低（p<0.05）,达英-35组及补肾解郁中、高剂量组大鼠LH水平、LH/FSH比值明显降低（p<0.05）;补肾组在LH水平方面较模型组降低（p<0.05）;4实验三（1）行为学:模型组大鼠水平、垂直运动得分及蔗糖偏嗜度低于正常组（p<0.05）;与模型组比较,补肾组及补肾解郁中剂量组大鼠水平运动得分明显升高（p<0.05）;各治疗组大鼠垂直运动得分、蔗糖偏嗜度虽与模型组无显着差异（p>0.05）,但补肾解郁中剂量组、补肾组大鼠垂直运动得分较治疗前呈升高趋势;补肾解郁中剂量组蔗糖偏嗜度升高幅度最大;（2）神经递质:模型组大鼠NE、5-HT含量较正常组降低,5-HIAA含量升高（p<0.05）,而5-HIAA/5-HT比值呈升高趋势,但无统计学意义（p>0.05）;与模型组比较,补肾组及补肾解郁各剂量组NE含量明显升高（p<0.05）,各治疗组大鼠5-HT、5-HIAA含量及5-HIAA/5-HT比值与模型组无显着差异（p>0.05）,补肾解郁中剂量组5-HT含量最高,补肾解郁高剂量组5-HIAA含量最低;5实验四（1）颗粒细胞凋亡情况:与正常组比较,模型组较正常组卵巢颗粒凋亡指数明显增高（p<0.05）;与模型组相比,达英-35组及补肾解郁中剂量组大鼠卵泡凋亡指数明显降低（p<0.05）;（2）GRP78、CHOP、PERK、ATF4蛋白表达:模型组大鼠卵巢组织中GRP78、CHOP蛋白主要表达于颗粒细胞层中;与正常组比较,模型组GRP78、CHOP、ATF4蛋白表达明显上调（p<0.05）,模型组PERK蛋白表达水平升高,但差异无统计学意义（p>0.05）;与模型组相比,达英-35组、补肾组及补肾解郁中剂量组GRP78、ATF4蛋白表达明显降低（p<0.05）,补肾解郁中剂量组CHOP蛋白表达水平明显降低（p<0.05）,各治疗组PERK蛋白表达水平下降,但差异无统计学意义（p>0.05）。结论1通过文献综述,PCOS是一种生殖功能障碍与代谢异常并存的内分泌紊乱性疾病,心理应激在PCOS的发生发展中具有重要作用。中医药在治疗PCOS方面积累了丰富的经验,应结合心理应激因素进一步研究中医药治疗PCOS的作用机制及优势。2临床研究证实,肾虚肝郁证是PCOS常见的中医证型;肾虚肝郁型PCOS患者存在更大的精神压力及心理负担,且易具有内向,情绪不稳定,焦虑紧张等人格倾向,“肾虚肝郁”与PCOS患者的慢性心理应激状态具有密切关联;年龄偏小、体重偏低、存在抑郁状态、情绪不稳定者辨证为肾虚肝郁证的可能性更大,临证治疗中应重视患者的精神心理状态。3来曲唑联合CUMS诱导的PCOS合并慢性应激状态动物模型较传统PCOS模型大鼠卵巢病理改变、内分泌及行为学变化、神经递质方面更贴近临床,可作为研究PCOS合并心理应激的病理及药效学机制的可靠动物模型,并进一步证实了慢性心理应激与PCOS相互影响。4补肾解郁调冲方可促进模型大鼠体内生殖内分泌环境恢复平衡,促进卵泡发育及排卵,改善行为学表现;该方的疗效作用机制可能与调节模型大鼠脑内单胺类神经递质,抑制PERK-ATF4-CHOP信号通路,下调GRP78表达,进而延缓ERS介导的卵巢颗粒细胞凋亡有关。
汪长江[7]（2020）在《CircAkap17b作为miR-7家族的分子海绵调控大鼠腺垂体FSH分泌机制研究》文中指出腺垂体作为哺乳动物最重要的内分泌器官,在动物生长发育,代谢,繁殖,泌乳与哺乳、应激反应中起着关键调控作用。腺垂体合成分泌的FSH和LH不仅可以诱导和维持正常的卵泡发生和精子产生,调节生殖过程,而且FSH可以直接调节骨量,防止骨质流失,还可以减少体内脂肪的积累并保持能量稳态。因此,进一步明确FSH合成与分泌的分子调节机制至关重要。环状RNA（circRNA）是最近发现的一种特殊的新型内源性非编码RNA,越来越多的研究表明circRNA在各种生理活动和癌症中发挥关键作用。然而,circRNA是否参与FSH调控,影响哺乳动物的生殖的研究仍然是未知的。为了探索circRNA对腺垂体FSH分泌的影响,我们在前期通过不同发育时期大鼠腺垂体circRNA的差异表达谱分析,筛选到一个表达丰富且差异表达的circRNA,根据它的来源命名为circAkap17b,进行进一步的研究。本研究通过双荧光素酶报告系统和转染实验,分析了miR-7家族对FSHβ转录后调控的作用;进而应用生物信息学解析差异表达的circAkap17b与miR-7家族的相互作用关系;构建过表达circAkap17b质粒和设计siRNA分析circAkap17b对腺垂体FSH分泌的潜在影响;双荧光素酶报告系统和RIP实验等验证circAkap17b与miR-7家族的相互作用。结果表明:1.miR-7家族可以靶向FSHβ,抑制大鼠腺垂体FSH的分泌。同大鼠的其他组织相比,miR-7在大鼠垂体中有很高的表达水平,存在显着差异;同时miR-7在成熟大鼠垂体中低表达。双荧光素酶报告系统和miR-7的转染实验证明miR-7抑制大鼠腺垂体FSH的分泌。2.CircAkap17b可以作为miR-7的分子海绵调控大鼠腺垂体FSH的分泌。通过基因组比对表明circAkap17b来源于大鼠的X号染色体上Akap17b基因的反义链,同时使用荧光原位杂交技术（FISH）,电泳和RT-qPCR来鉴定circAkap17b。之后通过沉默和过表达circAkap17b后,FSH基因和激素受到明显的影响,这表明circAkap17b对FSH分泌具有潜在调控能力。RIP实验和双荧光素酶报告系统证明circAkap17b与miR-7具有靶向关系,拯救实验也表明circAkap17b可以通过miR-7去调控大鼠腺垂体FSH的分泌。综上所述,本研究分析了差异表达的circAkap17b通过circAkap17b—miR-7—FSH信号途径调控大鼠腺垂体FSH的分泌,解析了大鼠垂体中的circRNA参与调控生殖分泌的方式,为进一步解析调控垂体激素分泌的生物学机制提供理论支持。
白熙[8]（2020）在《绞股蓝多糖对断乳雌性小鼠卵巢发育的影响》文中指出本研究采用酶联免疫吸附剂测定法、苏木精-伊红染色法等研究方法分别对断乳雌性小鼠的体重变化、卵巢指数、子宫指数、阴道开放情况;血清中Gn RH、FSH、LH、E2、PG的含量;卵巢中各级卵泡数量、最大直径及卵巢皮质厚度进行记录测定分析,来探究不同剂量的绞股蓝多糖（Gynostemma pentaphyllum polysaccharides,GPP）对断乳雌性小鼠卵巢发育的影响,从而为绞股蓝多糖进一步研究与开发提供新的方向与理论依据。结果发现:1.不同剂量的GPP均可促进小鼠体重增加,使小鼠阴道开放时间提前,用药14d后,GPP低剂量组体重显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP各剂量组小鼠阴道开放时间均显着高于空白对照组（P<0.05）。2.不同剂量的GPP均可使小鼠卵巢指数、子宫指数增加,用药7、14d后,GPP中剂量组卵巢指数显着高于空白对照组（P<0.05）;GPP低、中剂量组子宫指数均显着高于空白对照组（P<0.05）。3.不同剂量的GPP均能促进小鼠Gn RH、FSH、LH、E2的分泌;用药7d后,GPP各剂量组小鼠Gn RH、FSH、E2含量均显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP低剂量组LH含量显着高于空白对照组（P<0.05）;用药14d后,GPP低、中剂量组Gn RH、FSH、LH、E2含量均显着高于空白对照组（P<0.05）。4.不同剂量的GPP均能抑制PG的分泌,用药7、14d后,GPP各剂量组PG含量均显着低于空白对照组（P<0.05）。5.不同剂量的GPP均能促进各级卵泡的生长发育;用药7d后,GPP各剂量组SF数量均显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP中、高剂量组MF数量均显着高于空白对照组（P<0.05）。用药14d后,GPP各剂量组SF数量均显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP低、中剂量组MF数量均显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP中剂量组黄体数量显着高于空白对照组（P<0.05）。6.不同剂量的GPP均能使各级卵泡最大直径增大,用药7d后,GPP各剂量组PF、PRF、MF、黄体最大直径均显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP中剂量组SF最大直径显着高于空白对照组（P<0.05）。用药14d后,GPP各剂量组PF、PRF、SF、MF最大直径均显着高于空白对照组（P<0.05）,GPP低、中各剂量组黄体最大直径显着高于空白对照组（P<0.05）。7.不同剂量的GPP均能使小鼠卵巢皮质厚度显着增加（P<0.05）。总之,GPP可增加断乳小鼠体重、卵巢指数、子宫指数,提前阴道开放时间,提高血清中Gn RH、FSH、LH、E2的含量,增加卵巢中各级卵泡数量、大小及卵巢皮质的厚度,可促进小鼠卵巢的发育。综合本实验研究结果来看,用药14d后,GPP-L（50mg/kg）剂量组效果明显;GPP-M（100mg/kg）剂量组效果最佳。
尹谦[9]（2020）在《益肾祛浊方干预PCOS-IR模型大鼠性激素及胰岛素相关受体表达的实验研究》文中认为目的:采用来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养的方法构建多囊卵巢综合征胰岛素抵抗（polycystic ovary syndrome-insulin resistance,PCOS-IR）大鼠模型,探索益肾祛浊方对PCOS-IR模型大鼠体重、腹围、卵巢体积、卵巢中卵泡数量的影响,并研究该方药对模型大鼠体内雄激素受体（androgenreceptor,AR）、促黄体生成素受体（luteinizing hormone receptor,LHR）、胰岛素受体（insulin receptor,INSR）、胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factors 1 receptor,IGF-1R）、胰岛素受体底物 1 受体（insulinreceptor substrate 1 receptor,IRS-1R）等内分泌与代谢相关受体在垂体、卵巢、胃底部、结肠部不同组织的表达及其干预作用。以探究益肾祛浊方对于PCOS-IR的疗效与作用机制。方法:将6～8周龄SPF级SD雌性大鼠108只随机分为9组:空白组,模型组,益肾祛浊高、中、低剂量组,益肾组,二甲双胍组,达英-35组,达英-35联合二甲双胍组,每组12只。空白组给予普通饲料喂养,其余各组均给予来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养至第27天;然后给予相应药物灌胃2周,喂养期间定期测量大鼠体重、身长、腹围等数据并计算大鼠Lee’s指数（评价成年大鼠肥胖程度的指标）。治疗结束后留取大鼠垂体、卵巢、胃底部、结肠部等组织。测量大鼠卵巢体积与重量。将上述组织进行脱水制作石蜡切片,所取卵巢进行HE染色,光镜下计算卵巢中卵泡数量。采用免疫荧光法检测各组大鼠卵巢中AR、LHR、INSR、IGF-1R、IRS-1R的表达情况;检测大鼠胃底部和结肠部AR、LHR、INSR、IGF-1R的表达情况;检测大鼠垂体AR、LHR、IGF-1R的表达情况。结果:治疗14天后发现,益肾祛浊方组大鼠体重、腹围、Lee’s指数均较模型组大鼠下降（P<0.05）,卵巢体积缩小（P<0.05）,与模型组比较异常增多的卵泡减少（P<0.05）。益肾祛浊方组大鼠卵巢中AR、LHR、INSR表达的IOD值下降（P<0.05）,IGF-1R表达上升（P<0.05）,IRS-1R无明显变化（P>0.05）。在胃底部AR表达下降（P<0.01）,胃肠中LHR、INSR表达下降（P<0.05）,IGF-1R表达上升（P<0.05）。结肠部AR的表达各组均无差异（P>0.05）。在垂体AR、LHR表达下降（P<0.05）,IGF-1R表达上升（P<0.05）。结论:益肾祛浊方对PCOS-IR具有良好的治疗效果,整体效果优于单纯益肾中药组。其作用机制可能是改善卵巢的高雄激素和高胰岛素环境,并改善胃肠中代谢相关受体的表达,促进胃肠代谢功能趋于正常,通过调整胃肠影响生殖轴,恢复或提高下丘脑-垂体-卵巢轴功能,从而阻断内分泌和代谢紊乱的恶性循环,恢复卵巢的正常排卵功能,达到治疗疾病的目的。
于学浩[10]（2015）在《济宁青山羊出生后胃肠道中GnRH及GnRHR的发育性变化》文中指出原产自我国的济宁青山羊是一种独特的羔皮用山羊品种,其特性是四季发情,性成熟早,母羊在3月龄、公羊在4月龄发育至性成熟。济宁青山羊的初情期开始于3-4月龄,部分发育较早的个体于2月龄开始初情期,其发情周期为17.50d±0.50d,发情持续时间为1-2d,妊娠期约为147.00d±2.50 d,平均146d。济宁青山羊的繁殖率高,其羔羊的成活率高达95%。其性情温驯易于管理,遗传性稳定,适应能力强,耐粗饲,具有很高的经济价值,现已被列入《中国羊品种志》,属于优良的地方山羊品种。研究济宁青山羊胃肠道促性腺激素释放激素（GnRH）及促性腺激素释放激素受体（GnRHR）分布的增龄性变化对于了解GnRH及GnRHR对动物生后发育阶段消化道的功能产生的影响提供了必要的理论依据。为了解济宁青山羊生后发育时期胃肠道内GnRH和GnRHR的分布和发育性变化。本试验运用免疫组织化学（SABC）的方法检测了济宁青山羊出生当天（0日龄）、30日龄、60日龄、90日龄、120日龄、150日龄、180日龄胃肠道中GnRH和GnRHR免疫阳性细胞的动态分布。在胃肠道内,GnRH和GnRHR免疫阳性产物均定位在胞质中,为黄色或者棕黄色,胞核阴性,阴性对照无阳性着色。0日龄,GnRH免疫阳性产物在皱胃中分布在胃底腺的基底部、小肠的绒毛上皮之间、大肠的大肠腺杯状细胞之间;30日龄后,小肠腺上皮细胞中也出现了分布,其他各部位的免疫阳性物质明显增多,并且保持不断的增长趋势,皱胃中GnRH免疫阳性产物在60日龄达到峰值,其他部位在90日龄达到峰值。在济宁青山羊的0日龄时,GnRHR免疫阳性产物在胃底腺胃小凹上皮细胞与壁细胞中、小肠的绒毛上皮细胞与十二指肠腺上皮细胞中、大肠黏膜上皮细胞中;30日龄后,大肠腺的腺上皮细胞中也出现了分布,随后保持快速增长的趋势直至90日龄达到峰值。自0日龄-90日龄,GnRH和GnRHR免疫阳性细胞平均积分光密度增加均极显着（P<0.01）,90日龄后维持相对稳定（P>0.05）。综上所述,笔者推测济宁青山羊胃肠道还可以通过自分泌或旁分泌的形式合成与分泌GnRH;GnRH可能通过GnRHR的介导促进了胃肠道的生后发育及成熟过程。
二、人胎胰腺促性腺激素释放激素免疫反应细胞的形态测量分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人胎胰腺促性腺激素释放激素免疫反应细胞的形态测量分析（论文提纲范文）
（1）渐变高低温对黑线仓鼠KiSS-1/GPR54基因表达和免疫功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第1章 前言 |
| 1.1 温度对免疫功能的影响 |
| 1.2 温度对繁殖能力的影响 |
| 1.3 研究对象与研究现状 |
| 1.4 科学问题 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 1.6 研究内容 |
| 1.7 创新之处 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验设计 |
| 2.4 体重测量 |
| 2.5 体温测量 |
| 2.6 摄食量测定 |
| 2.7 动物器官解剖和测定 |
| 2.8 血糖浓度测定 |
| 2.9 血清瘦素浓度测定 |
| 2.10 血清皮质酮浓度的测定 |
| 2.11 血清雌二醇浓度的测定 |
| 2.12 KiSS-1、GnRH、GPR54繁殖相关基因表达的测定 |
| 2.12.1 下丘脑、子宫、卵巢总RNA提取与纯度检测 |
| 2.12.2 cDNA的合成 |
| 2.12.3 荧光定量引物的设计 |
| 2.12.4 荧光定量PCR溶解曲线 |
| 2.12.5 实时荧光定量PCR反应 |
| 2.13 细胞免疫反应(PHA反应)的测定 |
| 2.14 天然免疫反应的测定 |
| 2.15 体液免疫反应的测定 |
| 2.16 细胞因子的测定 |
| 2.17 统计方法及分析 |
| 第3章 结果与讨论 |
| 3.1 实验结果 |
| 3.1.1 渐变高低温对黑线仓鼠体重的影响 |
| 3.1.2 渐变高低温对黑线仓鼠体温的影响 |
| 3.1.3 渐变高低温对黑线仓鼠摄食的影响 |
| 3.1.4 渐变高低温对黑线仓鼠身体成分的影响 |
| 3.1.5 渐变高低温对黑线仓鼠器官鲜重的影响 |
| 3.1.6 渐变高低温对黑线仓鼠下丘脑KiSS-1、GnRH、GPR54基因表达的影响 |
| 3.1.7 渐变高低温对黑线仓鼠子宫KiSS-1、GnRH、GPR54基因表达的影响 |
| 3.1.8 渐变高低温对黑线仓鼠卵巢KiSS-1、GnRH、GPR54基因表达的影响 |
| 3.1.9 渐变高低温对黑线仓鼠免疫器官、天然免疫、白细胞计数的影响 |
| 3.1.10 渐变高低温对黑线仓鼠细胞免疫的影响 |
| 3.1.11 渐变高低温对黑线仓鼠体液免疫的影响 |
| 3.1.12 渐变高低温对黑线仓鼠细胞因子的影响 |
| 3.1.13 渐变高低温对黑线仓鼠血糖浓度的影响 |
| 3.1.14 渐变高低温对黑线仓鼠瘦素浓度的影响 |
| 3.1.15 渐变高低温对黑线仓鼠雌二醇浓度的影响 |
| 3.1.16 渐变高低温对黑线仓鼠皮质酮浓度的影响 |
| 3.1.17 渐变高低温条件下黑线仓鼠免疫指标、繁殖指标的相关性 |
| 3.2 讨论 |
| 3.2.1 渐变高低温对黑线仓鼠繁殖能力的影响 |
| 3.2.2 渐变高低温对黑线仓鼠免疫功能的影响 |
| 3.2.3 渐变高低温对黑线仓鼠能量代谢的影响 |
| 3.2.4 渐变高低温条件下黑线仓鼠免疫与繁殖的关系 |
| 3.3 小结 |
| 第4章 结论 |
| 第5章 展望 |
| 第6章 文献综述 |
| 6.1 生态免疫学 |
| 6.2 免疫系统 |
| 6.3 KiSS-1/GPR54系统简介 |
| 6.4 生态因子对免疫功能、繁殖能力的影响 |
| 6.4.1 季节性对免疫功能的影响 |
| 6.4.2 季节性对繁殖能力的影响 |
| 6.4.3 温度对免疫功能的影响 |
| 6.4.4 温度对繁殖能力的影响 |
| 6.4.5 光周期对免疫功能的影响 |
| 6.4.6 光周期对繁殖能力的影响 |
| 6.4.7 食物对免疫功能的影响 |
| 6.4.8 食物对繁殖能力的影响 |
| 6.5 其它因素对免疫与繁殖的影响 |
| 6.6 总结 |
| 参考文献 |
| 在读期间的学术成果 |
| 致谢 |
（2）低水平血清泌乳素与PCOS患者代谢紊乱和IVF-ET结局的关系及相关机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 第一章 低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者代谢紊乱的相关性研究 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 第二章 低水平血清泌乳素与多囊卵巢综合征不孕患者体外受精-胚胎移植治疗结局的相关性研究 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 泌乳素及其受体介导的JAK2/STAT5通路对脂肪代谢的影响及机制研究 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 实验材料和方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 综述 泌乳素及其与代谢的关系 |
| 附录、附图表 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况 |
| English Paper 1 |
| English Paper 2 |
（3）环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 前言 |
| 1.镍储量及应用现状 |
| 2.镍对生态环境的污染 |
| 2.1 空气、水、土壤的镍污染 |
| 2.2 镍污染对植被及微生物的影响 |
| 2.3 镍对动物的影响 |
| 2.4 镍暴露对人类的影响 |
| 3.镍与代谢 |
| 4.镍暴露损伤的机制 |
| 第二章 不同浓度NiSO_4 诱导人Nthy细胞凋亡及机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 Nthy-ori3-1 细胞株的复苏、培养、传代 |
| 2.2 构建人Nthy细胞镍损伤模型 |
| 2.3 Hoechst33258 荧光染色观察NiSO_4 诱导的Nthy细胞凋亡 |
| 2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率 |
| 2.5 人Nthy细胞线粒体膜电位检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 CCK-8细胞活力检测结果 |
| 3.2 普通光镜下人Nthy细胞形态改变 |
| 3.3 Hoechst33258 荧光染色法检测Nthy细胞凋亡情况 |
| 3.4 NiSO_4 对人Nthy细胞凋亡的处理作用 |
| 3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化 |
| 3.6 激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第三章 不同浓度NiSO_4 诱导人HPNE细胞凋亡及机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 人HPNE细胞株的复苏、培养、传代 |
| 2.2 构建人HPNE细胞镍损伤模型 |
| 2.3 Hoechst33258 荧光染色观察NiSO_4 诱导的人HPNE细胞凋亡 |
| 2.4 流式细胞仪检测人HPNE细胞凋亡率 |
| 2.5 人HPNE细胞线粒体膜电位检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 CCK-8细胞活力检测结果 |
| 3.2 普通光镜下人HPNE细胞形态改变 |
| 3.3 Hoechst33258 荧光染色法检测人HPNE细胞凋亡情况 |
| 3.4 NiSO_4 对人HPNE细胞凋亡的处理作用 |
| 3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化 |
| 3.6 激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第四章 NiSO_4对大鼠甲状腺功能、形态及凋亡增殖的影响 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试验仪器 |
| 1.2 主要试验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 染毒动物模型建立 |
| 2.2 大鼠甲状腺组织病理切片制备 |
| 2.3 大鼠甲状腺功能测定 |
| 2.4 RT-PCR法测定大鼠甲状腺组织中Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的 m RNA表达水平 |
| 2.5 免疫组化法检测大鼠甲状腺组织中Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 2.6 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 NiSO_4染毒后大鼠一般情况 |
| 3.2 大鼠体重的变化 |
| 3.3 大鼠甲状腺组织形态学改变 |
| 3.4 大鼠甲状腺功能的改变 |
| 3.5 大鼠甲状腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平和含量的变化 |
| 3.6 大鼠甲状腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2和Fas蛋白表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第五章 NiSO_4对大鼠胰腺功能、形态及凋亡增殖的影响 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试验仪器 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 染毒动物模型建立 |
| 2.2 大鼠胰腺组织病理切片制备 |
| 2.3 大鼠血糖、胰岛素及C肽水平测定 |
| 2.4 RT-PCR法测定大鼠胰腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的 m RNA表达水平 |
| 2.5 免疫组化法检测大鼠胰腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 大鼠胰腺组织形态学改变 |
| 3.2 大鼠随机血糖、血清胰岛素及C肽水平的变化 |
| 3.3 大鼠胰腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平和含量的变化 |
| 3.4 大鼠胰腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 重金属甲状腺毒性及其作用机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（4）人羊膜上皮细胞修复大鼠卵巢功能不全的实验研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第1章 hAECs的分离、培养、鉴定与生物学特性分析 |
| 1 实验材料 |
| 2 方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第2章 环磷酰胺诱导大鼠卵巢损伤模型的建立 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第3章 hAECs修复大鼠卵巢功能不全的体内实验 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第4章 hAECs修复大鼠卵巢功能不全的机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 综述 |
| 1 综述一化学治疗引起卵巢功能损伤的机制与治疗措施 |
| 2 综述二羊膜上皮细胞的研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（5）草鱼大脑和垂体中神经肽挖掘及速激肽功能鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 脊椎动物大脑和垂体研究概况 |
| 2 大脑和垂体中调节机体功能的重要调控因子 |
| 3 速激肽家族研究进展 |
| 4 研究主要目的及意义 |
| 第二章 草鱼大脑与垂体的结构和功能的初步研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2.1 主要实验仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 草鱼脑和垂体组织样品获得 |
| 2.4 石蜡组织切片的制作 |
| 2.4.1 常规石蜡切片制作过程 |
| 2.4.2 H.E染色 |
| 2.5 总RNA提取 |
| 2.6 RNA-seq测序、质控、参考序列比对和基因注释 |
| 2.7 差异表达基因的富集分析和组织间关系分析 |
| 2.8 RT-q PCR验证及数据统计分析 |
| 3 实验结果与分析 |
| 3.1 草鱼大脑和垂体的整体结构 |
| 3.2 草鱼大脑各亚区和垂体的转录组数据总览 |
| 3.3 草鱼嗅球的显微结构和转录组分析 |
| 3.4 草鱼端脑的显微结构和转录组分析 |
| 3.5 草鱼视顶盖的显微结构和转录组分析 |
| 3.6 草鱼下丘脑的显微结构和转录组分析 |
| 3.7 草鱼小脑的显微结构和转录组分析 |
| 3.8 草鱼延脑的显微结构和转录组分析 |
| 3.9 草鱼垂体的显微结构和转录组分析 |
| 3.10 草鱼各脑区和垂体的关联分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 嗅球可能在免疫响应中起重要作用 |
| 4.2 端脑参与食欲和生殖调节 |
| 4.3 视顶盖在视觉系统和摄食中的重要性 |
| 4.4 下丘脑作为潜在的摄食和生殖的调节中枢 |
| 4.5 草鱼小脑未解之谜 |
| 4.6 延脑在听觉系统中的潜在作用 |
| 4.7 垂体在机体生长、生殖、能量代谢以及器官发育中的重要功能 |
| 4.8 端脑和下丘脑—可能的摄食和生殖调控中枢 |
| 第三章 草鱼大脑和垂体内神经肽及其受体的挖掘和分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器和试剂 |
| 2.3 草鱼各脑亚区及垂体总RNA提取 |
| 2.4 转录组测序 |
| 2.5 草鱼大脑和垂体内神经肽及其受体的挖掘和转录本表达分布 |
| 3 实验结果与讨论 |
| 3.1 Apelin家族 |
| 3.2 NMB/GRP家族 |
| 3.3 Calcitonin家族 |
| 3.4 CART家族 |
| 3.5 CRH家族 |
| 3.6 CCK/Gastrin家族 |
| 3.7 GRL/MLN家族 |
| 3.8 Glucagon家族 |
| 3.9 GnRH家族 |
| 3.10 INS/IGF家族 |
| 3.11 MCH家族 |
| 3.12 NPP家族 |
| 3.13 NPB/NPW家族 |
| 3.14 NTS家族 |
| 3.15 Neuromedin家族 |
| 3.16 NPY家族 |
| 3.17 Opioid家族 |
| 3.18 HCRT家族 |
| 3.19 PTH家族 |
| 3.20 RFamide家族 |
| 3.21 SST家族 |
| 3.22 TAC家族 |
| 3.23 TRH家族 |
| 第四章 TAC3编码产物在草鱼垂体中的功能及机制研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2.1 主要实验仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 转录组测序与生物信息学分析 |
| 2.4 NKBa在草鱼垂体细胞中的功能分析 |
| 2.5 NKBa促进垂体摄食因子表达的受体选择性和信号通路分析 |
| 2.6 草鱼NKBa在体功能验证 |
| 2.6.1 草鱼腹腔注射NKBa |
| 2.6.2 草鱼摄食实验 |
| 2.7 数据分析 |
| 3 实验结果与分析 |
| 3.1 NKBa诱导草鱼垂体细胞的转录组分析 |
| 3.2 NKBa对草鱼垂体细胞中CART、UTS1、NMB和 POMCb的调节 |
| 3.3 NKBa诱导草鱼垂体细胞中CART、UTS1、NMB和 POMCb合成的受体选择性实验 |
| 3.4 NKBa诱导CART、UTS1、NMB和 POMCb m RNA表达的受体后信号通路. |
| 3.5 在体实验验证NKBa对草鱼垂体内CART、UTS1、NMB和 POMCb合成的调控作用 |
| 3.6 摄食实验验证NKB与摄食调控的关系 |
| 4 讨论 |
| 第五章 TAC4编码产物对草鱼垂体中摄食肽的调控研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2.1 主要实验仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 草鱼TAC4和NKRs的分子克隆和组织表达分析 |
| 2.3.1 总RNA提取与逆转录 |
| 2.3.2 引物设计与PCR扩增 |
| 2.3.3 草鱼TAC4和NKRs序列分析及系统进化树构建 |
| 2.3.4 草鱼TAC4和NKRs的组织表达分布 |
| 2.4 转录组测序与生物信息学分析 |
| 2.5 HKs在草鱼垂体细胞中的功能分析 |
| 2.6 草鱼NKRs在 HEK293T细胞中的功能表达 |
| 2.7 HK1在草鱼垂体中的功能失活分析 |
| 2.8 数据分析 |
| 3 实验结果与分析 |
| 3.1 草鱼TAC4和NKRs的基因克隆及序列分析 |
| 3.2 草鱼TAC4和NKRs的组织表达分析 |
| 3.3 草鱼HKs和 NKRs的受体配体选择性实验 |
| 3.4 HK2诱导草鱼垂体细胞的转录组分析 |
| 3.5 HK1和HK2 对草鱼垂体细胞中关键DEGs mRNA表达的调节 |
| 3.6 HK1突变体在草鱼垂体中的功能分析及受体配体验证 |
| 4 讨论 |
| 第五章 总结与展望 |
| 1 研究总结 |
| 2 创新性 |
| 3 存在问题 |
| 4 研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（6）多囊卵巢综合征与心理应激相关性及补肾解郁调冲法干预的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 综述一 多囊卵巢综合征的现代医学研究进展 |
| 1 患病情况 |
| 2 病因 |
| 3 发病机制 |
| 4 临床表现 |
| 5 并发症 |
| 6 诊断标准 |
| 7 治疗 |
| 8 结语 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医学对多囊卵巢综合征的认识 |
| 1 病名源流 |
| 2 中医病因病机 |
| 3 中医证型分布特点 |
| 4 中医治疗 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 综述三 多囊卵巢综合征与心理应激的相关性研究进展 |
| 1 PCOS发病的社会心理因素 |
| 2 PCOS患者的心理特征 |
| 3 心理应激与PCOS之间的内分泌关联 |
| 4 心理障碍是PCOS的重要并发症 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 第二章 基于心理社会因素、人格特征探讨多囊卵巢综合征中医证型与心理应激的相关性 |
| 前言 |
| 1 研究材料 |
| 2 研究内容及方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 补肾解郁调冲方干预多囊卵巢综合征合并慢性应激大鼠疗效机制的实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 多囊卵巢综合征合并慢性应激状态大鼠模型的建立及评价 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 补肾解郁调冲方对多囊卵巢综合征合并慢性应激大鼠卵巢形态学、性激素水平的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 补肾解郁调冲方对多囊卵巢综合征合并慢性应激大鼠行为学、海马神经递质的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 补肾解郁调冲方对多囊卵巢综合征合并慢性应激大鼠卵巢PERK-ATF4-CHOP凋亡通路的影响PERK-ATF4-CHOP凋亡通路的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1 研究总结 |
| 2 创新点 |
| 3 不足与展望 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（7）CircAkap17b作为miR-7家族的分子海绵调控大鼠腺垂体FSH分泌机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 调控FSH分泌的研究进展 |
| 1 垂体的结构和功能 |
| 1.1 垂体的结构 |
| 1.2 垂体的功能 |
| 2 FSH的结构和功能 |
| 3 FSH的调控 |
| 3.1 GnRH脉冲频率 |
| 3.2 激活素，卵泡抑素和抑制素 |
| 3.3 类固醇激素 |
| 第2章 miRNA与circRNA生物学功能及其在繁殖中的作用 |
| 1 miRNA的生物学功能和在繁殖中的作用 |
| 1.1 miRNA的发现 |
| 1.2 miRNA的生物合成和作用机制 |
| 1.3 垂体miRNA研究进展 |
| 2 circRNA的生物学功能和在在繁殖中的作用 |
| 2.1 CircRNA的发现 |
| 2.2 CircRNA生物发生机制 |
| 2.3 CircRNA的生物学功能 |
| 2.4 CeRNA机制 |
| 2.5 CircRNA在生殖中的调控作用 |
| 2.5.1 垂体中的circRNA |
| 2.5.2 下丘脑中的circRNA |
| 2.5.3 CircRNA与男性生殖疾病 |
| 2.5.4 CircRNA与女性生殖疾病 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 miR-7家族对FSH分泌的调控作用 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 试剂及耗材 |
| 1.1.3 主要仪器设备 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 SD大鼠腺垂体原代细胞的获取与培养 |
| 1.2.2 siRNA, miRNA mimic和miRNA inhibitor的细胞转染 |
| 1.2.3 RNA 提取和质控 |
| 1.2.4 RNA反转录获得cDNA |
| 1.2.5 实时荧光定量PCR |
| 1.2.6 报告质粒的构建 |
| 1.2.7 双荧光素酶实验 |
| 1.2.8 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 miR-7a-5p和FSHβ 3'UTR之间互补区域的预测和验证 |
| 2.2 大鼠不同发育时期以及不同组织中miR-7a-5p的表达水平 |
| 2.3 miR-7a-5p转染效率及转染后的影响 |
| 2.4 miR-7a-5p过表达/阻断对腺垂体细胞FSH分泌的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第2章 CircRNA作为miR-7家族分子海绵调控FSH的分泌 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要试剂及耗材 |
| 1.1.3 主要仪器设备 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 SD大鼠繁育和原代细胞细胞以及垂体瘤细胞系培养 |
| 1.2.2 RNA提取 |
| 1.2.3 核酸制备和qRT-PCR |
| 1.2.4 RNase R 处理 |
| 1.2.5 载体构建和细胞转染 |
| 1.2.6 荧光原位杂交（FISH） |
| 1.2.7 RIP RNA免疫沉淀测定 |
| 1.2.8 萤光素酶活性测定 |
| 1.2.9 FSH检测 |
| 1.2.10 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 大鼠垂体细胞中circAkap17b的鉴定与表达特征 |
| 2.2 CircAkap17b在大鼠垂体前叶的表达模式 |
| 2.3 CircAkap17b过表达/阻断对FSHβ表达和FSH分泌的影响 |
| 2.4 CircAkap17b可以作为miR-7的分子海绵 |
| 2.5 miR-7b通过靶向FSHβ抑制FSH分泌 |
| 2.6 CircAkap17b通过miR-7-FSHβ途径促进FSH分泌 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 及在学期间所取得的科研成果 |
| 作者简介 |
| 在学期间按所取得的研究成果 |
| 致谢 |
（8）绞股蓝多糖对断乳雌性小鼠卵巢发育的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩写词 Abbreviations |
| 第一章 绞股蓝及卵巢卵泡发育的研究概况 |
| 1.1 绞股蓝的研究进展 |
| 1.1.1 绞股蓝的有效成分及研究概况 |
| 1.1.2 绞股蓝多糖的提取与制备 |
| 1.1.3 绞股蓝多糖的研究进展 |
| 1.2 卵巢卵泡的发育和结构功能 |
| 1.2.1 卵巢的发育与结构 |
| 1.2.2 卵泡的发育 |
| 1.3 卵泡的激素调节 |
| 1.3.1 促性腺激素释放激素 |
| 1.3.2 促性腺激素 |
| 1.3.3 类固醇激素 |
| 第二章 绞股蓝多糖对断乳雌性小鼠卵巢卵泡发育的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验药品与试剂 |
| 2.1.3 仪器设备 |
| 2.1.4 绞股蓝多糖的提取与糖含量测定 |
| 2.2 动物实验 |
| 2.2.1 分组与剂量 |
| 2.2.2 体重、阴道开放情况记录 |
| 2.2.3 采血、取材及脏器指数 |
| 2.2.4 血清的制备 |
| 2.2.5 ELISA法测定血清中Gn RH、FSH、LH、E2、PG的含量 |
| 2.2.6 卵巢的组织形态学观察 |
| 2.3 统计学处理分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 绞股蓝多糖对断乳小鼠体重的影响 |
| 2.4.2 绞股蓝多糖对断乳小鼠卵巢指数、子宫指数的影响 |
| 2.4.3 绞股蓝多糖对断乳小鼠阴道开放情况的影响 |
| 2.4.4 绞股蓝多糖多断乳小鼠血清中GnRH水平的影响 |
| 2.4.5 绞股蓝多糖多断乳小鼠血清中FSH水平的影响 |
| 2.4.6 绞股蓝多糖多断乳小鼠血清中LH水平的影响 |
| 2.4.7 绞股蓝多糖对断乳小鼠血清中E2水平的影响 |
| 2.4.8 绞股蓝多糖多断乳小鼠血清中PG水平的影响 |
| 2.4.9 绞股蓝多糖对断乳小鼠卵巢各级卵泡数量的影响 |
| 2.4.10 绞股蓝多糖对断乳小鼠卵巢各级卵泡最大直径的影响 |
| 2.4.11 绞股蓝多糖对断乳小鼠卵巢皮质厚度的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 绞股蓝多糖对小鼠体重、阴道开放及器官指数的影响 |
| 2.5.2 绞股蓝多糖对血清中Gn RH、FSH、LH水平的影响 |
| 2.5.3 绞股蓝多糖对血清中E2、PG水平的影响 |
| 2.5.4 绞股蓝多糖对小鼠卵巢各级卵泡数量、大小及卵巢皮质厚度的影响 |
| 第三章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
（9）益肾祛浊方干预PCOS-IR模型大鼠性激素及胰岛素相关受体表达的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 综述 |
| 综述一 现代医学对PCOS-IR的研究现状 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医学对PCOS-IR的认识和研究进展 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 益肾祛浊方对PCOS-IR模型大鼠干预作用及对卵巢相关受体表达的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 实验二 益肾祛浊方干预胃肠激素受体表达的作用 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 实验三 益肾祛浊方干预垂体激素受体表达的作用 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新性 |
| 存在问题与不足 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（10）济宁青山羊出生后胃肠道中GnRH及GnRHR的发育性变化（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 Gn RH 的研究 |
| 1.1.1 GnRH的来源及其种类与构成 |
| 1.1.2 GnRH的调节方式 |
| 1.1.3 GnRH的研究进展 |
| 1.2 GnRHR的研究进展 |
| 1.2.1 GnRHR的结构及种类 |
| 1.2.2 GnRHR现阶段研究情况 |
| 1.2.3 GnRH在消化系统中的研究进展 |
| 1.4 GnRH对GnRHR的信号调节 |
| 1.5 山羊皱胃的结构 |
| 1.6 小肠结构 |
| 1.6.1 小肠绒毛 |
| 1.6.2 小肠腺 |
| 1.6.3 小肠肌层 |
| 1.6.4 肠道的组织发育 |
| 1.6.5 小肠功能发育的调节 |
| 1.7 本实验的目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验地点 |
| 2.1.3 实验用试剂与试验用品 |
| 2.2 SABC法检测胃肠道中的GnRH和GnRHR免疫阳性细胞的分布特点 |
| 2.2.1 组织切片的制备 |
| 2.2.2 免疫组织化学（SABC）法 |
| 2.2.3 阴性对照试验 |
| 2.2.4 拍照和图像分析 |
| 3 结果及分析 |
| 3.1 GnRH免疫阳性细胞在胃肠道中的分布特点 |
| 3.1.1 GnRH免疫阳性细胞在皱胃中的分布特点 |
| 3.1.2 GnRH免疫阳性细胞在小肠中的分布特点 |
| 3.1.3 GnRH免疫阳性细胞在大肠中的分布特点 |
| 3.2 GnRHR免疫阳性细胞在胃肠道中的分布规律 |
| 3.2.1 GnRHR免疫阳性细胞在皱胃中的分布特点 |
| 3.2.2 GnRHR免疫阳性细胞在小肠中的分布特点 |
| 3.2.3 GnRHR免疫阳性细胞在大肠中的分布特点 |
| 3.3 GnRH免疫阳性细胞及GnRHR免疫阳性细胞在胃肠道中的发育性变化 |
| 3.3.1 GnRH免疫阳性细胞在胃肠道中的发育性变化 |
| 3.3.2 GnRHR免疫阳性细胞在胃肠道中的发育性变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 山羊胃肠道内GnRH及GnRHR免疫阳性细胞的分布规律 |
| 4.2 山羊胃肠道内GnRH及GnRHR免疫阳性细胞发育性变化 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 7 致谢 |
四、人胎胰腺促性腺激素释放激素免疫反应细胞的形态测量分析（论文参考文献）
- [1]渐变高低温对黑线仓鼠KiSS-1/GPR54基因表达和免疫功能的影响[D]. 王玉辉. 曲阜师范大学, 2021(02)
- [2]低水平血清泌乳素与PCOS患者代谢紊乱和IVF-ET结局的关系及相关机制研究[D]. 杨海燕. 山东大学, 2020(04)
- [3]环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨[D]. 刘亚红. 兰州大学, 2020(04)
- [4]人羊膜上皮细胞修复大鼠卵巢功能不全的实验研究[D]. 张玉林. 重庆医科大学, 2020(01)
- [5]草鱼大脑和垂体中神经肽挖掘及速激肽功能鉴定[D]. 叶城. 华中农业大学, 2020(02)
- [6]多囊卵巢综合征与心理应激相关性及补肾解郁调冲法干预的实验研究[D]. 潘雪. 北京中医药大学, 2020(04)
- [7]CircAkap17b作为miR-7家族的分子海绵调控大鼠腺垂体FSH分泌机制研究[D]. 汪长江. 吉林大学, 2020(08)
- [8]绞股蓝多糖对断乳雌性小鼠卵巢发育的影响[D]. 白熙. 广西大学, 2020(02)
- [9]益肾祛浊方干预PCOS-IR模型大鼠性激素及胰岛素相关受体表达的实验研究[D]. 尹谦. 北京中医药大学, 2020(04)
- [10]济宁青山羊出生后胃肠道中GnRH及GnRHR的发育性变化[D]. 于学浩. 山东农业大学, 2015(04)