叶棋浓, 苏国富, 徐永强, 黄翠芬[1]1994年在《人单核细胞趋化蛋白－1（MCP－1）在大肠杆菌中的表达》文中提出人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）在大肠杆菌中的表达北京军事医学科学院生物工程研究所１００８５０叶棋浓，苏国富，徐永强，黄翠芬ＭＣＰ－１是近几年来发现的由７６个氨基酸组成的一种新型细胞因子，具有激活单核细胞和特异趋化单核细胞的活性，在机体防御、炎症...
陈宗雄[2]2002年在《重组人单核细胞趋化蛋白-1对荷骨肉瘤裸鼠的抑瘤效应及其与高剂量氨甲喋呤的协同作用》文中认为【目的】观察重组人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对骨肉瘤细胞种植和骨肉瘤生长的抑制作用及其与HD-MTX对荷骨肉瘤裸鼠的协同治疗作用。为临床进一步应用重组人MCP-1抗瘤作用提供实验依据。【方法】应用分子生物学、免疫学和病理学等技术，（1）将pGEX IN/MCP-1质粒转化入感受态TG-1大肠杆菌中，扩增，提取质粒DNA应用EcoRH Ⅰ酶、BamHⅠ酶进行双酶切鉴定。（2）应用IPTG诱导大肠杆菌表达重组人MCP-1蛋白，提取、纯化人MCP-1融合蛋白，SDS-PAGE电泳法及Western Blot法鉴定融合蛋白，光密度法测定浓度、纯度。（3）扩增培养骨肉瘤细胞HOS-8603，接种于裸鼠皮下，建立骨肉瘤动物模型。（4）将50只裸鼠分为10组：其中A_{1～4}组在接种骨肉瘤细胞同时注射MCP-1，剂量分别为1μg、10μg、100μg、1mg；B_{0～4}组在骨肉瘤细胞接种2周形成瘤体后予局部隔日注射MCP-1，剂量分别为0μg（0.2ml NS）、1μg、10μg、100μg、1mg，共20天；C组作空白对照。观察裸鼠临床及病理学指标。（5）在骨肉瘤细胞培养液中加入不同浓度MTX继续培养，观察细胞形态及数量变化，提取等数细胞RNA，进行电泳分析。（6）将裸鼠25只随机分为5组：荷瘤化疗组、荷瘤免疫治疗组、荷瘤对照组、荷瘤联合治疗组、正常裸鼠组空白对照。观察裸鼠临床及病理学、免疫学指标。【结果】（1）pGEX IN/MCP-1质粒双酶切后获得一240bpDNA片段；（2）融合表达产物蛋白分子量为34KD，与抗MCP-1的单克隆抗体呈阳性结合；（3）A_{2～4}组中MCP-1明显阻止了骨肉瘤细胞的种植，A_1组中极小剂量MCP-1也明显延迟其种植生长，抑瘤指数为69.69%, A_{1～4}组裸鼠血清AFP值明显低于B_0组（P< 0.01）。此外，MCP-1对已建立的骨肉瘤也具有一定的抗瘤作用，B_3组抑瘤指数达84.32%。病理检查示各组裸鼠重要脏器未见明显损害。（4）HD-MTX明显抑制了骨肉瘤的生长(P<0.01)，但经过一段时间后肿瘤可恢复生长；荷瘤联合<WP=6>治疗组中MCP-1明显增强了HD-MTX的抑瘤效果(P<0.01)，肿瘤出现再生长的时间延迟。【结论】（1）本室重组构建的质粒pGEX IN/MCP-1含人MCP-1基因，可表达具有人MCP-1生物学活性的融合蛋白。（2）MCP-1具有显著的阻止骨肉瘤细胞种植抑制肿瘤生长的作用，局部应用辅助其它治疗及手术野内预防肿瘤细胞种植具有极其重要的临床应用价值。（3）MCP-1与HD-MTX对骨肉瘤的生长具有协同抑制作用。
王飆落, 吴开春, 王字玲, 张学庸, 苏成芝[3]1996年在《单核细胞趋化蛋白－1在大肠杆菌中的表达》文中指出将人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ插入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，构建成质粒ｐＧＥＸ／ＭＣＰ转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经ＩＰＴＧ诱导后合成ＧＳＴ－ＭＣＰ－１融合蛋白。用１２％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测在３０ｋＤ左右有新生蛋白条带出现，表达量约占菌体总蛋白的３１．７％。趋化实验证明，该产物具备明确的单核细胞趋化活性。
张毅, 叶棋浓, 滕家波, 刘及, 苏国富[4]1999年在《人单核细胞趋化蛋白-1在大肠杆菌中的高效表达及其生物学活性》文中研究说明利用PCR和DNA重组技术，将人单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）cDNA克隆在表达载体pGEX－2T中，表达产物GST／MCP－1占菌体总蛋白的50％，且以无活性的包涵体形式存在。经变复性，GlutathioneSepharose4B亲合柱层析纯化，融合蛋白达到电泳纯，且具有MCP－1趋化活性。体内外抗肿瘤试验结果表明，GST／MCP－1激活单核细胞和淋巴细胞后可抑制肿瘤细胞生长，提示MCP－1可能成为肿瘤辅助治疗的一个候选药物。
王飙落[5]1996年在《人单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在大肠杆菌中的表达及活性研究》文中提出肿瘤相关巨噬细胞对恶性肿瘤的生长、转移和预后可能有着相当程度的影响，近年来的研究表明巨噬细胞在肿瘤局部的浸润与肿瘤细胞分泌的趋化因子，尤其是单核细胞趋化蛋白—1(MCP—1)引起血管内单核细胞的游出聚集密切相关。为进一步研究MCP—1与肿瘤相关巨噬细胞的关系，并探讨将MCP—1用于肿瘤局部生物治疗的可能性，本实验将PCR所得人MCP—1的cDNA克隆至原核表达质粒pGEX—4T—1中构建融合蛋白表达载体pGEX—4T—MCP在大肠杆菌JM109菌株表达了融合蛋白GST—MCP—1。通过谷胱甘肽—Sepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后，体外测定其单核细胞趋化活性。在裸鼠皮下接种胃癌SGC 7901细胞建立胃癌荷瘤裸鼠模型，在肿瘤周边注射纯化后GST—MCP—1观察其对肿瘤生长的影响，并在镜下观察H—E染色肿瘤组织切片中巨噬细胞浸润的情况，结果表明：载体pGEX—4T—MCP转化JM109后，37℃条件下经IPTG诱导可表达相当于菌体总蛋白31.6％的融合蛋白GST—MCP—1，经亲和层析初步纯化的表达产物在体外实验中表现出明确的单核细胞趋化活
苗红, 郭葆玉, 杨旭, 袁鹏群[6]2001年在《重组人单核细胞趋化蛋白-1在大肠杆菌中表达的优化》文中研究指明目的 :优化重组人单核细胞趋化蛋白 - 1(rhu MCP- 1)在大肠杆菌 DE3中的表达 ,生产 rhu MCP- 1。 方法 :应用 NBS15 L T.DR发酵罐 ,研究了诱导时不同的 p H值、温度、搅拌速率、通气量和异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)浓度对表达的影响 ,并利用正交设计对发酵条件进行优化。 结果 :正交试验表明溶氧条件对 rhu MCP- 1表达水平的影响较显著 ,其中搅拌速率和通气量为最大的影响因素 ,搅拌速率为 30 0 r/ m in和通气量 10 L / min时 ,表达水平最高 ,重组蛋白的含量可达 40 %以上。 结论 :本实验为该工程菌的中试提供了最佳的表达诱导条件 ,对大规模工业生产具有重要的指导意义
廖翠平, 赵鹿, 董世奇, 侯文彬, 樊慧蓉[7]2019年在《小檗属植物抗糖尿病及糖尿病并发症的研究进展》文中进行了进一步梳理小檗属植物资源丰富,药用历史悠久,可用于治疗多种疾病,其中刺檗、具芒小檗、毛叶黄耆和豪猪刺等植物的研究较为深入。小檗属植物的主要成分为生物碱类和黄酮类,研究最多的是小檗碱,其具有降血糖血脂、抗炎、抑菌等药理作用,可用于治疗糖尿病及其并发症。然而,对小檗碱的研究并不能代替对小檗属植物的研究。对小檗属植物提取物抗糖尿病及其并发症的药理作用和作用机制进行综述,为促进该属植物及其有效成分的临床应用提供理论基础。
潘少容, 曾克武, 白云[8]2019年在《细胞焦亡研究进展》文中提出细胞焦亡是一种促炎性的细胞程序性死亡方式,其生化及形态学特征、发生机制都与细胞凋亡等其他细胞死亡方式有着显著的不同。细胞焦亡的发生不仅与感染性疾病有关,而且与代谢性疾病、神经系统疾病和动脉粥样硬化等疾病的发生、发展密切相关。通过对细胞焦亡发生机制及其与相关疾病发生、发展的关系进行研究,有利于了解这些疾病的发病机理,并为治愈这些疾病提供新的思路及作用靶点。
参考文献：
[1]. 人单核细胞趋化蛋白－1（MCP－1）在大肠杆菌中的表达[J]. 叶棋浓, 苏国富, 徐永强, 黄翠芬. 中华微生物学和免疫学杂志. 1994
[2]. 重组人单核细胞趋化蛋白-1对荷骨肉瘤裸鼠的抑瘤效应及其与高剂量氨甲喋呤的协同作用[D]. 陈宗雄. 第二军医大学. 2002
[3]. 单核细胞趋化蛋白－1在大肠杆菌中的表达[J]. 王飆落, 吴开春, 王字玲, 张学庸, 苏成芝. 细胞与分子免疫学杂志. 1996
[4]. 人单核细胞趋化蛋白-1在大肠杆菌中的高效表达及其生物学活性[J]. 张毅, 叶棋浓, 滕家波, 刘及, 苏国富. 基础医学与临床. 1999
[5]. 人单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在大肠杆菌中的表达及活性研究[D]. 王飙落. 第四军医大学. 1996
[6]. 重组人单核细胞趋化蛋白-1在大肠杆菌中表达的优化[J]. 苗红, 郭葆玉, 杨旭, 袁鹏群. 第二军医大学学报. 2001
[7]. 小檗属植物抗糖尿病及糖尿病并发症的研究进展[J]. 廖翠平, 赵鹿, 董世奇, 侯文彬, 樊慧蓉. 药物评价研究. 2019
[8]. 细胞焦亡研究进展[J]. 潘少容, 曾克武, 白云. 生理科学进展. 2019