独山县人民医院检验科 贵州省独山县 558200
摘要：轮状病毒是引起婴幼儿及各种幼龄动物非细菌型腹泻的主要病原体 ,研究轮状病毒生物学、流行病学、实验室检测技术等对对于防止轮状病毒暴发流行，早期诊断，早期治疗等具有重要意义。
关键词：轮状病毒，婴幼儿，腹泻
轮状病毒是一种双链核糖核酸病毒，属于呼肠孤病毒。由澳大利亚科学家 Bishop 于 1973 年首次在严重腹泻的婴儿胃肠道内发现。该病毒由于外观酷似车轮而得名，它是婴儿与幼儿腹泻的单一主因，几乎世界上每个大约五岁的小孩都曾感染过轮状病毒至少一次。然而，每一次感染后人体免疫力会逐渐增强，后续感染的影响就会减轻，因而成人就很少受到其影响。轮状病毒可分为 A-G 等 7 个群，它们通过感染小肠上皮细胞，从而造成细胞损伤，引起腹泻。A、B、C 群轮状病毒是人兽共患，A 群轮状病毒是引起婴幼儿重症腹泻的主要原因 , B组与成人腹泻有关[1]，A组是科学工作者研究的重点。全世界每年因轮状病毒感染导致的 5 岁以下低龄儿童腹泻病例约有 1.11 亿，每年导致 50 万到 60 万婴幼儿死亡[2]，全世界每年因轮状病毒感染导致的 5 岁以下低龄儿童腹泻病例约有 1.11 亿，约 2500 万例患儿需要寻医就诊，200 万人需要住院治疗，其中死亡人数高达 352,000-592,000 人，据调查，在撒哈拉以南的非洲和亚洲地区，超过三分之一的婴幼儿腹泻及胃肠炎疾病是由轮状病毒引起的，每年导致 50 万到 60 万婴幼儿死亡 [2]。在我国，0 ～ 2 岁以内的婴幼儿人数约为 4000 万人（含新生儿），每年大约有 1000 万婴幼儿患轮状病毒感染性胃肠炎，占婴幼儿人数的 1/4。因此，能够快速有效地诊断轮状病毒性腹泻是医学界的重要课题。
1、轮状病毒广泛存在于自然界，耐热，耐酸碱，结构稳定，传染性很强，潜伏期 3 天左右，轮状病毒是借由粪口途径传染的，病人和隐性带毒者均可为传染源。秋季是轮状病毒性腹泻的高发期。婴幼儿轮状病毒性腹泻病程一般可持续 3 至 9 天，感染发病初期表现为流涕、咳嗽、发热、咽部疼痛等感冒症状，每日腹泻次数在数次至数十次不等，且伴有呕吐、腹痛，因此容易被误诊为胃肠型感冒。轮状病毒随带毒者粪便排出体外，通过粪一口途径感染病人后，在患儿的十二指肠粘膜细胞中增殖，引起十二指肠粘膜表面绒毛变短钝指肠表皮细胞内二糖酶减少，从而影响患儿肠道对盐类、糖类和水分的正常吸收，造成腹泻[2] ，还能够通过胃肠屏障进入血液，引起轮状病毒血症，造成呼吸系统、中枢神经系统、其他消化器官以及循环系统的损害，导致患儿引起肺炎、中毒性心肌炎等严重并发症，更甚者还可合并脑炎、肺炎、肠出血、肠套叠或病毒性心肌炎而危及生命。轮状病毒肠道外多器官的感染并发症已成为导致患儿死亡的重要原因之一[3]。在我国，每年的 10 月至次年的 2 月均有一个婴幼儿腹泻的发病高峰，病原学研究证实，这些病例的 40%-60% 都是由轮状病毒引起的。婴幼儿轮状病毒性腹泻病程一般可持续 3 至 9 天，感染发病初期表现为流涕、咳嗽、发热、咽部疼痛等感冒症状，每日腹泻次数在数次至数十次不等，且伴有呕吐、腹痛，因此容易被误诊为胃肠型感冒。因此对轮状病毒感染的正确检出在疾病治疗中显得非常重要。尽管有一些药物可缓解轮状病毒感染引起的临床症状，但目前还没有治疗轮状病毒感染的特效药物。由于目前的防治措施还不十分有效，因此发展快速、准确、早期的检测方法，对于防止轮状病毒暴发流行，早期诊断，早期治疗等具有重要意义。
2、轮状病毒主要的测定方法轮状病毒的预防监测需要快速准确的诊断技术支持。用于轮状病毒的检测技术包括直接血凝技术、电镜技术、基因检测技术、酶联免疫技术和胶体金技术等。
2.1 直接血凝技术，用轮状病毒抗体致敏血球的检测方法，主要从唾液、粪便等分泌物中检测轮状病毒。该方法的结果不易重复，需要有经验的技术人员。
2. 2 电镜技术，在大便中用电镜直接检出特殊形态的轮状病毒颗粒，敏感性较高，是鉴定轮状病毒的经典方法。但由于病毒颗粒易于降解常常影响正确诊断，并且电镜设备昂贵，难以普及[4]。
2.3 基因检测技术，PCR 技术是核酸分子定性和定量检测的最常用方法，其特异性强、灵敏度高、定量准确，在病原学诊断方面具有很高的应用价值。
2.4 酶联免疫吸附试验技术酶联免疫吸附检测（ELISA）是目前应用最广泛的免疫检测方法。操作简便，灵敏度和特异度高。1985 年被 WHO 推荐作为轮状病毒的标准检测手段。一般使用的是 ELISA 双抗体夹心法，该方法可根据不同检测目的设计特异的包被抗体和标记抗体；不仅用于诊断，还可进行血清分型、毒株鉴别等，适用于大规模临床检测和流行病学调查。
2.5 胶体金技术，该技术是纳米胶体金与免疫学技术结合所产生的快速诊断产品，该方法以胶体金作为示踪标志物，通过渗滤或层析提高抗原抗体反应的效率，形成的红色胶体金条带肉眼即可辨别，该技术具有以下优势：使用方便快速，操作简单，不需经过特殊培训，不需要特殊的仪器设备；便于基层使用和现场使用，所有反应能在 15 分钟内完成；成本低，不同环境下的稳定性好，不需冷藏；检测标本种类多：可用于查血、尿液或粪便等。是《全国临床检验操作规程》推荐的首选检测方法。
3、轮状病毒检测各项技术的优缺点见表 1，可根据用途选择适当方法。
表 1：轮状病毒检测的几种方法比较
4 讨论：
轮状病毒是造成婴幼儿传染性肠道炎的主要原因，轮状病毒是引起肠道炎导致婴幼儿、老年人及免疫抑制病人的死亡，轮状病毒主要发生在冬季，在我国，每年的 10 月至次年的 2 月均有一个婴幼儿腹泻的发病高峰[1]。由四川迈克生物科技股份有限公司生产的 A 群轮状病毒抗原( 胶体金法 )检测试剂盒，采用侧向免疫层析双抗体夹心法，准确率高，多年在我院进行临床应用，结果灵敏度为 96.95％，特异性为 99.5％；研究轮状病毒生物学，加强对腹泻患者轮状病毒检测，对早发现，早诊断，早期治疗具有重要流行病学意义。
参考文献：
[1]尚红等 . 全国临床检验操作规程（第 4 版）. 人民卫生出版社 . 2015: 475-476.
[2]Umesh D. Parashar, Erik G. Hummelman, Joseph S. Bresee,et al. Global Illness and Deaths Caused by Rotavirus Disease in Children.J. Emerging Infectious Diseases,2003,9(5):565-572.
[3]Parashar UD, Burton A, Lanata C,et al.Global mortality associated with rotavirus disease among children in 2004.J J Infect Dis 2009 Nov 1;200 Suppl 1:S9-S15.
[4]Ginzing11 Lundgren O , Peregrin AT , Persson K,et al.Role of the enteric nervous system in the fluid and electrolyte secretion of rotavirus diarrhea.. Science. 2000 Jan 21;287(5452):491-5. 63
论文作者:陆绍科
论文发表刊物:《健康世界》2018年15期
论文发表时间:2018/8/28
标签：病毒论文; 婴幼儿论文; 技术论文; 胶体论文; 抗体论文; 免疫论文; 层析论文; 《健康世界》2018年15期论文;