广西百色市人民医院 533000
摘要：宫颈癌是严重影响女性健康的重要疾病，据统计，我国宫颈癌新发病人数及发病率均较高，每年宫颈癌旳新发病例约5万，占全球发病总数的1/4。发病率及死亡率之高，严重影响了女性的身心健康，故阻止宫颈癌发生发展则成为现代妇科学的重要内容。本问主要研究细胞DNA定量分析系统，进行宫颈癌筛查的研究，试图寻找一种集操作简便、经济实用、敏感性及特异性高，可对常规细胞学检测结果为ASCUS的患者进行分流，并对宫颈腺癌诊断敏感性高的宫颈癌诊断方法。
关键词：宫劲癌；常规细胞学；DNA细胞定量；病变；诊断
1、常规细胞学诊断及标准
所有巴氏染色片经有经验的细胞病理医师读片并进行报告，其采用2001年宫颈细胞学分类TBS诊断标准：即正常范围内（NILM）、对诊断无明确意义的非典型麟状上皮（ASCUS）、不典型鳞状上皮不排除高度病变（ASC-H）、低度上皮内病变（USL）及高度上皮内病变（HILS）、鳞状细胞癌、不典型腺细胞和腺癌。细胞学诊断为低级别（LSIL）以上的均建议做阴道镜或阴道镜指导下取活检。
2、细胞DNA定量分析诊断及标准
用IVlotiCytometer全动细胞DNA定量图像分析系统对Feulgen染色片进行扫描处理。该系统由全鬥动数码显微镜Motic600及摄像头205C对标本切片中8000个左右的细胞核进行扣描测定，以标本中正常细胞作为参照，并根据123个参数特征值对彼测细胞核进行自动分类和计数，其中DNA指数（DNAIndex，DI）为关键参数，可表示DNA含量。DI计算方法：被测细胞的积分光密度（IOD）与正常细胞积分光密度的比值。如为正常上皮细胞，DI值则为±0.25；对增生或疑似病变的细胞，1.25<D1<2.5；当DI≥2.5时，则为病变细胞。淋巴细胞和中性粒细胞以及不参与诊断的垃圾细胞（重叠细胞核、碎片等）予以排除。根据MotiCytometer系统诊断软件所做的细胞DNA定量分析分析结果和建议有如下3种情况：以DMA指数（DI）>2.5为异倍体细胞，①正常（normal），2倍体细胞（2c）为主而未见异倍体细胞及异倍体细胞峰者为阴性结果，建议定期复查；②复查：1-2个兄倍体细胞或DNA指数1-2之间的细胞数在被测细胞总数的5%-10%，建议4-6月复查：③阳性：出现大于等于3个异倍体细胞或DNA指数1-2之间的细胞数大于被测细胞总数的10%或见异倍体峰者，建议阴道镜下宫颈组织活检。凡是有DNA指数>2.5以上细胞的标本片，都要通过诊断医生在显微镜下逐一对DNA指数；>2.5细胞进行镜下核实，以排除系统将垃圾和重叠的细胞核误认为癌细胞或异常细胞。
3、统计学方法HE染色：
采用SPSS17.0软件对实验结果进行统计分析。1）对TBS报告系统及DNA定量分析系统进行独计算计算敏感度、特异度、约登指数。对两种筛査方案的灵敏度、特异度采用卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义；2）对常规细胞学检査结果为ASCUS的病例计算出DNA定量分析系统的敏感度、特异度、约登指数、阳性预测值和阴性预测值。
4、两种不同细胞学方法的筛查结果分析
4.1、两种不同细胞学方法的筛查结果：
在合格的宫颈脱落细胞样本中，排除需要4-6月复查的患者（W为4-6月后复查者目前病检结果不能确定，故予以排除），共未被排除患者纳入研究，常规细胞学检查结果示：88.04%正常，11.96%异常；异常包括5.140%为ASCUS，5.374%为LSIL，1.272%为HSIL及以上病变（如下图1）。而在同样的样本中，细胞DNA定量分析检测发现7.66%为阴性，未见非整倍体细胞，也无异倍体细胞峰及异常增生，12.34%为阳性（有DNA指数>2.5细胞、异倍体细胞峰或异常增生）。
用274例宫颈活检病理诊断结果为金标准，以检测出CINII作为诊断阳性阈值，计算出细胞DNA定量分析方法检测出CINII以上宫颈病变的敏感性为92.16%，特异性为93.13%，约登指数为0.8529，而常规细胞学方法敏感性为68.63%，特异性为96.47%，约登指数为0.6510（图2）。
细胞DNA定量分析与常规细胞学检查相比较，灵敏度有差异。细胞DMA定量分析灵敏度要高于常规细胞学（x 2=54.96，P<0.01），而特异性无明显统计学差异（x2=10.51，P>0.05）。
4.2 DNA定量分析结果与组织活检病理诊断结果的比较：
392例ASCUS中包含了各级别的宫颈病变。阴道镜下组织活检病理诊断为CINI及正常/炎症性改变的共351例（89.54%，351/392），CINII及以上病变为41例（10.45%，41/392），DNA定量分析结果与实验活检组织病理结果的比较见统计图3。若以筛查CINII及以上病变为目标，DNA倍体分析方法的灵敏度（Se）为 90.24%（37/41），特异度（Sp）为 60.96 %（214/351），阳性预测值为20.78 %（37/178），阴性预测值为98.57 %（277/281），若以CINII及以上病变为阳性结果时其灵敏度为100.00 %（9/9）。
5、结语
细胞DNA定量分析技术是通过对细胞核内遗传物质（DNA）含量的测定，判断细胞的生理状态和病理改变。釆用细胞DNA定量分析技术可通过测量细胞核内DNA含量的变化，在其形态改变不明显前即检测出病变细胞，实现癌及癌前病变的早期诊断同时异倍体细胞出现往往象征着染色体结构和数量出现异常，也是细胞恶变的早期特征。故细胞DNA定量分析技术可以有效早期蹄查出有病变倾向的细胞，同样应用于宫颈癌蹄查，在国内已经有大量关于此项技术的研究。
参考文献：
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论文作者:黄贞
论文发表刊物:《健康世界》2014年21期供稿
论文发表时间:2016/3/31
标签：细胞论文; 定量分析论文; 细胞学论文; 体细胞论文; 宫颈癌论文; 宫颈论文; 细胞核论文; 《健康世界》2014年21期供稿论文;