摘要：通过不同体积吸收液对大豆中粗蛋白进行测定，分别用25毫升硼酸吸收液和5毫升硼酸吸收液进行吸收，并对结果进行分析，结果表明：硼酸吸收液采用5毫升的体积来测定大豆粗蛋白，不但不影响检测结果，还可以降低实验成本，减少环境污染。
关键词：吸收液 粗蛋白 凯氏定氮法 不同体积 改进
Abstract: the crude protein in soybean was determined by different volumes of absorbent, 25 mL of boric acid absorbent and 5 ml of boric acid absorbent were used to absorb the crude protein, and the results were analyzed. The results showed that the boric acid absorbent used 5 ml of volume to determine the crude protein in soybean. Not only does it not affect the test results, it can also reduce the experimental cost and reduce environmental pollution.
Key words: different volume improvement of absorption fluid crude protein kaiji nitrogen method
按照国标方法GB/T14489.2-2008《粮油检验 植物油料粗蛋白质的测定》，硼酸吸收液的体积是25mL，蒸馏液体积达到100mL为宜，不单到滴定时摇晃不方便，而且试剂量较大，成本高。而本方法采用吸收液为5mL，不仅滴定时摇晃方便，还能不影响测定结果，节约实验成本。
1 实验检测
1.1 仪器
KDN-08B型定氮仪（上海昕瑞仪器仪表有限公司），KDN-08型八孔消化炉（上海昕瑞仪器仪表有限公司），高速万能粉碎机，电子天平
1.2 试剂
所用试剂其纯度无特殊说明均为分析纯，所用的水是蒸馏水。
硫酸：18moL/L（优级纯）
催化剂：0.4g硫酸铜(CuSO4•5H2O)，6g硫酸钾（K2SO4）,磨碎混匀。
硼酸溶液：c(H3BO3)=20g/L,20g硼酸加水溶解并定容至1000mL。
氢氧化钠溶液：c(NaOH)=400g/L,400g氢氧化钠加水溶解并定容至1000mL。
盐酸标准溶液：c(HCI)=0.1moL/L,盐酸标准溶液配置和标定按GB/T601执行。
甲基红-溴甲酚绿指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂溶解后，加95%乙醇至100mL。
1.3检测原理
试样在催化剂的作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵，加入强碱进行蒸馏，使氨逸出，用硼酸吸收后再用盐酸滴定，测出氮含量。将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
消化反应式为：
2NH2(CH2)COOH+13H2SO4=(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O (1)
蒸馏反应式为：
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4 (2)
吸收反应式：
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O (3)
滴定反应式：
(NH4)2B4O7+5H2O+2HCI=2NH4CI+4H3BO3 (4)
计算公式：
式中：X-样品粗蛋白质含量（%）
V1－滴定试样时消耗盐酸标准溶液体积（mL）
V2－滴定空白时消耗盐酸标准溶液体积（mL）
C－盐酸标准滴定溶液浓度（moL/mL）
m－样品的质量（g）
0.0140－每毫克当量氮的克数
6.25－氮换算成蛋白质的平均系数
1.4 检测步骤
1.4.1 试样的消煮
准确称取粉碎均匀的试样0.5g（准确至0.0002g），放入消煮管中，加入6.4g混合催化剂，12mL硫酸，淤420℃下的消煮炉上消化至消化液呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少0.5h-1h，取出冷却后加入30mL蒸馏水。
1.4.2 蒸馏
采用半自动定氮仪，将待消化液的管子插在蒸馏装置上，用硼酸吸收液加入3滴混合指示剂。冷凝管末端要浸入吸收液，然后向消煮管中加入50mL氢氧化钠溶液进行蒸馏，蒸馏时间分别以吸收液达到一定体积为宜。
1.4.3 滴定
用盐酸标准溶液滴定馏出液，由蓝绿色至刚变为红紫色。
2实验结果分析
硼酸采用不同体积对同一样品（大豆）中的粗蛋白测定，25mL吸收液蒸馏时间以体积达到100mL为宜，5mL吸收液蒸馏时间以体积达到50mL为宜，通过检测结果对比分析，结果如下各表：
从以上数据可以看出，两组数据均符合测氮的要求，但第二组所用吸收液体积小，节约了实验成本，也降低了环境污染，因此吸收液体积采用5mL更适合粗蛋白的测定。
3结论
不同体积的检测数据对比分析可以看出：硼酸吸收液的体积对测定结果的影响不大，完全可以采用5mL硼酸吸收液来测定粗蛋白含量，不仅测定结果符合要求，还能降低试验成本，减少污染。
参考文献
[1] GB/T14489.2-2008，粮油检验 植物油料粗蛋白质的测定
[2] 彭展英，吸收液在凯氏定氮法中的应用研究 化工时刊第27卷第10期
[3] GB/T6432-1994，饲料中粗蛋白测定方法
[4] 鲍士旦，《土壤农化分析（2000）》
[5] GB/T5511-1985，粮食油料粗蛋白测定方法
论文作者:黄福玲
论文发表刊物:《基层建设》2018年第33期
论文发表时间:2019/1/7
标签：硼酸论文; 体积论文; 溶液论文; 蛋白论文; 盐酸论文; 反应式论文; 滴定论文; 《基层建设》2018年第33期论文;