韩玮[1]2003年在《腺苷在心肌缺血再灌注中应用的动物实验和临床研究》文中认为腺苷是一种腺嘌呤核苷酸代谢产物，基础研究表明有多种心血管效应。在心肌缺血再灌注时，腺苷能抑制中性粒细胞粘附和聚集、保护血管内皮细胞功能、清除氧自由基、改善缺血心肌能量代谢。尽管动物实验研究结果存在争论，初步的临床试验结果表明腺苷在心肌梗死再灌注治疗中有一定的心肌保护作用。 本研究临床部分入选了31心肌梗死后成功PCI治疗患者，其中AMI直接PCI治疗15例，陈旧性心肌梗死患者16例，分别在介入治疗结束后经指引导管注射腺苷(15μg-60μg)，观察其对心率和血压的影响，比较注射腺苷前后治疗病变血管血流帧数、TMPG，初步观察其临床效果。结果发现PCI结束后冠状动脉内直接注射腺苷即刻引起心率、血压暂时下降，但都能迅速恢复，患者无严重不良反应。腺苷注射前、注射后1分钟和注射后10分钟血流帧数有统计学差异(分别为31.24±10.67、27.44±7.70、27.17±8.72，和注射前相比P＜0.05)，而平均TMPG也有显着改善(分别为2.12±0.81 vs 2.48±0.74，P=0.02)。 无复流现象多见于急性心肌梗死和大隐静脉桥血管介入治疗，有研究显示异搏定和硝普钠能有效逆转介入治疗后的无复流现象，但在患者出现严重低血压时使用这些药物有所顾虑。我们对2002年7月至2003年4月我院冠状动脉介入治疗后6例发生无复流现象的患者(4军医进修学院博土研究主论文例 AMI直接 PC！，2例大隐静脉桥介人治疗，均为 PTCA后置人支架）经指引导管注射腺苦治疗，4例 TIMI］级和 2级的患者，冠状动脉内注射腺苦（60Pg－］20Ug）能有效逆转无复流现象（血流均恢复为＊！3级），而对于2例nMO级患者，腺昔联合异搏定、硝普钠等治疗虽然也能逆转无复流现象，但临床预后较差（一例术后发生AMI，一例术后3天死亡）。 动物实验采用 X线透视下经血管途径球囊堵塞冠状动脉建立犬心肌梗死再灌注模型，随机分为腺音组（］0只，术中死亡3只）和对照组 （］0只，术中死亡 4只）。腺苦组在再灌注 20分钟后冠状动脉内直接注射腺音（］00Pg／kg），对照组注射等量生理盐水。采用系列静息正电子发射断层核素扫描pPECT）评价心肌再灌注后心肌缺血积分和药物干预后心肌缺血积分，再灌注川分钟后注射核素示踪剂”mTCM旧l，延迟 40分钟后进行Mt采集和断层圄像重建，采用左室 20节段积分 法进行半定量分析。第二次核素扫描在术后叁天进行，确定药物于预 后心肌缺血积分：国像采集、重建和分析同第一次。在术后2周超声 心动图测定左室舒张末期内径（LVEDdL室壁运动积分（VWMI）和 左室射血分数队VEF人 动物实验结果表明，腺昔组和对照组再灌注后心肌缺血积分没有显 着性差异（］7石6土 6．44 VS］7石］土 7．32，P＝0石4），而药物于预后缺血 3罕医进修学院博士研究生论文5，6］，P＝0．02和 0．63土0．1］VS 0．28土0．22，P＝＝0．002）。两周后腺昔组和对照组左室大小、左室射血分数、室壁运动积分也有显着性差异 （P＜0乃5）。 综合动物实验和临床研究结果，得出以下结论：1．PCI术后冠状动脉内给予腺昔能改善血流速度和心肌灌注。但其远 期效果还需要进一步研究。2．腺昔能安全地在PCi术中应用，虽然可能导致一过性心率、血压降 低，但能迅速恢复。3．腺苦对介入治疗后发生的无复流现象有一定治疗作用。4．在急性心肌梗死再灌汪后，腺昔能进一步缩小梗死面积，增加心肌 挽救分数，改善心功能。5．腺昔降低心肌梗死面积的机制可能是抑制中性粒细胞粘附、聚集， 保护血管内皮细胞，改蓄心肌纲胞能量代谢等。6．腺昔改善心肌灌注、降低心肌梗死面积的确切机制、最佳使用剂量 和给药途径需要深人研究。
王强[2]2012年在《迷走神经刺激后处理对大鼠在体心肌缺血—再灌注损伤的保护作用及机制的实验研究》文中进行了进一步梳理背景研究表明,在急性心肌缺血恢复血流灌注后,由缺血-再灌注损伤(ischemia reperfusion injury, IRI)所致的心肌梗死后死亡率仍然高达10%。动物实验亦发现,心肌缺血时高达50%的最终心肌梗死面积是归因于IRI。目前,已经公认缺血预处理是最为强大的内源性心肌保护干预措施。然而,由于心肌缺血事件的不可预测性,所以在临床实践中很难对其采取预先干预措施。因此,除了能够在实施心脏手术的患者选择性应用之外,缺血预处理的临床应用价值十分有限。缺血后处理则解决了临床干预时机选择的问题,而且其也已被证明具有确切的心肌保护作用。但是,诸如反复阻塞冠状动脉这样的操作有导致病变冠状动脉破裂或粥样斑块脱落等并发症的高度风险,故其临床应用价值也十分有限。相比之下,肢体远隔缺血后处理则能够避免在心脏直接进行操作,而且大量研究表明其对心肌IRI具有明确的保护作用。此外,肢体远隔缺血后处理还具有安全、实施简单和费用低廉等优点。因此,肢体远隔缺血后处理不失为临床治疗心肌IRI的一种较佳选择。现已明确,炎症反应在心肌IRI的发生和发展过程中发挥着极为重要的致病作用,并且调节炎症反应可以减轻心肌IRI。晚近研究发现,迷走神经同样具有免疫炎症调节功能,其激活后能够通过胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway)而实现对炎症反应的调控。在内毒素血症、结肠炎、风湿性关节炎和IRI等炎症性疾病时,迷走神经刺激能够通过抑制炎症细胞募集和炎症细胞因子释放而调控炎症反应,进而发挥其保护作用。虽然已经证实迷走神经刺激能够减小IRI所致的心肌梗死面积,但是目前尚无研究系统观察迷走神经刺激后处理对心肌缺血-再灌注损伤时心肌局部与全身炎症反应的影响。联合应用不同的干预措施以获得有益的强效心肌保护效果一直是心肌IRI保护研究领域的重要方向,而且迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理是两种作用机制明显不同的心肌保护干预措施。因此,我们设计了这个随机对照实验,主要目的包括：①观察迷走神经刺激后处理对心肌IRI保护的有效性、可用性和最佳干预时间；②评价将迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理这两种极具临床应用前景的简单干预措施联合应用能否获得有益的协同性心肌保护作用；③观察PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在迷走神经刺激后处理、肢体远隔缺血后处理、联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理心肌保护作用中的地位,以探索不同心肌保护干预措施的内在作用机制。本实验分为叁个部分：第1部分：迷走神经刺激后处理对心肌缺血-再灌注损伤的保护作用及其最佳干预时间的研究第1部分实验的目的是采用大鼠在体心肌IRI模型比较性观察在不同时间点应用迷走神经刺激后处理对心肌IRI及其炎症反应的影响,以确定迷走神经刺激后处理的心肌保护作用及其最佳干预时间。将140只体重290～320g的成年雄性Sprague Dawley (SD)大鼠麻醉后随机平均分为七组(每组20只)：空白对照组(S组)；对照组(C组)；缺血预处理组(IPC组)；心肌缺血15min迷走神经刺激后处理组(POESI15组)；再灌注前迷走神经刺激后处理组(POESRO组)；再灌注30min迷走神经刺激后处理组处理组(POESR30组)；再灌注60min迷走神经刺激后处理组(POESR60组)。所有大鼠开胸后采用丝线将其冠状动脉左前降支(left anterior descending coronary artery, LAD)套扎做成活结。除S组之外,所用大鼠均接受局部心肌缺血30min(阻断LAD)和再灌注120min(开放LAD)的处理。C组不采用任何其他干预措施；IPC组在结扎LAD前进行3个循环的缺血预处理,每个循环是由5min的LAD阻断和5min的LAD开放组成,总处理时间是30min; POESI15、POESR0、POESR30和POESR60组是分别在心肌缺血15min时、心肌再灌注前即刻、心肌再灌注30min时和心肌再灌注60min时对大鼠的右侧迷走神经进行电刺激,持续时间为30min。实验过程中,连续监测心率(heart rate, HR)、平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)和Ⅱ导联心电图(electrocardiogram, ECG),并保持大鼠直肠温度在36.5～37.5℃之间。然后,将每组大鼠进一步随机平均分为2个亚组(每亚组10只),第1亚组在再灌注30min、60min和120min时抽取血液标本,采用大鼠专用试剂盒分别测定血清心肌肌钙蛋白I (cardiac troponin-I, cTnI)、肌酸激酶心肌型同工酶(myocardial-bound creatine kinase, CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、高迁移率组蛋白1(high mobility group box1protein, HMGB1)、细胞间粘附分子1(intercellular adhesion molecule1, ICAM1)、白介素-1(interleukin-1, IL-1)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)和白介素-10(interleukin-10, IL-10)的浓度；在实验结束时,采用伊文思蓝和氯化叁苯基四氮唑双重染色技术检测心肌梗死面积(infarct size, IS%)。在实验结束时,第2亚组用于检测缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织TNF-α、HMGB1、ICAM1、IL-1、IL-6和IL-10的含量。结果显示,各组大鼠的一般情况和心肌缺血前血流动力学参数的基础值比较差异无显着统计学意义。与S组、C组或IPC组相比,POESI15组的HR在缺血期和再灌注期间均明显降低,POESRO组、POESR30组和POESR60组的HR在再灌注期间明显降低。与S组相比,C组、IPC组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组在缺血期和再灌注期的MAP和心率血压乘积(rate-pressure product, RPP)均明显降低。与IPC组相比,C组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血期发生室性心律失常的大鼠数目明显增多,而且缺血期室性心律失常评分亦明显增高。与C组相比,IPC组、POESI15组和POESRO组再灌注初期发生室性心动过速(ventricular tachycardia, VT)的大鼠数目明显减少,而且再灌注初期室性心律失常评分亦明显降低。与C组相比,IPC组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组的IS%值、血清cTnI和CK-MB浓度均明显降低；与IPC组相比,POESI15组、POESRO组.POESR30组和POESR60组的IS%值均明显增高；与POESI15组相比,POESR60组的IS%值、血清cTnI、CK-MB浓度明显增高,POESRO组和POESR30组的IS%值、血清cTnI和CK-MB浓度无显着统计学差异；与POESRO组相比,POESR60组的IS%值、血清cTnI和CK-MB浓度明显增高,POESR30组的IS%值、血清cTnI和CK-MB浓度无显着统计学差异；与POESR30组相比,POESR60组的IS%值、血清CK-MB浓度无显着统计学差异。与S组相比,C组再灌注30min、60min和120min时血清TNF-a浓度明显增高；C组、IPC组和POESI15组再灌注60min时血清HMGB1浓度,C组、POESRO组、POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清HMGB1浓度明显增高；C组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清ICAM1浓度明显增高；C组、IPC组、POESRO组、POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清IL-1的浓度明显增高；C组、IPC组、POESR30组和POESR60组再灌注120mmin时血清IL-6浓度明显增高；POESI15组再灌注120min时血清IL-10浓度明显增高。与C组相比,IPC组和POESI15组再灌注30min和60min时血清TNF-a浓度明显降低；IPC组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清TNF-α、HMGB1、ICAM1、IL-1、IL-6浓度明显降低。与IPC组相比,POESI15组再灌注60mmin时血清TNF-a浓度明显增高；POESR60组再灌注120min时血清TNF-a浓度明显增高；POESRO组、POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清HMGB1和ICAM1浓度明显增高;POESI15组再灌注120mmin时血清IL-1的浓度明显降低；POESI15组和POESRO组再灌注120min时血清IL-6浓度明显降低。与POESI15组相比,POESRO组、POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清HMGB1和ICAM1的浓度明显增高；POESR60组再灌注120min时血清IL-1、IL-6和TNF-a的浓度明显增高。与POESRO组相比,POESR60组再灌注120min时血清HMGB1、IL-6和TNF-a的浓度明显增同；POESR30组和POESR60组再灌注120min时血清ICAM1浓度明显增高。与POESR30组相比,POESR60组再灌注120min时血清HMGB1、ICAM1和TNF-α浓度明显增高。与S组相比,C组缺血区心肌组织TNF-α和HMGB1含量明显增高,IPC组缺血区心肌组织TNF-α含量明显降低；C组和POESR60组非缺血区心肌组织TNF-a含量明显增高；C组非缺血区心肌组织HMGB1含量明显增高,IPC组、POESI15组、POESRO组和POESR30组非缺血区心肌组织HMGB1含量明显降低；C组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织ICAM1、IL-1和IL-6含量明显增高；C组和POESR60组非缺血区心肌组织ICAM1和IL-6含量明显增高,IPC组、POESI15组和POESRO组非缺血区心肌组织ICAM1含量明显降低；C组、IPC组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组非缺血区心肌组织IL-1含量、缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-10含量明显增高；IPC组和POESI15组非缺血区心肌组织IL-6含量明显降低。与C组相比,IPC组、POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织TNF-α、HMGB1、IL-1和IL-6含量明显降低；POESI15组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-10含量明显增高。与IPC组相比,POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织TNF-a含量明显增高；POESI15组非缺血区心肌组织HMGB1含量明显降低,POESR60组非缺血区心肌组织HMGB1含量明显增高；POESI15组、POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织ICAM1含量明显增高；POESR30组和POESR60组非缺血区心肌组织ICAM1、缺血区IL-6含量明显增高；POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-1、非缺血区心肌组织IL-6含量明显增高。与POESI15组相比,POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织TNF-a含量、非缺血区心肌组织ICAM1含量、缺血区心肌组织IL-1含量明显增高；POESR60组缺血区心肌组织HMGB1、IL-6含量明显增高,缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-10含量明显降低；POESRO组、POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织ICAM1含量、非缺血区心肌组织HMGB1、IL-1和IL-6含量明显增高。与POESRO组相比,POESR60组缺血区心肌组织TNF-α、HMGB1、IL-1、IL-6含量、非缺血区心肌组织HMGB1、IL-1和IL-6含量明显增高；POESR30组和POESR60组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织ICAM1含量明显增高。与POESR30组相比,POESR60组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织ICAM1和IL-6含量以及非缺血区心肌组织HMGB1含量均明显增高。第2部分：联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理对心肌缺血-再灌注损伤保护作用的研究根据第1部分实验的结果,在确定迷走神经刺激后处理最佳干预时间的基础上我们设计了这部分实验,其目的是评价联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理能否获得增强的心肌保护作用。将120只体重290-320g的成年雄性SD大鼠麻醉后随机平均分为六组(每组20只)：空白对照组(S组)；对照组(C组)；缺血预处理组(IPC组)；迷走神经刺激后处理组(POES组)；肢体远隔缺血后处理组(LRIPOC组)；联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理组(POES-LRIPOC组)。C组和IPC组的处理同第1部分实验；POES组是根据第1部分实验获得的结果在最佳时间点进行迷走神经刺激；LRIPOC组的基本处理与C组相同,在心肌缺血20min时采用止血带结扎大鼠双侧后肢造成双后肢缺血10mmin,并在开放LAD实施心肌血流再灌注的同时开放后肢血流灌注；POES-LRIPOC组的基本处理与C组相同,迷走神经刺激后处理的实施方法同POES组,肢体远隔缺血后处理的实施方法同LRIPOC组。然后,将每组大鼠进一步随机平均分为2个亚组(每亚组10只),各组检测项目与第1部分实验相同。结果显示,各组大鼠的一般情况和心肌缺血前血流动力学参数的基础值比较差异无显着统计学意义。与S组、C组或IPC组相比,POES组和POES-LRIPOC组的HR在缺血期和再灌注期明显降低。与S组相比,C组、IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组的MAP和RPP在缺血期和再灌注期均明显降低。与IPC组相比,C组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组缺血期室性心律失常发生率和室性心律失常评分明显增高。与C组相比,IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组再灌注期室性心律失常发生率和室性心律失常评分均明显降低；与LRIPOC组相比,IPC组、POES组和POES-LRIPOC组再灌注期间室性心律失常发生率和室性心律失常评分明显降低。与C组相比,IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组的IS%值、血清cTnI和CK-MB浓度均明显降低；与IPC组或POES-LRIPOC组相比,POES组和LRIPOC组的IS%值明显增高；与POES组相比,LRIPOC组的IS%值和血清cTnl浓度明显增高,LRIPOC组的血清CK-MB浓度明显降低。与LRIPOC组相比,IPC组和POES-LRIPOC组的血清cTnI和CK-MB浓度均明显降低。与S组相比,C组和LRIPOC组再灌注30min时血清TNF-a浓度明显增高；C组再灌注60min和120min时血清TNF-a浓度明显增高,IPC组和POES-LRIPOC组再灌注60min时血清TNF-a浓度明显降低；IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组再灌注120min时血清TNF-a浓度明显降低；C组、IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组再灌注60min时血清HMGB1浓度明显增高；C组和LRIPOC组再灌注120min时血清HMGB1浓度明显增高；C组、POES组和LRIPOC组再灌注120min时血清ICAM1浓度明显增高；C组、IPC组和LRIPOC组再灌注120min时血清IL-1和IL-6浓度明显增高；POES组和POES-LRIPOC组再灌注120min时血清IL-10浓度明显增高。与C组相比,IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组再灌注30min、60min和120min时血清TNF-a浓度、再灌注120min时血清HMGB1、ICAM1、IL-1、IL-6浓度明显降低；IPC组再灌注60min时血清HMGB1浓度明显降低；POES-LRIPOC组再灌注120min时血清IL-10浓度明显增高。与IPC组相比,POES组和LRIPOC组再灌注60min时血清TNF-a浓度明显增高；LRIPOC组再灌注120min时血清HMGB1和ICAM1浓度明显增高；POES组和POES-LRIPOC组再灌注120min时血清IL-1和IL-6浓度明显降低。与POES组相比,LRIPOC组再灌注60min时血清TNF-a浓度、再灌注120min时血清HMGB1、ICAM1、IL-1和IL-6浓度明显增高；POES-LRIPOC组再灌注120min时血清ICAM1浓度明显降低。与LRIPOC组相比,POES-LRIPOC组再灌注30min、60min和120min时血清TNF-a浓度、再灌注120min时血清HMGB1、ICAM1、IL-1和IL-6浓度均明显降低。与S组相比,C组缺血区心肌组织TNF-a和HMGB1含量以及非缺血区心肌组织TNF-α、HMGB1和ICAM1含量明显增高；IPC组和POES-LRIPOC组缺血区心肌组织TNF-a含量明显降低；IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组非缺血区心肌组织HMGB1含量明显降低；C组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组缺血区心肌组织ICAM1含量明显增高；IPC组、POES组和POES-LRIPOC组非缺血区心肌组织ICAM1和IL-6含量明显降低；C组、POES组和LRIPOC组缺血区心肌组织IL-1和IL-6含量明显增高；C组、IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组非缺血区心肌组织IL-1、IL-10含量、缺血区心肌组织IL-10含量明显增高；C组和LRIPOC组非缺血区心肌组织IL-6含量明显增高。与C组相比,IPC组、POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织TNF-α、HMGB1、ICAM1、IL-1和IL-6含量均明显降低；POES组和POES-LRIPOC组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-10含量明显增高。与IPC组相比,POES组和LRIPOC组缺血区心肌组织TNF-α、ICAM1和IL-1含量明显增高；POES-LRIPOC组缺血区心肌组织HMGB1含量明显降低,缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-10含量明显增高；POES组和POES-LRIPOC组非缺血区心肌组织HMGB1含量明显降低；LRIPOC组非缺血区心肌组织ICAM1、IL-1和IL-6含量,缺血区心肌组织IL-6含量明显增高。与POES组相比,POES-LRIPOC组缺血区心肌组织TNF-α、ICAM1和IL-1含量明显降低,非缺血区心肌组织IL-10含量明显增高；LRIPOC组非缺血区心肌组织HMGB1、ICAM1、IL-1和IL-6含量以及缺血区心肌组织ICAM1、IL-1和IL-6含量明显增高,缺血区心肌组织IL-10含量明显降低。与LRIPOC组相比,POES-LRIPOC组缺血区心肌组织TNF-α、ICAM1、IL-1和IL-6含量以及非缺血区心肌组织HMGB1、ICAM1、IL-1和IL-6含量明显降低,缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织IL-10含量明显增高。第3部分:PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在迷走神经刺激后处理以及联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理心肌保护作用机制中地位的研究本部分实验的目的是探讨PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在单独应用迷走神经刺激后处理以及联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理心肌保护作用机制中的地位。将20只体重290-320g的成年雄性SD大鼠麻醉后随机平均分为四组(每组5只)：对照组(C组)；迷走神经刺激后处理组(POES组)；肢体远隔缺血后处理组(LRIPOC组)；联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理组(POES-LRIPOC组)。各组的处理基本同本实验第二部分,但是在开放LAD实施再灌注60min时结束实验,分别取大鼠左心室缺血区心肌标本和右心室非缺血区心肌标本。从缺血与非缺血区心肌标本中提取总蛋白和总RNA,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction, RQ-PCR)技术观察Akt和STAT3基因mRNA在缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织的表达情况,并通过免疫蛋白印迹分析(Western-blotting)技术观察缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织Akt和STAT3蛋白磷酸化的情况。RQ-PCR结果显示,与C组相比,POES-LRIPOC组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织Akt基因和STAT3基因mRNA表达均明显增强；与POES组相比,POES-LRIPOC组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织Akt基因和STAT3基因mRNA表达明显增强；与LRIPOC组相比,POES-LRIPOC组缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织Akt基因和STAT3基因mRNA表达明显增强。Western-blotting结果显示,与C组相比,POES组、LRIPOC组和POES-LRIPOC组的缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织p-Akt蛋白和p-STAT3蛋白的灰度值明显增加；与POES组相比,POES-LRIPOC组的缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织p-Akt蛋白和p-STAT3蛋白的灰度值明显增加；与LRIPOC组相比,POES-LRIPOC组的缺血区心肌组织和非缺血区心肌组织p-Akt蛋白和p-STAT3蛋白的灰度值明显增加。结论通过本实验,我们得出以下结论：1.心肌缺血15min时、再灌注前即刻、再灌注30mmin和再灌注60min时实施迷走神经刺激后处理均能够明显减小IRI所致的心肌梗死面积,并明显降低血清cTnI和CK-MB浓度,其中以在再灌注60min实施迷走神经刺激后处理的心肌保护效果最差,以在心肌缺血15mmin时实施迷走神经刺激后处理的心肌保护效果最强,但是迷走神经刺激后处理的心肌保护作用弱于缺血预处理。2.缺血预处理、缺血期和再灌注期不同时间点进行迷走神经刺激后处理均能明显抑制再灌注期室性心律失常的发生；缺血15min时实施迷走神经刺激后处理抑制再灌注期心律失常的作用较其他时间点进行迷走神经刺激后处理更强。3.联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理能够获得更强的心肌保护作用,并且该心肌保护作用与缺血预处理的心肌保护作用几无差异。4.缺血预处理、缺血期和再灌注期不同时间点进行迷走神经刺激后处理、肢体远隔缺血后处理、联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理均能通过抑制心肌IRI过程中的炎症反应而发挥心肌保护作用。5. PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路相关基因在转录后蛋白磷酸化水平的上调参与了迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理的心肌保护作用；而PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路相关基因mRNA水平的上调则参与了联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理的心肌保护。同时,联合应用迷走神经刺激后处理和肢体远隔缺血后处理的心肌保护作用机制可能还涉及了PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路蛋白磷酸化水平的上调。
贺晓楠[3]2007年在《腺苷对缺血再灌注心肌的保护作用》文中指出本研究实验分为基础实验部分和临床试验部分。其中基础实验部分采用家兔缺血再灌注模型,观察应用腺苷和非特异性腺苷受体拮抗剂8-苯基茶碱及缺血后适应,通过对心肌收缩功能指标记录和测量、心肌梗死范围的测量、TUNEL法检测细胞凋亡、免疫组化检测心肌组织NF-κB的活性,以及应用酶谱法、RT-PCR及Western Blot方法观察基质金属蛋白酶变化。临床试验部分将急性心肌梗死患者随机分为腺苷组与生理盐水组,观察支架术后患者CK-MB峰值,同时测定冠脉血流帧数、心肌灌注显影、基质金属蛋白酶水平及存活心肌的数量。并观察静脉应用腺苷注射液的安全性,耐受性。结果显示:腺苷可以抑制缺血再灌注心肌的炎症反应,细胞凋亡及基质金属蛋白酶的活化,从而对缺血再灌注损伤的心肌有保护作用。
袁玉静[4]2012年在《联合应用肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的实验研究》文中研究表明缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury)的概念是在1960年由等Jennings首次提出,此后该问题成为了困扰医学工作者的一个难题。为了减轻心肌缺血再灌注损伤并最终缩小心肌梗死面积,在临床上和实验研究中均采取了多种干预措施。其中缺血预处理(ischemia preconditioning)强大的心肌保护作用已得到公认,但临床缺血事件的不可预测性使其更多地是停留在了理论层面。除了短暂缺血之外,多种刺激均可诱发缺血预处理样保护作用。吸入麻醉药七氟烷后处理的心肌保护作用已经在动物和人体研究中得到了证实,七氟烷后处理的主要优点是操作简单和实施容易,并且能够与其他多种心肌保护干预措施联合应用,对于减轻心肌缺血再灌注损伤是一种极具临床应用前景的干预措施。肢体远隔缺血后处理(limb remote ischemic postconditioning)是通过在上肢或下肢等部位实施远隔缺血刺激,以保护心肌对抗缺血再灌注损伤。肢体远隔缺血后处理的主要优点是实施简单、无需有创操作和不需要额外的费用,具有广阔的临床应用前景。低氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor1, HIF-1)能够在转录水平调节多种基因的表达,在细胞和组织缺血适应过程中发挥着至关重要的作用。其下游基因血红素氧化酶1(Heme oxygenase1, HO-1)和诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)具有保护心肌对抗缺血再灌注损伤的作用。丝氨酸／苏氨酸激酶Akt和细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK1/2)是再灌注损伤救援激酶途径(reperfusion injury salvage kinase pathway, RISK途径)的重要组成成分,是各种不同干预措施发挥心肌保护作用的交汇点。在缺血再灌注过程中, RISK途径激活能够对心肌损伤产生强大的保护作用。本实验从临床应用出发,拟观察联合应用两种极具应用前景的干预措施—七氟烷后处理和肢体远隔缺血后处理能否获得有益的协同性心肌保护作用。同时对缺血缺氧过程中关键转录因子HIF-1的表达情况以及RISK途径的激活情况进行观察,以初步探讨这两种干预措施发挥作用的机制。全部实验共分叁个部分：第一部分：联合应用肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理组处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用采用8周龄、体重250-320g的健康Sprague Dawley (SD)大鼠建立在体心肌缺血再灌注损伤模型,共分六个实验组(每组10只大鼠)：空白对照组(CON组)、缺血再灌注损伤组(IR组)、缺血预处理组(IPC组)、肢体远隔缺血后处理组(LRIPOC组)、七氟烷后处理组(SEVPOC组)以及联合应用肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理组(COMBINE组)。所有大鼠开胸后采用5-0丝线将冠状动脉左前降支(left anterior descending coronary artery, LAD)套扎做成活结。除CON组之外,所有大鼠均接受阻断LAD局部心肌缺血30min和开放LAD心肌血流再灌注120min的处理。IR组不采取任何其他措施；IPC组结扎LAD前进行3个循环(每个循环为5min缺血-5min再灌注)的缺血预处理,总处理时间为30min；LRIPOC组在心肌缺血15min时采用止血带结扎大鼠双侧后肢造成缺血10min,并在再灌注前5min开放后肢血流灌注；SEVPOC组在开放LAD实施再灌注前5min经小动物麻醉机的挥发罐吸入1MAC的七氟烷,直至再灌注后5min；COMBINE组在心肌缺血15min时采用止血带结扎大鼠双侧后肢造成肢体缺血10min,再灌注前5min开放后肢血流灌注,并吸入1MAC的七氟烷,直至再灌注后5min。实验过程中维持大鼠直肠体温在37-38℃范围内,连续监测心率(heart rate, HR)、收缩压(systolic blood pressure, SBP)、舒张压(diastolic blood pressure, DBP)、平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)和Ⅱ导联ECG,并计算HR和SBP的乘积(rate-pressure product, RPP)作为心肌氧耗指数。记录实验中心律失常情况并进行评分。在再灌注120min时抽取动脉血标本,采用ELISA试剂盒检测大鼠血清乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶心肌型同工酶(creatine kinase MB isoenzyme, CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(cardiac Troponin-Ⅰ, cTnⅠ),并采用伊文思蓝和氯化叁苯基四氮唑(TTC)双重染色测定梗死面积(infarct size, IS%)。排除实验中不合格的大鼠,最终共有49只大鼠纳入实验,其中CON组9只,IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组个IPC组各8只。各组大鼠的一般情况、缺血面积占左心室比值各组间比较差异均无统计学意义。与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组和COMBINE组再灌注初期发生心律失常的动物数有所减少和心律失常的持续时间有不同程度的缩短,但是差异无统计学意义。与IPC组相比,IR组、LRIPOC组、SEVPOC组和COMBINE组再灌注初期发生心律失常的动物数显着增多,心律失常持续时间和心律失常评分明显升高。血清LDH浓度的总体组间比较差异有显着统计学意义(F=51.503,P<0.01)。与CON组相比,IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组血清LDH浓度明显升高；与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组血清LDH浓度明显降低；与IPC组相比,COMBINE组血清LDH浓度无显着统计学差异,但LRIPOC组和SEVPOC组血清LDH浓度明显升高；LRIPOC组和SEVPOC组血清LDH浓度比较差异无显着统计学意义；与COMBINE组相比,LRIPOC组和SEVPOC组血清LDH浓度明显升高。血清CK-MB浓度的总体组间比较差异有显着统计学意义(F=32.244,P<0.01)。与CON组相比,血清CK-MB浓度在IPC组和COMBINE组无显着统计学差异,在IR组、LRIPOC组和SEVPOC组明显升高；与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组血清CK-MB浓度明显降低；与IPC组相比,LRIPOC组和SEVPOC组血清CK-MB浓度的明显升高；与COMBINE组相比,LRIPOC组和SEVPOC组血清CK-MB浓度无显着统计学差异。血清cTnI浓度的总体组间比较差异有显着统计学意义(F=81.511,P<0.01)。与CON组相比,IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组血清cTnl浓度明显升高；与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组血清cTnI浓度明显降低；与IPC组相比,血清cTnI浓度在COMBINE组无显着统计学差异,在LRIPOC组和SEVPOC组明显升高；LRIPOC组和SEVPOC组血清cTnI浓度比较差异无显着统计学意义；与COMBINE组相比,LRIPOC组和SEVPOC组血清cTnI浓度明显升高。各组的心肌梗死面积(IS%值)为：CON组,(3.7±3.4)%；IR组,(64.2±13.6))%：LRIPOC组,(45.8±15.6)%；SEVPOC组,(43.6±9.7)%；COMBINE组,(30.9±11.3)%；IPC组,(22.0±5.0)%。IS%值的总体组间比较差异具有显着统计学意义(F=33.333,P<0.01)。心肌梗死面积两组之间的比较结果如下：与CON组相比,IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组心肌梗死面积明显增大；与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组心肌梗死面积明显缩小；与IPC组相比,心肌梗死面积在COMBINE组无显着统计学差异,在LRIPOC组和SEVPOC组明显增大；与COMBINE组相比,LRIPOC组和SEVPOC组心肌梗死面积明显增大。第二部分：HIF-1在联合应用远隔缺血后处理和七氟烷后处理心肌保护作用中的地位采用8周龄、体重250-320g的健康SD大鼠建立在体心肌缺血再灌注损伤模型,即结扎大鼠LAD实施局部心肌缺血30min后开放LAD实施心肌血流再灌注60min。共分五个实验组(每组5只大鼠)：缺血再灌注损伤组(IR组)、缺血预处理组(IPC组)、肢体远隔缺血后处理组(LRIPOC组)、七氟烷后处理组(SEVPOC组)以及联合应用肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理组(COMBINE组)。实验过程中维持大鼠直肠温度在37-38℃范围内。再灌注末,再次结扎大鼠LAD,并迅速摘取大鼠心脏。留取结扎线以下颜色灰白的左心室组织作为缺血区心肌组织,留取右心室作为非缺血区心肌组织；同时留取大鼠后肢肌肉(触发远隔缺血后处理的组织)和前肢肌肉(非触发组织)。采用实时定量PCR技术检测(2-ΔΔct法)组织内HIF-1α、HO-1和iNOS基因的表达。非缺血心肌组织目的基因的表达情况如下：非缺血区心肌组织内HIF-1αmRNA表达量的均值是按照IR组、LRIPOC组、SEVPOC组.COMBINE组和IPC组的顺序递增。与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组非缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量明显增高；与IPC组相比,LRIPOC组、SEVPOC组和COMBINE组非缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量明显降低；与LRIPOC组相比,非缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量在SEVOPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组明显增高。与SEVPOC组相比,COMBINE组非缺血区心肌组织内HIF-1αmRNA的表达量明显增高。非缺血心肌组织内HO-1mRNA表达量的均值是按照IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。与IR组相比,非缺血心肌组织内HO-1mRNA表达量在LRIPOC组和SEVPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组和IPC组明显增高；与IPC组相比,非缺血心肌组织内HO-1mRNA表达量在COMBINE组无显着统计学差异,在LRIPOC组和SEVPOC组明显降低。与LRIPOC组相比,SEVPOC组和COMBINE组非缺血心肌组织内HO-1mRNA表达量明显增高；与SEVPOC组相比,COMBINE组非缺血心肌组织内HO-1mRNA表达量明显增高。非缺血心肌组织内iNOS mRNA表达量的均值是按照IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。与IR组相比,非缺血心肌组织内iNOS mRNA表达量在LRIPOC组无显着统计学差异,在SEVPOC组、COMBINE组和IPC组明显增高；与IPC组相比,非缺血心肌组织内iNOS mRNA表达量在COMBINE组无显着统计学差异,在LRIPOC组和SEVPOC组明显降低；与LRIPOC组相比,非缺血心肌组织内iNOS mRNA表达量在SEVPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组明显增高；与SEVPOC组相比,COMBINE组非缺血心肌组织内iNOS mRNA表达量无显着统计学差异。缺血心肌组织目的基因的表达情况如下：缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量的均值是按照IR组、LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量明显增高；与IPC组相比,LRIPOC组、SEVPOC组和COMBINE组缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量明显降低；LRIPOC组、SEVPOC组和COMBINE组缺血区心肌组织内HIF-1α mRNA表达量比较差异无显着统计学意义。缺血区心肌组织内HO-1mRNA的表达量的均值是按照IR组、IPC组、SEVPOC组、COMBINE组和LRIPOC组的顺序递增。与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组缺血区心肌组织内HO-1mRNA表达量明显增高；LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组缺血区心肌组织内HO-1mRNA表达量比较差异无显着统计学意义。缺血区心肌组织内iNOS mRNA表达量的均值是按照IR组、SEVPOC组、IPC组、COMBINE组和LRIPOC组的顺序递增。与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组缺血区心肌组织内iNOS mRNA表达量明显增高；与IPC组相比,缺血区心肌组织内iNOS mRNA表达量在SEVPOC组和COMBINE组无显着统计学差异,在LRIPOC组明显增高；与LRIPOC组相比,SEVPOC组和COMBINE组缺血区心肌组织内iNOS mRNA表达量明显降低。第叁部分PI3K/Akt和ERKl/2信号转导通路在联合应用远隔缺血后处理和七氟烷后处理心肌保护作用中的地位采用8周龄、体重250-320g的健康SD大鼠建立在体心肌缺血再灌注损伤模型,即结扎大鼠LAD实施心肌缺血30min,然后开放LAD实施心肌血流再灌注60min。共分五个实验组(每组5只大鼠)：缺血再灌注损伤组(IR组)、缺血预处理组(IPC组)、肢体远隔缺血后处理组(LRIPOC组)、七氟烷后处理组(SEVPOC组)以及联合应用肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理组(COMBINE组)。实验过程中维持大鼠直肠温度在37-38℃。再灌注期末,再次结扎LAD,并迅速摘取心脏。留取结扎线以下颜色灰白的左心室组织作为缺血区心肌组织,留取右心室作为非缺血区心肌组织。采用Western-Blot技术检测大鼠心肌组织内Akt、磷酸化p-Akt、ERK1/2和磷酸化p-ERK1/2的表达情况,并计算p-Akt与Akt的比值以及p-ERK1/2与ERK1/2的比值。结果显示：缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值的各组间比较是IR组的数值最小,并按照LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值的组间比较结果如下：与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值明显升高；与IPC组相比,LRIPOC组、SEVPOC组和COMBINE组缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值明显降低；与LRIPOC组相比,缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值在SEVPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组明显升高；与SEVPOC组相比,COMBINE组缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值明显升高。非缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值与缺血区心肌组织相似,同样也是IR组的数值最小,并按照LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。非缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值的组间比较结果如下：与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组非缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值明显升高；与IPC组相比,非缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值在LRIPOC组和SEVPOC组明显降低,在COMBINE组无显着统计学差异；与LRIPOC组相比,非缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值在SEVPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组明显升高；与SEVPOC组相比,COMBINE组非缺血区心肌组织内p-Akt/Akt比值明显升高。缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值的各组间比较是IR组的数值最小,并按照LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值的组间比较结果如下：与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值明显升高；与IPC组相比,缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值在LRIPOC组和SEVPOC组明显降低,在COMBINE组无显着统计学差异；与LRIPOC组相比,缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值在SEVPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组明显升高；与SEVPOC组相比,COMBINE组缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值明显升高。非缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值与缺血区心肌组织相似,同样也是IR组的数值最小,并按照LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组的顺序递增。非缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值的组间比较结果如下：与IR组相比,LRIPOC组、SEVPOC组、COMBINE组和IPC组非缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值明显升高；与IPC组相比,非缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值在LRIPOC组和SEVPOC组明显降低,在COMBINE组无显着统计学差异；与LRIPOC组相比,非缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值在SEVPOC组无显着统计学差异,在COMBINE组明显升高；与SEVPOC组相比,COMBINE组非缺血区心肌组织内p-ERK/ERK比值明显升高。结论通过本实验,我们得出以下结论：1.在大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型,肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理均能有效减轻心肌缺血再灌注损伤；联合应用两种干预措施能够进一步减轻心肌缺血再灌注损伤。2.肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理均能诱发系统性保护作用,即两种干预措施均能诱发缺血区心肌、非缺血区心肌、缺血区下肢肌肉内HIF-1α、HO-1和iNOS基因表达加强；联合应用两种干预措施能够进一步增强上述基因的表达。3.肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理均能诱导Akt和ERK1/2磷酸化,提示这两种干预措施对心肌缺血再灌注损伤的保护作用是通过激活RISK途径实现的。
陈威[5]2006年在《腺苷对心脏停搏后自主循环恢复影响的实验研究》文中进行了进一步梳理目的 肾上腺素作为心跳骤停主要复苏药物已有50年的临床应用历史,却有研究表明,肾上腺素在增加心脑灌注压和血流量的同时,又可能损害心肌和脑组织,最终未能使死亡率降低。探讨心肺复苏时其他药物的应用,以减少肾上腺素负面影响,力图提高心肺复苏成功率,已成为该领域研究的重点。 腺苷在缺血再灌注损伤中具有特异的心肌和脑组织保护作用。心肺复苏本身就是机体缺血损伤及再灌注的过程。在心肺复苏中联合应用腺苷可能会减轻再灌注损伤,从而提高复苏成功率、改善微循环,保护心脑功能,改善临床预后。本研究对腺苷在心脏停搏后自主循环恢复的影响进行了实验观察。 方法 本研究共分为两个部分:第一部分观察腺苷对窒息兔自主循环恢复的影响,采用窒息法制作兔心脏停搏模型,将实验动物随机分为对照组(A组n=6)、肾上腺素组(B组n=12)、肾上腺素合并腺苷组(C组n=12)。持续窒息4min后,行胸外心脏按压,呼吸机辅助呼吸,4min后静脉给药。A组不用复苏药物;B组静脉注射肾上腺素90μg/kg;C组静脉注射肾上腺素90μg/kg并持续静滴腺苷150μg/kg/min至复苏结束。观察自主循环恢复率、复苏成功率;复苏成功后血浆肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸(Lac)浓度:光学显微镜及透射电镜下观察心肌和脑海马组织结构改变。第二部分观察腺苷在心肺复苏中对窒息大鼠肠系膜和心肌微循环的影响,窒息模型制作、实验分组和实验方法同第一部分。观察自主循环恢复率、复苏成功率;腺苷在复苏前后对肠系膜血管再通率、血管管径和血流速度的影响;心肌毛细血管数量和所占面积的改变;腺苷对肠壁组织血液灌流量的变化。 结果 第一部分,窒息兔自主循环恢复率和复苏成功率,C组(100%,83.3%)>B组(83.3%,58.3%)>A组(0,0);血浆CK、CK-MB和Lac浓度,复苏后C组(855±191U/L,1506±692U/L,8.4±2.7mmol/L)<B组(1136±332 U/L,2365
高静[6]2016年在《远隔缺血适应减轻急性ST段抬高型心肌梗死患者再灌注损伤的临床研究》文中研究指明目的:(1)通过meta分析探讨缺血后适应(IPost C)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者预后的影响;(2)通过临床试验探讨远隔缺血即时适应(RIPer C)对急性STEMI患者早期再灌注损伤的心肌保护作用的临床效果评价及对血清CRP、MMP-9、MDA、NOS的影响;(3)通过对临床试验入组病例随访12个月,评估RIPer C对STEMI患者远期预后的影响。方法:(1)以“IPost C”、“STEMI”、“缺血再灌注(I/R)损伤”、“冠状动脉介入治疗(PCI)”及“临床随机对照试验(RCT)”作为关键词,在Pub Med,EMbase,以及Cochrane Library数据库检索2014年12月30日以前公开发表的关于IPost C应用于急性STEMI患者的相关文献。由两个独立的研究者进行文献检索及数据提取。通过Rev Man5.3软件进行数据分析。(2)选取我院急诊行PCI的STEMI患者进行随机分组,最终纳入126例,对照组66例和RIPer C组60例。其中对照组在再灌注前不施加任何干预措施,行常规操作植入支架,RIPer C组进入导管室后穿刺开始的同时进行左下肢RIPer C,于左下肢膝以上3cm绑缚无创血压袖带,穿刺同时开始充气加压阻断左下肢血流,充气5分钟,放气5分钟,压力200mm Hg,重复3个循环。比较两组心肌酶、肌钙蛋白T(c Tn T)、术后1小时ST段回落率的差异、术后再灌注心律失常的发生率以及PCI术前、术后4小时血清C反应蛋白(CRP)、丙二醛(MDA)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、一氧化氮合酶(NOS)水平的变化。(3)对临床试验入组病例进行为期12个月的随访,根据MACCE事件和其他心血管事件的发生率、左心室射血分数(LVEF)和室避运动评分(WMSI)评估RIPer C对STEMI患者远期预后的影响。结果:(1)在纳入研究的25篇文献中,总共有2289名患者被纳入meta分析,后适应(Po C)组有1136名患者,对照组(Con)组有1153名患者。整体分析结果显示,与Con组比较,后Po C组CK水平没有明显下降(SMD=-0.49;95%CI(-1.09,-0.1);I 2=91%;P=0.11)。各个研究之间存在很大异质性(Cochran Q检验,P<0.00001,I2=91%)。根据PCI的方式,即直接支架置入或其他方式(包括直接支架置入、球囊扩张和血栓抽吸等),将纳入文献进行亚组分析,支架置入亚组各研究之间异质性显着下降(SMD=-0.82;95%CI(-1.18,-0.47);I 2=64%;P<0.00001),提示PCI方式选择支架置入的患者中,IPost C可显着降低PCI术后CK水平。其他PCI方式组各研究之间异质性没有明显下降(SMD=0.96;95%CI(-0.66,2.58);I 2=96%;P=0.25),这些结果显示IPost C可以减轻心肌损伤。CK-MB的分析结果与CK相似。通过影像学检查评估梗死面积,结果提示IPost C组在心肌梗死后短期心肌梗死面积(IS)显着减少(SMD=-0.6;95%CI(-1.09,-0.11);I 2=75%;P=0.02),在随访4个月以上结果分析显示,两组无显着差异(SMD=-0.43,95%CI(-0.9,-0.04);I 2=87%;P=0.08)。与Con组比较,无论是短期还是远期,Poc组LVEF和WMSI均显着改善(P<0.05)。(2)远隔缺血即时适应的临床试验研究结果显示,与对照组比较,RIPer C组酶学检查结果显示PCI术后72小时CK-MB峰值和曲线下面积均显着减少(281.8±22.33 U/L vs.368.8±24.96U/L,P=0.011;6179±437.9 vs.8130±534.7a.u.,P=0.006)。两组患者在PCI术后24小时,c Tn T峰值比较结果显示,RIPer C组c Tn T峰值显着低于对照组(5.211±0.47 VS 6.799±0.321,P=0.007)。RIPer C组PCI术后1小时ST段完全回落率显着高于对照组(P<0.05)。PCI术后2h内均有再灌注心律失常发生。RIPer C组与对照组相比,加速性室性自主心律发生率明显降低(50%vs 25%,P<0.05)。术后4h RIPer C组MDA、CRP显着低于对照组(P<0.05),RIPer C组NOS显着高于对照组(P<0.05),两组MMP-9水平在PCI术后均显着增高,两组间无显着差异。PCI术后7天心脏18F-FDGPET-CT检查结果显示RIPer C组心肌存活的节段数显着高于对照组。(3)对临床试验入组患者进行为期12个月的随访结果显示,在PCI术后6个月内两组心脑血管不良事件的发生率无显着差异,但是6-12个月RIPer C组靶血管重建、再发心绞痛、因心源性疾病再入院的发生率显着降低(P<0.05)。12个月的生存曲线分析结果显示,RIPer C组心脑血管不良事件发生率显着减少(P<0.05)。随访12个月后77人完成心脏超声复查,其中对照组40人,RIPer C组37人,两组LVEF和WMSI均无显着差别(P>0.05)。但是亚组分析发现,单支病变的患者RIPer C组LVEF较对照组显着增高(P<0.05),WMSI较对照组显着降低(P<0.05)。结论:(1)与常规PCI相比,STEMI患者在PCI术中冠脉进行IPost C循环可减少心肌损伤,最终减少梗死面积,改善心功能。在PCI行支架置入的患者中,作用更加明显。(2)STEMI患者在血管再通之前反复阻断左下肢血流进行RIPer C循环,可显着减少梗死面积,增加梗死区心肌细胞存活,在罪犯血管为前降支(LAD)的患者中,心肌保护作用更加明显。(3)RIPer C可改善STEMI患者临床远期预后。
王智昊[7]2015年在《25-羟基—原人参叁醇对大鼠实验性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制的研究》文中提出冠心病是危害人类健康的严重疾病，心肌梗死更是“第一危险杀手”，尽早对缺血心肌再灌注是治疗心梗的根本措施，但是心肌缺血再灌注往往造成“二次损伤”，可导致缺血区心肌损伤进行性加重。所以如何减轻心肌缺血再灌注损伤（myocardialischemia/reperfusion injury，MI/RI）已成为医学工作者研究的热点，寻找一种安全、有效的药物更是迫在眉睫。人参是我国传统的中药，具有保护缺血心肌、抗氧化、抗肿瘤、提高免疫力等诸多方面的作用。25-羟基-原人参叁醇[25hydroxyl-Protopanaxatriol，25-OH-PPT，代号T19，下文以T19出现，化学名：20（R）-达玛烷-3β，6α，12β，20，25-五醇，分子式：C30H54O5，分子量：494]，是从人参茎叶中提取出的单体，属于原人参叁醇类，是一种人参皂苷元。据文献报道，人参总皂苷及人参二醇组皂苷具有抗心肌缺血再灌注损伤的作用，但关于25-羟基-原人参叁醇对于心肌缺血再灌注损伤的影响尚未见报道。那么此种人参单体能否成为保护心肌缺血再灌注损伤的安全有效的药物呢？将是本课题研究的重点。本研究首先采用在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型，研究T19对大鼠MI/RI的保护作用及其机制；其次应用H2O2诱导的H9c2心肌细胞模型，研究T19对H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激性损伤的保护作用及其机制。第一部分25-羟基-原人参叁醇预处理对大鼠实验性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用目的：观察25-羟基-原人参叁醇预处理对Wistar大鼠心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）损伤的保护作用及与药物剂量的相关性，观察PI3K抑制剂LY294002对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法：（1）将实验动物Wistar大鼠，雌雄各半，体重180-250g，分为7组（每组20只）：假手术Sham组，I/R组，T19a组（I/R+T19低剂量），T19b组（I/R+T19中剂量），T19c组（I/R+T19高剂量），抑制剂组（I/R+T19高剂量+LY294002），阳性药曲匹地尔Trapidil组（I/R+Trapidil）。T19低、中、高剂量分别为5、10、20mg/kg/d，灌胃7d。抑制剂组：20mg/kg/d T19灌胃7d，末次灌胃前30min腹腔注射LY2940020.3mg/kg。Trapidil剂量为：15mg/kg/d，灌胃7d。（2）大鼠麻醉后，结扎大鼠左冠状动脉前降支制成心肌缺血模型，使心肌缺血30min，再灌注24h，制备缺血再灌注损伤模型，观察缺血再灌注24h的心电图、超声心动图，取心脏用氯化硝基四氮唑蓝（NBT）染色法检测心梗面积，在光镜和电镜下观察心脏左室前壁的超微结构。用TUNEL法评估心肌细胞凋亡指数（AI）。检测再灌注24h心肌酶CK-MB、LDH和AST的含量。测量再灌注24h血清中SOD的活性，MDA的含量，CAT及GSH-Px的活性。结果：（1）缺血30min再灌注24h后，与I/R组比较，T19低剂量组心电图ST段比I/R组有下移，但无统计学意义（P>0.05），中、高剂量组与I/R组相比有明显下移（P<0.01，P<0.01），下移程度与T19剂量呈正相关。（2）与I/R组比较，T19低、中、高剂量组心肌梗死面积减少，低剂量组无统计学意义（P>0.05），中、高剂量组与I/R组相比有明显减少（P<0.05，P<0.05），减少程度与剂量呈正相关。（3）缺血前30min各组大鼠基线心脏超声测量结果无显着性差异。再灌注24h后，与I/R组比较T19低剂量组有增加左室射血分数（LVEF）和减少左室舒张末期容积（LVEDV）及左室收缩末期容积（LVESV）的趋势，但无显着差异（P>0.05）。T19中、高剂量组明显增加了LVEF值（P<0.01），降低了LVEDV和LVESV（中、高剂量组均为P <0.01），改变程度与T19剂量呈正相关。（4）再灌注24h后，与I/R组比较，T19低剂量组CK-MB、LDH、AST有减少趋势，但是无显着差异（P>0.05）；T19中、高剂量组可明显减少血清中CK-MB、LDH、AST值，有显着差异（P<0.05，P<0.05，P<0.05），且改变趋势与T19剂量呈正相关。（5）T19高剂量组明显增高了SOD、CAT、GSH-Px含量（P<0.05，P<0.05，P<0.01），降低了MDA含量（P<0.05），T19低、中剂量组对SOD、CAT、MDA没有明显改变（P>0.05），但两组可明显增高GSH-Px的含量（P<0.05，P<0.01）。（6）心肌病理学改变：在光镜、电镜下观察及用TUNEL检测：与I/R组相比，T19中、高剂量组能明显减少心肌坏死细胞，减少炎症细胞浸润，减少凋亡指数（P<0.01）。减少程度与剂量呈正相关。T19低剂量组则也有上述表现，但没有统计学差异（P>0.05）。与阳性药Trapidil组相比较，T19中剂量组对缺血再灌注损伤心肌的保护作用，与Trapidil组作用相当，而PI3K通路抑制剂LY294002组对心肌的保护作用均被阻断。结论：25-羟基-原人参叁醇对大鼠实验性心肌缺血再灌注损伤有保护作用，低剂量无明显保护作用，中、高剂量组有明显保护作用，且作用效果与剂量高低呈正相关。PI3K/Akt通路参与了T19对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。第二部分25-羟基-原人参叁醇通过PI3K/Akt信号通路介导对大鼠实验性心肌缺血/再灌注损作用的机制研究目的：探讨PI3K/Akt信号通路在25-羟基-原人参叁醇预处理对大鼠实验性心肌缺血/再灌注损作用的机制。方法：（1）选用Wistar大鼠，雌雄各半，体重180-250g，随机分为5组（每组10只）：假手术Sham组，I/R组，T19组（I/R+T19），抑制剂组（I/R+T19+LY294002），Trapidil组（I/R+Trapidil）。T19组剂量为20mg/kg/d，灌胃7d，抑制剂组：20mg/kg/d的T19灌胃7d，末次灌胃前30min腹腔注射LY2940020.3mg/kg。Trapidil组剂量为15mg/kg/d，灌胃7d。结扎大鼠左冠状动脉前降支制成心肌缺血模型，使心肌缺血30min，再灌注24h后留取心脏和血清。（2）用Western blot法及免疫组化法检测各组心肌组织中Akt、p-Akt(Ser-473)、eNOS、p-eNOS（Ser-1177）、Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。用硝化还原法检测各组血清中NO的含量。结果：（1）Western blot法及免疫组化法检测发现：各组心肌细胞中Akt和eNOS蛋白含量相当，没有显着差别（P>0.05）。T19组与I/R组比较明显上调磷酸化Akt及磷酸化eNOS蛋白含量（P<0.01），给予LY2940002后与T19组比较，明显下调磷酸化Akt及磷酸化eNOS蛋白含量（P<0.01）。（2）硝化还原法检测发现：T19组比I/R组NO含量明显增加（P<0.01），给予LY294002后，NO含量比T19组明显减少（P<0.01）。（3）Western blot法及免疫组化法检测发现：与Sham组比较，I/R组心肌组织中Caspase-3表达明显上调（P<0.01），Bcl-2表达明显下调（P<0.01），Bax表达明显上调（P<0.01）。与I/R组比较，T19组明显上调Bcl-2表达（P<0.01），明显下调Bax和Caspase-3表达（P<0.01，P<0.01）。抑制剂LY294002组则与I/R组相当，比T19组明显上调Bax和Caspase-3的表达（P<0.01，P<0.01），明显下调Bcl-2的表达（P<0.01）。Trapidil组比I/R组明显上调磷酸化Akt及磷酸化eNOS蛋白含量（P<0.01），明显增加NO含量（P<0.05），明显上调Bcl-2表达（P<0.01），明显下调Bax和Caspase-3表达（P<0.01，P<0.01）。结论：（1）25-羟基-原人参叁醇减少大鼠心肌缺血再灌注的损伤可能与磷酸化Akt、磷酸化eNOS及NO有关。（2）25-羟基-原人参叁醇抗心肌细胞凋亡可能是通过上调Bcl-2、下调Bax和Caspase-3蛋白表达实现的。（3）PI3K/Akt信号通路在缺血再灌注损伤后心肌保护中起了重要作用。其机制可能与PI3K/Akt通路介导凋亡蛋白的表达有关。（4）25-羟基-原人参叁醇通过激活PI3K/Akt信号通路，保护心脏细胞内皮功能，减少凋亡，减轻心肌缺血再灌注损伤。第叁部分25-羟基-原人参叁醇对H2O2诱导的H9c2心肌细胞的保护作用及机制的研究目的：探讨25-羟基-原人参叁醇对H2O2诱导的H9c2心肌细胞损伤模型的保护作用及机制。方法：（1）将H9c2心肌细胞分为七组：Control组、H2O2组、H2O2+T19低、中、高剂量组，H2O2+T19大剂量+LY294002组，阳性药Trapidil组。T19低、中、高剂量为31.25、62.5、125μg/ml，T19剂量预处理H9c2心肌细胞4h，然后即加入250μM H2O2作用6h；H2O2+T19高剂量+LY294002组的给药方法为先用25μM LY294002处理H9c2心肌细胞1h,之后再加入125μg/ml人参皂甙单体T19作用4h，最后加入250μM H2O2作用6h；阳性药Trapidil组剂量为30μg/ml。（2）用MTT法检测细胞活力，在显微镜下观察细胞形态，用Annexin-FITC/PI流式细胞仪荧光双染及Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡，评价T19对心肌细胞H2O2损伤是否具有保护作用及PI3K/Akt通路的参与作用。（3）再将H9c2心肌细胞分为五组：Control组，H2O2组，H2O2+T19组，H2O2+T19高剂量+LY294002组，阳性药Trapidil组。T19组剂量为125μg/ml，给药方法同前。（4）用Western blot法测上述五组Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS、Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。结果：（1）用不同浓度的T19预处理H9c2心肌细胞，可减少H2O2诱导的H9c2心肌细胞损伤，减少细胞凋亡，并在一定范围内与T19剂量成正比。加入PI3K/Akt抑制剂LY294002后阻断了T19的保护作用。Trapidil组结果与T19高剂量组相当。（2）T19组比H2O2组明显上调磷酸化Akt及磷酸化eNOS表达(P<0.01)，LY组比T19组明显下调磷酸化Akt及磷酸化eNOS的蛋白表达(P<0.01)，T19组比H2O2组明显上调Bcl-2表达(P<0.01)，明显下调Bax和Caspase-3表达(P<0.01, P<0.01)，LY组比T19组明显下调Bcl-2表达(P<0.01)，上调Bax和Caspase-3表达(P<0.01, P<0.01)。Trapidil组表达与T19组相当。结论：25-羟基-原人参叁醇对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤模型有保护作用。其机制可能与激活PI3K/Akt通路来调节凋亡相关蛋白，进而减轻H9c2细胞凋亡有关。
陈春玲[8]2015年在《围术期在体全心脏心肌保护关键技术的研发与实验研究》文中认为研究一目的:探讨建立双体外循环(Double-bypass)模型,实施在体心脏缺血预处理(IPC)与缺氧预处理(HPC)的安全性、可行性;以及双体外循环模型实施在体心脏IPC/HPC的效果及临床应用转化的可能性。方法:1)10只健康比格犬用于建立体外循环(CPB),Double-bypass及Double-bypass下实施IPC/HPC模型,分别观察HR,MAP,CVP,血气分析检测指标以及能否顺利停机,评价模型建立是否成功。2)18只比格犬按随机数字表分为3组:①对照组(C组):建立Double-bypass,不实施任何预处理;②IPC组:建立Double-bypass,实施IPC;③建立Double-bypass,实施HPC,然后各组均CPB转流1小时,再灌注2小时。分别检测血流动力学和心肌动力学指标(HR、MAP、CVP、LVESP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax),心肌损伤指标(cTnI)和凋亡心肌细胞检测,心肌组织ATP含量,以及电镜观察心肌病理结构。结果:1)Double-bypass犬模型建立成功,Double-bypas能够用于实施在体全心脏的IPC和HPC。2)与C组比较,Double-bypass犬模型实施IPC和HPC明显降低再灌注引起的左室收缩功能下降(P<0.05)。HPC组和IPC组血清cTnI水平也较C组更低(P<0.001),心肌细胞凋亡比率也更低(13.69%,10.02%vs.18.49%,分别P<0.001)。HPC比IPC对心肌细胞结构保护更好,凋亡更少,并且只有HPC组明显减少了心肌细胞ATP的消耗(ATPReperfusion/Baseline<0.05)。结论:双体外循环环路实施在体心脏IPC/HPC是可行的,有效的,能更好地保护左室收缩功能,减少心肌结构损伤,HPC比IPC能更好地保存心肌ATP。研究二目的:探讨改变非去极化心脏停搏液-腺苷利多卡因(AL)停搏液的载液和提高氧含量后,自主研发出新型高张氧醋酸林格氏液为载液的腺苷利多卡停搏液(ALHA),能否进一步提高AL停搏液对缺血再灌注心肌和冠脉内皮的保护效果。方法:20只比格犬随机分为5组:①高钾停搏液(K)组;②0.9%氯化钠为载液的腺苷利多卡因停搏液(SAL)组;③醋酸林格氏液为载液的腺苷利多卡因停搏液(AAL)组;④高张氧0.9%氯化钠为载液的腺苷利多卡因停搏液(HSAL)组,⑤高张氧醋酸林格氏液为载液的腺苷利多卡因停搏液(HAAL)组,各组分别灌注不同停搏液,观察高钾停搏液与HAAL停搏液对冠脉内皮NO、ET、CEC冠脉血管舒张功能的影响;以及不同停搏液对血流动力学和心肌动力学(同上),心肌损伤指标(cTnI)和心肌细胞凋亡,心肌组织ATP含量,以及电镜结构的影响。结果:1)T3时K组血浆中NO含量较AAL组明显减少,ET水平明显升高,CEC数目明显增多(P<0.05)。K组冠脉血管舒张最大百分比低于AL组(9.13±8.24%VS 68.52±11.32%,P<0.01)。电镜结果提示,K组冠脉内皮细胞结构损伤较AAL组更严重。2)复跳后HAAL组心律失常发生率明显低于SAL组(50.0%vs.0%,P=0.021);HAAL组心肌ATP含量明显高于SAL组(29.48±4.08 vs.21.80±3.63,P=0.019);并且在T2时HAAL组冠状静脉窦乳酸含量明显低于SAL组(2.74±0.29 vs.3.35±0.31,P=0.006)。结论:与K组高钾停搏液比较,ALHA停搏液能更好地保护冠脉内皮细胞的结构与功能;改变AL停搏液的载液同时提高氧含量,能明显降低复跳后心率失常的发生率,增加缺血心肌细胞的ATP含量,但没有明显提高左室收缩舒张功能。
吴娜[9]2015年在《硝酸酯药物后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究》文中研究说明目的:目前众多研究显示缺血后处理具有减轻心肌缺血再灌注损伤(MIRI),保护心肌作用,但其操作的有创性限制了临床应用,因此药物后处理的研究引起更多关注。既往研究显示一氧化氮(NO)参与了MIRI的发生发展,增加内源性NO生成及给予外源性NO均能减轻MIRI。本研究通过在大鼠MIRI模型中给予外源性NO供体硝酸酯药物后处理和缺血后处理对比,观察其是否对MIRI具有保护作用;另外通过检测特异性内质网应激损伤相关蛋白Grp78和Caspase 12的表达及其基因水平的变化,以期探讨内质网应激途径是否参与缺血后处理和硝酸酯药物后处理对MIRI的影响。方法:32只Wistar大鼠随机分为Sham组(假手术组)、I/R组(缺血再灌注组)、IPostC组(缺血后处理组)及PPost C组(硝酸酯后处理组)4组,每组8只。分别测定各组的相关指标:采用Evan’s blue与TTC双染法检测及使用Image Pro Ilus 6.0图像分析软件分析得出缺血和梗死心肌面积、ELISA方法检测血c Tn I水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡;荧光定量RT-PCR检测心肌组织Grp78、Caspase12基因表达;Western-blot检测心肌组织Grp78、Caspase12蛋白表达。结果:1.与I/R组比较IPostC组、PPostC组心肌缺血和梗死面积均明显减少(P<0.01,P<0.01)、血c Tn I水平降低(P<0.01,P<0.01),心肌细胞凋亡指数明显改善(P<0.01,P<0.01)。与IPost C组比较,PPost C组心肌缺血面积明显减少(P<0.05),但两组间心肌梗死面积、血c Tn I水平和心肌细胞凋亡指数无明显改变(P值均>0.05)。2.(1)心肌组织Grp78 m RNA表达及蛋白表达结果:与假手术组相比,I/R组、IPost C组和PPost C组均明显升高,P值均<0.05;与I/R组相比,IPost C组和PPost C组均明显升高,P值均<0.05;而IPost C组与PPost C组相比P>0.05,差异无显着意义。(2)心肌组织Caspase12蛋白表达及m RNA表达结果:与假手术组相比,I/R组、IPost C组和PPost C组均明显升高,P值均<0.05;与I/R组相比,IPost C组和PPost C组的均明显降低,P值均<0.05;而IPost C组与PPost C组相比P>0.05,差异无显着意义。结论:1.硝酸酯药物后处理与缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤具有同样的保护作用,能够减少心肌梗死面积,降低血清c TNI水平,减轻细胞凋亡,并且较缺血后处理心肌缺血面积减少更显着。内质网应激途径导致的细胞凋亡参与了心肌缺血再灌注损伤的过程,缺血后处理和硝酸酯后处理均能通过调节内质网应激反应减少心肌细胞凋亡。
谷新顺[10]2005年在《冠脉内注射山莨菪碱对AMI-PCI后no-reflow现象逆转效应及no-reflow发生影响因素的研究》文中提出近年来,多项基础研究和临床实践证实,经皮冠状动脉介入治疗(PCI)急性心肌梗死(AMI),具有血管再通率高、恶性心脏事件(MACE)少、创伤小等优点。但是,经PCI 治疗的AMI 患者,在梗死相关动脉(IRA)开通成形治疗后,大约有10%-30%患者出现冠脉无复流(no-reflow)现象,致使心肌组织仍缺乏有效的血液灌注,MACE 发生率明显增加,而且严重影响患者的心功能及短期和长期预后,因此,如何实现在开通IRA的同时,使梗死相关区域心肌组织微循环得到有效的血液灌注,挽救存活心肌细胞,阻抑急性心室重构,保护心室功能,减少MACE 的发生,是目前国内外介入心脏病学领域共同关注的焦点。目前已有报道应用各种不同的方法(冠脉结扎、球囊闭塞、微球灌注等),复制不同种属(犬、羊、兔等)的no-reflow 动物模型,试图探讨AMI-PCI 后的no-reflow 现象的发生机制和防治措施,但迄今为止,no-reflow 的发生机制尚未完全明了,临床防治措施亦不尽人意。中国五指山小型猪具有与人类十分接近的心血管系统生物组织学特性,是最适合复制人类心血管疾病模型的动物之一。no-reflow 现象的发生是多种因素共同参与形成的结果,深入揭示这些参与因素及其可能作用机制,对于no-reflow 现象的有效防治具有重要的临床意义。山莨菪碱是我国特有的,且经多年临床实践证明有效的抗休克、改善微循环障碍的胆碱能M 受体阻滞剂,能扩张血管,解除冠脉痉挛,改善心肌微循环,并增加心肌细胞的缺氧耐受,特别是对灌注不良状态的动静脉微小血管产生重调作用,可能使坏死缺血心肌区域内舒缩功能紊乱的动静脉微小血管灌注/张力发生适应性血管重调,从而改善心肌血管前向和侧枝逆向心肌血供,提高有效的心肌灌注和代谢水平,但其对产生no-reflow 现象的缺血心肌组织灌注有否改善作用,值得深入探讨。本研究,应用中国五指山小型猪,通过冠状动脉前降支(LAD)球囊扩张闭塞-再灌注,细导管超选LAD 注入微血栓,成功复制AMI-PCI 后
参考文献：
[1]. 腺苷在心肌缺血再灌注中应用的动物实验和临床研究[D]. 韩玮. 中国人民解放军军医进修学院. 2003
[2]. 迷走神经刺激后处理对大鼠在体心肌缺血—再灌注损伤的保护作用及机制的实验研究[D]. 王强. 北京协和医学院. 2012
[3]. 腺苷对缺血再灌注心肌的保护作用[D]. 贺晓楠. 吉林大学. 2007
[4]. 联合应用肢体远隔缺血后处理和七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的实验研究[D]. 袁玉静. 北京协和医学院. 2012
[5]. 腺苷对心脏停搏后自主循环恢复影响的实验研究[D]. 陈威. 中国人民解放军军医进修学院. 2006
[6]. 远隔缺血适应减轻急性ST段抬高型心肌梗死患者再灌注损伤的临床研究[D]. 高静. 新疆医科大学. 2016
[7]. 25-羟基—原人参叁醇对大鼠实验性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制的研究[D]. 王智昊. 吉林大学. 2015
[8]. 围术期在体全心脏心肌保护关键技术的研发与实验研究[D]. 陈春玲. 新疆医科大学. 2015
[9]. 硝酸酯药物后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究[D]. 吴娜. 青岛大学. 2015
[10]. 冠脉内注射山莨菪碱对AMI-PCI后no-reflow现象逆转效应及no-reflow发生影响因素的研究[D]. 谷新顺. 河北医科大学. 2005
标签：心血管系统疾病论文; 心肌缺血论文; 缺血再灌注论文; 心肌损伤论文; 心肌论文; 动物实验论文; il-6论文;