程瑛 郭猛 孙利明 卢丹阳
（正大天晴药业集团股份有限公司；江苏连云港222000）
摘要：目的：富马酸喹硫平中的N,N-二甲基苯胺成分作为一种毒性杂质，随药品进入人体，会对人体内的细胞造成伤害，导致细胞变异，感染引起疾病。为此，本实验通过建立液相色谱-质谱联用方法对富马酸喹硫平中的N,N-二甲基苯胺成分做含量测定，测定富马酸喹硫平中基因毒性杂质 N,N-二甲基苯胺的含量。方法：本实验采用液相色谱-质谱联用仪作为主要仪器 ; 流动相 A 为甲醇-缓冲液，流动相 B 为乙腈-水溶液，进行梯度洗脱，设定流速为每分钟0.5ml，设置柱温60℃；利用三重四级杆串联离子阱液质联用仪以及Multiple Reaction Monitori( MRM ) 模式进行检测 ，采用正离子模式进行试验数据采集。结果：在富马酸喹硫平中，多次取样N,N-二甲基苯胺的含量在0.38ng ～ 8.19ng之间，且与峰面积呈现出一个适当的线性关系，试验得出线性方程为 Y = 3.58×106X + 607，其中r 等于0.9994。检测限是0.15ng，定量限是0.45ng。平均加样回收率超过百分之百。 结论：以质谱联用方法测定富马酸喹硫平中N,N-二甲基苯胺效果明显，可以在试验中使用。
关键词：富马酸喹硫平；N,N-二甲基苯胺；基因毒性；液质联用
引言：富马酸喹硫平是医学临床中一种比较常见的抗精神问题药物，其药物主要作用是对抗精神分裂，广泛应用在精神问题的治疗中。在富马酸喹硫平药物中，很容易因为处理不当残留N,N-二甲基苯胺成分，而N,N-二甲基苯胺成分是基因毒性杂质，在其进入人体后会对问题DNA造成破坏，导致DNA突变，甚至致癌[1]。为保证药品安全，国家开始重视对富马酸喹硫平中的N,N-二甲基苯胺成分的检测，通过液相色谱中的质谱联用方法对富马酸喹硫平中的N,N-二甲基苯胺成分做含量测定，是我国当下最高效，最简洁的N,N-二甲基苯胺成分测定方法。本文笔者通过对液质联用方法的研究，详细说明通过液质联用方式，对富马酸喹硫平中的N,N-二甲基苯胺成分进行测试的方法，以期促进我国药品行业发展。
1 仪器与试药
1.1仪器
液质联用的仪器由液相和质谱组成。液相型号为Ultimate 3000 高效液相色谱，其拥有由二元泵、真空脱气机、柱温箱、自动进样器、DAD 检测器及变色龙色谱工作站；质谱是由三重四级杆串联离子肼，以及Analyst 1.5.2版本的质谱工作站。天平为Sartorius BP212D型号的电子天平。
1.2药品
试验所用药品富马酸喹硫平以及对照品N,N-二甲基苯胺杂质由吉林省制药公司提供。
2 方法与结果
2.1 液质条件：
2.1.1色谱条件
2.1.2质谱条件
将电喷雾离子源调成正离子模式，进行数据采集，设定干燥温度为500℃，干燥气流速为14.0psi，雾化电压为5500V，传送电压为75V，碎裂电压为25V。采集离子对为122.0 →107. 0。
2.2溶液的制备
2.2.1供试品溶液
将一定量的富马酸喹硫平与稀释剂混合，通过超声溶解，将其稀释到每毫升含富马酸喹硫平40毫克，作为供试品溶液。
2.2.2系统适用性溶液
将一定量的富马酸喹硫平与 N,N-二甲基苯胺混合，通过超声进行溶解，并将其稀释至每毫升分别含富马酸喹硫平和 N,N-二甲基苯胺40毫克和0.08纳克的溶液，作为系统适用性溶液。
2.3精密度测定
精密量取N,N-二甲基苯胺对照品储备液，加入稀释剂稀释到每毫升0.08纳克的溶液，作为对照品溶液，连续进样六针，RSD 为1.78%。
2.4线性关系考察
精密取量N,N-二甲基苯胺对照品储备液，分别用稀释剂稀释至浓度为每毫升0.40、0.20、0.10、0.08、0.04、0.02 纳克溶液，并进样测试，得出线性方程为Y = 3.58×106X + 607 ( r =0. 9994) [3]。
2.5检测限和定量限
取适量N,N-二甲基苯胺对照品溶液，加入稀释剂将溶液稀释至每毫升0.02、0.01 纳克，并进行测试。可得出 N,N-二甲基胺的 LOD为百万分之0.01，相当于供试品的0.000025%，LOQ 为百万分之0.02，相当于供试品的0. 00005% 。
2.6回收率实验
精密称取富马酸喹硫平样品九份，分别用50%对照品、100%对照品、150%对照品溶液超声并溶解，制作成三份不同浓度溶液，并进行测试，平均加样回收率均大于百分之百。
2.7样品测定
取三份富马酸喹硫平药品，加入稀释剂进行超声溶解后制成40mg/ml的溶液，并检测其中N,N-二甲基苯胺的含量。按照方程Y = 3.58×106X + 607 ( r =0. 9994) 进行计算，可得出三份溶液中含有N,N-二甲基苯胺成分分别为每克内1.25微克、0.72微克、0.87微克，检测结果证明富马酸喹硫平中的N,N-二甲基苯胺成分均符合我国药品规定。
3讨论：
在试验中，多次对富马酸喹硫平药品进行多次取样，定针对不同含量的样品进行N,N-二甲基苯胺成分的测量，发现在药品中，N,N-二甲基苯胺的含量均符合国家标准，证明该药品对人体无害[4]。在富马酸喹硫平中，N,N-二甲基苯胺的含量在0.4ng ～ 8.0 ng的范围内，会与峰面积呈现出合理的线性关系，试验得出线性方程为 Y = 3．58 ×106X + 607，其中r 等于0．9994。 检测限是0.15 ng，定量限是0.45 ng。平均加样回收率为百分之百。 结论：以液质联用方法测定富马酸喹硫平中N,N-二甲基苯胺效果明显，可以在试验中使用。
参考文献：
[1]张龙元,谢勇,刘鳗瑶.富马酸喹硫平片联合碳酸锂缓释片对躁狂抑郁症治疗效果及认知功能的影响[J].甘肃科学学报,2019,31(04):74-78.
[2]杨柳.富马酸喹硫平联合阿立哌唑治疗精神分裂症的临床效果[J].中国民康医学,2019,31(06):85-86+111.
[3]徐建坤,罗莎莎.富马酸喹硫平片联合舒必利片治疗对偏执性精神障碍的临床疗效分析[J].全科口腔医学电子杂志,2019,6(02):46+50.
[4]杨永,刘劲松,邢海燕.富马酸喹硫平片在4种溶出介质中溶出曲线的比较研究[J].药物评价研究,2018,41(12):2252-2255.
论文作者:程瑛 郭猛 孙利明 卢丹阳
论文发表刊物:《医师在线》2019年8月15期
论文发表时间:2019/11/5
标签：苯胺论文; 二甲基论文; 富马酸论文; 溶液论文; 成分论文; 色谱论文; 平中论文; 《医师在线》2019年8月15期论文;