李方
（广东省乳源瑶族自治县中医医院检验科 512700）
【摘要】目的：探讨反复自然流产患者封闭抗体的检测及其意义。方法：回顾性分析2012年6月-2013年8月入住我院妇科的136例反复自然流产患者的临床资料，采用酶联免疫吸附实验ELISA法检测治疗前封闭抗体BA水平，对BA阴性患者行淋巴细胞免疫治疗，于治疗后再行ELISA检测，比较治疗前后的BA阴性率及治疗后的妊娠成功率。结果：治疗前BA阴性率为86.03%，治疗后为29.41%，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后的妊娠成功率为61.54%，较治疗前显著增高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：反复自然流产患者BA阴性率较高，经淋巴细胞免疫治疗后阴性率显著降低，对提高妊娠率、降低自然流产率有积极的意义。
【关键词】反复自然流产 封闭抗体 检测 临床意义
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）36-0055-02
Recurrent spontaneous abortion patients closed antibody detection and its significance
【Abstract】 Objective: To study the detection of antibodies in patients with recurrent spontaneous abortion and its significance in the closed. Methods: A retrospective analysis of the clinical data of 136 cases of recurrent spontaneous abortion in 2012 June -2013 year in August in my hospital department of Gynecology, using enzyme linked immunosorbent assay method was used to detect ELISA blocking antibody BA level before treatment, the BA negative patients with lymphocyte immune therapy, in the treatment of the line after the ELISA detection, the BA negative rate and treatment before and after the treatment after the success rate of pregnancy. Results: Before treatment, BA negative rate was 86.03%, after treatment was 29.41%, the difference was statistically significant (P<0.05); the success rate of pregnancy after treatment was 61.54%, significantly higher than that before treatment, the difference was statistically significant (P<0.05). Conclusion: Recurrent spontaneous abortion patients with BA negative rate is higher, the lymphocytes after treatment negative rate is significantly reduced, to improve the pregnancy rate, reducing the rate of spontaneous abortion is of positive significance.
【Key words】recurrent spontaneous abortion antibody detection clinical significance
反复自然流产（RSA）是妊娠期妇女的常见疾病，其发病率占育龄期妇女的10%-15%[1]。其发病机制尚不明确，部分与免疫、遗传、内分泌有关，现代研究认为封闭抗体BA的缺乏是引起本病的主要因素。本研究探讨反复自然流产患者封闭抗体的检测及其意义，分析经淋巴细胞免疫治疗前后的BA水平，为临床治疗提供依据，现具体汇报如下。
1.资料与方法
1.1一般资料 回顾性分析2012年6月-2013年8月入住我院妇科的136例反复自然流产患者的临床资料，年龄23-42岁，平均年龄（28.5+2.5）岁，所有患者均连续3次以上孕早期自然流产，经检查均无生殖器官器质性病变及畸形，内分泌无异常，TORCH感染阴性，自身免疫不孕抗体七项检查阴性，且男方精液检查正常，双方染色体检查正常；均诊断为原因不明性流产。
1.2方法
1.2.1封闭抗体BA检测：采用酶联免疫吸附实验（ELISA）进行检查（由北京索奥生物技术有限公司提供），空腹抽取外周静脉血3ml，离心后分离血清，然后按试剂操作说明行血清封闭抗体检测，结果分为阴性和阳性。
1.2.2淋巴细胞免疫治疗：对BA检测阴性的患者，采用配偶或其他健康男性（检查乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病等均为阴性）的外周静脉血20ml作为淋巴细胞免疫原供体，加入肝素抗凝，取淋巴细胞分离液20ml一起置于离心管，分离出淋巴细胞，用生理盐水洗涤3次，配成至细胞数（20-40）x106/ml的淋巴细胞混悬液2ml，分装于2支注射器内，于患者前臂内侧近腋窝处分6-8点行皮内注射，每点注射淋巴细胞液0.15ml-0.2ml，左右臂交替[2]。3周治疗1次，连续治疗4次为一个疗程，1个疗程后复查BA。若转为阳性则指导受孕，3个月后仍不怀孕则加强淋巴细胞免疫治疗1次；若仍为阴性则继续淋巴细胞免疫治疗2个疗程再指导受孕。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆待正常怀孕40d后，确定胚胎在宫内并有胎心搏动，于孕3个月左右再行免疫治疗1次，并常规黄体酮保胎治疗[3]。
1.3观察指标：治疗前后BA阴性率，根据治疗后是否受孕来计算妊娠成功率。
1.4统计学分析 所有临床资料输入计算机，采用SPSS17.0统计分析软件包。计量资料属正态分布的采用（x-+s）表示，采用独立样本t检验，计数资料采取Χ2检验，P＜0.05为有统计学意义。
2.结果
2.1所有患者治疗前后BA阴性率比较，见表1。治疗前BA阴性率为86.03%，治疗后为29.41%，差异有统计学意义（P<0.05）。
表1 所有患者治疗前后BA阴性率比较（n%）
时间 例数 阳性 阴性
治疗前 136 19（13.97） 117（86.03）*
治疗后 136 96（70.59） 40（29.41）
注：*与治疗后相比，P<0.05。
2.2BA阴性患者治疗结果，见表2。117例阴性患者，累计转阳77例，转阳率为65.81%。
表2 BA阴性患者治疗结果比较（n%）
时间 例数 转阳率 累计转阳率
1个疗程 117 12（10.26） 12（10.26）
2个疗程 105 37（35.24） 49（41.88）
3个疗程 68 28（43.08） 77（65.81）
2.3BA阴性患者治疗后妊娠结果。117例阴性患者，经过3次治疗后77例阳性，40例阴性，原则上无论是否转阳均鼓励在3个月内妊娠。其中77例阳性患者中，59例成功受孕，6例再次发生流产，53例成功分娩，成功率为68.83%；40例阴性患者中，31例受孕，12例再次流出，19例成功分娩，成功率为47.5%；总共90例受孕，18例流产，72例分娩，成功率为61.54%。治疗后阳性的分娩成功率明显高于阴性，差异有统计学意义（P<0.05）。
3.讨论
随着医学的发展，对生殖免疫方面的研究越来越深入，妊娠早期反复流产中约50%-60%与免疫因素有关[4]。现代研究表明，当母体免疫功能正常时，能保护母体不受外来微生物侵袭，且对宫内胚胎移植物不发生排斥，使母体正常妊娠；当免疫功能异常时，可分为自身免疫和同种免疫两类，前者包括抗磷脂抗体、抗核抗体、抗甲状腺抗体等，后者主要与体液免疫异常有关，血清中缺乏封闭抗体。
在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgG抗体，它可抑制淋巴细胞反应（MLR），封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（MIF），故称其为封闭抗体BA[5]。换言之，BA可阻止母体免疫系统对胎儿或胚胎产生排斥和损害，避免出现流产。故BA的缺乏或生成不足，使母体产生自身免疫而损害胚胎，最终导致流产。
BA有以下特点：（1）自妊娠开始至3个月内，BA水平最高，然后逐渐下降，至分娩时又增高，分娩后数周内消失；（2）胎盘组织中的活性IgG与外周血中的IgG是相同的；（3）BA的活性能够被男方的B淋巴细胞灭活[6]。
本研究中，所有患者治疗前BA阳性率为13.97%，阴性率为86.03%，表明BA的不足或缺失对反复流产有密切的关系，可刺激免疫系统对胚胎进行攻击，从而造成流产。对BA阴性患者行淋巴细胞免疫治疗，其方法是利用男方的淋巴细胞注射入女方体内，刺激母体产生同种免疫反应，诱导封闭抗体的产生。通常1个疗程后复查BA，对仍然阴性患者继续治疗2个疗程，治疗后77例转阳，表明淋巴细胞免疫治疗能有效刺激母体生成BA，而40例仍为阴性，其原因可能是：（1）供体的淋巴细胞与受体的淋巴细胞相容度过高，无法刺激其产生BA；（2）供体的淋巴细胞活性太低，或在注射前已失去大部分活性；（3）受体本身的免疫耐受能力低下，无法刺激产生BA。而经过3个疗程治疗后，阴性患者转阳率分别为10.26%，35.24%和43.08%，总阳性率为70.59%，与治疗前13.97%相比，差异有统计学意义（P<0.05），表明BA产生呈现逐渐上升的趋势，从而产生免疫保护作用。在分娩成功率方面，77例阳性患者中，59例成功受孕，6例再次发生流产，53例成功分娩，成功率为68.83%；40例阴性患者中，31例受孕，12例再次流出，19例成功分娩，成功率为47.5%；治疗后阳性的分娩成功率明显高于阴性，差异有统计学意义（P<0.05）。结果表明免疫治疗后效果显著，无论BA阳性还是阴性，其分娩成功率均较治疗前增高，自然流产率较治疗前均明显降低，但阳性的成功率仍高于阴性，提示阳性与成功妊娠关系更为密切。
综上所述，封闭抗体阳性对于自然流产患者的妊娠分娩成功有积极影响，对于原因不明的自然流产患者应用BA检测，对阴性患者实施淋巴细胞免疫治疗，效果显著，能够改善免疫功能，降低流产率，促进分娩成功。
参考文献
[1]刘晓芹，田连霞.封闭抗体与早期反复流产的关系及淋巴细胞主动免疫治疗的疗效观察[J].中国优生优育，2012，18（5）：276-278
[2]赵学峰，金书林，蔡甜等.自然流产患者封闭抗体检测及免疫治疗临床研究[J].国际检验医学杂志，2013，34（2）：156-157
[3]张运丽，郭婧婧，金燕等.反复自然流产患者封闭抗体检测的临床意义[J].实用预防医学，2009，16（6）：1917-1918
[4]吴勤如，陈桂兰，何惠玲等. 106例反复自然流产患者封闭抗体的检测及临床应用[J].中国优生与遗传杂志，2008，16（12）：74-75
[5]郭虹，杨华，王维鹏.反复自然流产中封闭抗体、抗心磷脂抗体检测的临床意义[J].国际检验医学杂志，2013，34（7）：773,775
[6]曾琼连，姚美玉，吴效科等.复发性自然流产患者封闭抗体的检测及临床应用[J]. 中国优生与遗传杂志，2011，19（4）：115-116,118
论文作者:李方
论文发表刊物:《医药前沿》2013年第36期供稿
论文发表时间:2014-3-12
标签：阴性论文; 淋巴细胞论文; 抗体论文; 患者论文; 免疫论文; 阳性论文; 自然论文; 《医药前沿》2013年第36期供稿论文;