长沙医学院 湖南长沙
摘要：目的 探讨槟榔提取物是否对小白鼠口腔黏膜有细胞癌变的诱发作用。方法 通过涂抹和放置可替换的胶囊等方法使小鼠颊囊暴露于槟榔提取物（ANE），于6-12，13-24个月分别处死小鼠，观察ANE对于小鼠的不典型损害、癌前损害、和癌瘤等的口腔黏膜损害。结果 小鼠可见有大块不典型损害、癌前损害、和癌瘤等的口腔黏膜损害情况，具体比较3个组别小鼠身体特征发现，三个组别之间小鼠的头部重量差异显著（F=35.65，P=0.00），3个组别对象口腔黏膜损害发生率差异显著（X2=22.34，P=0.00）。结论 槟榔提取物长期饲养小鼠对其口腔粘膜细胞癌变的明显的诱发作用，槟榔提取物对口腔黏膜损害作用明显，应注重槟榔长期咀嚼人群的口腔健康。
关键词：槟郎；小白鼠；口腔黏膜；癌变
咀嚼槟榔是主要流行于南亚地区、南太平洋地区和南非地区以及中国的台湾地区和海南省、湖南省的一种传统习俗。咀嚼槟榔可引起口腔粘膜下纤维化（oral submucous fibrosis，OSF），OSF是一种癌前病变，经过长期的慢性病理过程可恶变为口腔癌[1]。早在2004年，槟榔就被国际癌症研究中心认定为1级致癌物质，印度是消耗槟榔最多的国家，也成为全球口腔癌发病率最高的国家。在巴布亚新几内亚，接近60%的居民咀嚼槟榔，发病率居世界第二。我们通过涂抹和放置可替换的胶囊等方法使小鼠颊囊暴露[2]于槟榔提取物（areca nut extract，ANE）来构建诱导口腔癌的动物模型，为研究其致癌性提供科学依据。
1对象与方法
1.1研究对象：槟榔提取物长期饲养的小鼠
1.2实验方法：
1.2.1实验用雄性小鼠36只，经1周检疫后，随机分成3组：正常对照组、12月组、24月组，分别记作A组、B组、C组。
（1）空白对战组（A组）12只，无离子水涂抹，4周。同时给予标准饲料饲养，自由饮水。
（2）12月组（B组）本实验选择运用ANE的水溶出物作为ANE的代表。根据其小鼠经口LD50（585mg/kg）[3]，将1/20 LD50（29.25mg/kg）、1/10 LD50（58.5 mg/kg）、1/5 LD50（117 mg/kg）设置为低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组4只。ANE溶于水，按0.01 mL/g BW，小鼠于28日龄开始涂抹颊囊，同时给予添加ANE胶囊饲料饲养，自由饮水。
（3）24月组（C组）设置低中高三个剂量组，每组四只。按照B组的剂量进行涂抹，同时给予添加ANE胶囊饲料饲养，自由饮水。
1.2.2每日观察小鼠活动情况包括小鼠精神、饮食、外形等情况。每周称重，记录。
1.2.3于最后一次染毒12h后禁食，24h后对实验小鼠进行颈椎脱臼法处死，记录小鼠头的重量，讯速解剖。
1.3 通过对比观察实验组与对照组小鼠的颊囊是否有不典型损害、癌前损害、和癌瘤等的口腔黏膜损害，小鼠头部的重量等，记录相关的数据指标。
1.4 统计学分析：用专业统计软件进行数据库的建立，SPSS13.0进行数据分析，多组计量资料之间的比较使用方差分析，计数资料（率）的比较使用卡方检验。检验水准取值0.05，概率为双侧概率。
2 结果
2.1 实验组与对照组小鼠头重量比较
比较三组小鼠的头部重量发现，空白对照组小鼠的头部重量平均（20.11±6.32）克，12月组小鼠头部重要平均（32.56±5.89）克，24月组平均（37.78±7.21）克，三个组别之间小鼠的头部重量差异显著（F=35.65，P=0.00）。具体见表1。
3 讨论
谭劲[4]等人用槟榔提取物体外诱导人口腔黏膜成纤维细胞增殖，发现50-100ug/ml的ANE促进口腔黏膜成纤维细胞的增殖；但当浓度为200ug/ml时抑制其增殖。
本实验通过观察小鼠颊囊的不典型损害、癌前损害、和癌瘤等的口腔黏膜损害，发现中低实验组较空白对照组的颊囊癌变的发生率要高出若干的倍数差，且差异显著；高剂量组的癌变的发生率略低于中低剂量组，高于空白对照组。对于记录小鼠头的重量等器官的比较，没有显著差异，无统计意义。实验结果均提示了，槟榔中可能存在刺激口腔粘膜，造成口腔内粘膜损害的化学物质，或许能诱导癌症的发生。由此，应特别注意在咀嚼槟榔过程中，该物质的化学损害作用。应该更为注意咀嚼槟榔人群的口腔卫生和身体状态，保持健康的生活习惯，以提高口腔健康现状。
参考文献：
[1]翦新春，彭解英，唐瞻贵，等.口腔粘膜下纤维性变癌变（附三例报告）[J].华西口腔医学杂志.2000.
[2]Ranadive KJ，Ranadive SN，Shivapurkar NM，et al.Betel quid chewing and oral cancer：experimental studies on hamsters[J].Int J Cancer，1979，24：835-843.
[3]郑锦星，槟榔提取物功能评价的研究[D]，湖南，中南林业科技大学，2006：
[4]谭劲，李元聪，陈明，陈安，彭楚湘等.槟榔提取物体外诱导人口腔粘膜陈纤维细胞增殖模型的建立[J].湖南中医药大学学报，2007，3（12）：13-15.
[5]欧阳婉璐，屈韵竹，杨溢，等.中国口腔癌症患者生命质量测定量表模块研制及条目筛选[J].口腔医学研究，2013，09（28）：100-104.
[6]张凯，黄全顺，徐涛，等.口腔颌面部癌症患者健康教育效果的调查分析[J].中华全科医学，2009，07，08：23-26.
作者简介：许聪，长沙医学院口腔医学院口腔医学专业2011级在校学生
论文作者:许聪
论文发表刊物:《健康世界》2016年第3期
论文发表时间:2016/6/2
标签：小鼠论文; 口腔论文; 黏膜论文; 颊囊论文; 提取物论文; 粘膜论文; 重量论文; 《健康世界》2016年第3期论文;