新化县人民医院 湖南娄底 417600
【摘 要】目的：探讨基质金属蛋白酶9以及E钙粘蛋白在侵入性胎盘组织中的表达水平，同时分析其临床意义。方法：随机选取本院2016年1月至2017年1月间收治的单胎晚期妊娠进行分娩对侵入性胎盘产妇50例以及同期收治的50例正常妊娠产妇作为本次研究对象，分别建立观察组与正常对照组，并通过免疫组化法对其侵入性胎盘组织当中的MMP-9和E-Cad蛋白水平的表达情况进行检测分析。结果：MMP-9蛋白观察组的阳性表达率为96%（48/50），在正常对照组的阳性表达率为48%（24/50）；E-Cad蛋白在观察组的阳性表达率为84%（42/50），在正常对照组的阳性表达率为100%（50/50）；两组对比存在有显著性的差异（P<0.05）。结论：胎盘组织当中的MMP-9表达水平提高以及E-Cad表达水平的下降均与临床上侵入性的胎盘并发症的发生存在较大关联性，因此对MMP-9与E-Cad的临床检测能为侵入性胎盘的病理诊断提供一定的参考价值。
【关键词】基质金属蛋白酶9；E钙粘蛋白；侵入性胎盘组织；表达水平；临床意义
侵入性胎盘是指胎盘种植部位子宫内膜发生缺损或发育不良导致胎盘血供不足而引起的对子宫肌层的入侵或是穿透等病理现象[1-2]。而该病理现象又可依据绒毛侵入子宫的肌层深度区可分粘植入性胎盘、连性胎盘以及穿透性胎盘三种类型，在临床当中以粘连性胎盘最为常见[3]。而侵入性胎盘病理现象的发生也与妇女进行多次人流、产妇多产、前置胎盘以及宫内感染等症状存在相关性，该现象严重的威胁到母婴生命安全。该现象的发病也较为隐蔽，在临床上在产前通常较难进行预测，在病理诊断上仍缺乏较为明确的参考指标，在该现象的分子水平上对成因的解释研究相对较少。近年来，开始有研究者关注基质金属蛋白酶9（MMP-9）以及E钙粘蛋白（E-cad）两种在母胎微环境的作用。本研究主要以通过免疫组化法对晚期妊娠的侵入性胎盘组织当中的MMP-9和E-Cad蛋白水平的表达进行检测，并探讨其临床意义。
1资料与方法
1.1一般资料
随机选取本院2016年1月至2017年1月间收治的单胎晚期妊娠进行分娩的侵入性胎盘产妇50例以及同期收治的50例正常妊娠产妇作为本次研究对象，分别建立观察组与正常对照组。观察组纳入产妇均符合侵入性胎盘的临床诊断标准，同时排除合并有妊娠期糖尿病、高血压与胎膜早破等其他妊娠期疾病的产妇。对产妇胎盘标本的收集均经产妇本人的同意后进行。观察组产妇的年龄在23~39岁，平均年龄32.1±4.5岁，产妇妊娠周期在37w~40w，平均周数37.6±1.5w；正常对照组产妇的年龄在23~39岁，平均年龄32.5±4.7岁，产妇妊娠周期在37w~40w，平均周数37.5±1.7w。两组产妇的一般资料如年龄、妊娠周数等的对边上均未见有明显的差异，研究具有可比性（P>0.05）。纳入产妇均签署知情同意书且研究经院伦理委员协会的批准展开。
1.2方法
在产妇的胎盘被娩出后，迅速取出胎盘的母面粘连或者植入部位胎盘组织，对于正常胎盘则选取其中间带的部位并避开坏死、出血或发生钙化处。每块取样的大小均控制为1cm3，将取得的标本经常规处理后制成蜡块，并通过免疫组化法进行MMP-9和E-Cad蛋白水平的表达情况的检测。其中，一抗兔抗人的MMP-9以及鼠抗人E-Cad的单克隆抗体均由北京中杉金桥生物公司提供。MMP-9工作液浓度配置1∶150，E-Cad工作液浓度配置1∶60，同时应用一抗的稀释液代替一抗作为检测的阴性对照。染色前先将石蜡进行切片脱蜡，通过3%浓度的双氧水于室温下进行10min孵育，消除内源性过氧化物的酶活性。同时应用PBS冲洗。以5%的山羊血清进行封闭后室温下孵育30min，加入一抗，并于4℃下过夜。复用PBS冲洗，加入二抗，室温下孵育30min，并通过PBS冲洗后进行复染、脱水以及封片检测。分别记录各组检测情况。
1.3观察指标
对每张切片均于显微镜下随机选择5个不同位置的高倍镜视野进行观察计数。同时根据阳性细胞的占比情况评分结合染色强度的定量评分进行综合评分。对于阳性细胞的占比情况评分以<6%计为0分；以6%~25%计为1分；以26%~50%计为2分；以51%~75%计为3分并以>75%计为4分。染色强度的评分则依据着色深浅情况进行评分，以未着色计0分；由淡黄色至棕褐色以1~3分计数。总评分纳入两项计分之和，以0~1表示阴性，2~3分为弱阳性，4~5分为阳性，6分以上记为强阳性。
1.4统计学方法
通过SPSS16.0统计学软件包对所有的数据进行统计与分析。MMP-9与E-Cad表达情况以比率形式表示，组间对比通过x2检验，以P<0.05表示对比的差异存在显著性。
2结果
2.1两组研究对象的MMP-9蛋白表达的情况对比
MMP-9蛋白在观察组的阳性表达率为96%（48/50），在正常对照组的阳性表达率为48%（24/50）；两组对比存在有显著性的差异（P<0.05）。见表1。
3讨论
侵入性胎盘是作为当前产科的一类严重并发症，随着当前临床上剖宫产率不断提高，侵入性胎盘并发症的发生率也随之在提高[4-6]。当前，对于侵入性胎盘发生的机制仍未完全明确，对于其发生机制研究的主要方向集中在对滋养细胞入侵过度、蜕膜的缺陷以及子宫胎盘间的新生血管发生异常等方向[7]。有研究者认为，母胎界面可产生并分泌出多种基质蛋白、细胞因子以及黏附分子，其各相互制约维持平衡，并共同调控胎盘的滋养细胞侵袭行为[8]。而当这种平衡受到破坏则会导致滋养细胞出现过度侵袭从而形成了侵入性胎盘的并发症[9]。在母胎界面中，MMP-9与E-Cad是两类重要的组成蛋白物质，其可能均与侵入性胎盘的发生存在有一定的关联性。MMP-9在多项临床研究均显示，其可用于介导肿瘤细胞的浸润以及转移，并促进肿瘤血管的形成。在本研究中显示，在胎盘组织当中的MMP-9表达水平提高，则滋养细胞侵袭的能力也会增强，使细胞的外基质降解水平升高并引发侵入性胎盘并发症的发生。而E-Cad则是作为一种钙依赖性的跨膜糖蛋白，其主要是介导同种细胞黏附并对上皮层细胞完整性与极性进行维持。在本研究结果中，侵入性胎盘患者的E-Cad蛋白表达水平明显低于正常胎盘受检者。
综上所述，胎盘组织当中的MMP-9表达水平提高以及E-Cad表达水平的下降均与临床上侵入性的胎盘并发症的发生存在较大关联性，因此对MMP-9与E-Cad的临床检测能为侵入性胎盘的病理诊断提供一定的参考价值。
参考文献：
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论文作者:刘风云
论文发表刊物:《中国结合医学杂志》2018年6期
论文发表时间:2018/11/13
标签：胎盘论文; 产妇论文; 蛋白论文; 阳性论文; 基质论文; 水平论文; 发生论文; 《中国结合医学杂志》2018年6期论文;