胡小雪 郭圣荣（通讯作者）
（上海交通大学药学院 上海 200240）
【摘要】目的：建立测定富马酸喹硫平缓释片有关物质的高效液相色谱法。方法：采用Inertsil ODS-2 C8-3色谱柱；以甲醇-乙腈(33:67)为流动相A，以0.01mol·L-1磷酸氢二钾溶液(用磷酸调节pH值至6.5)-流动相A(90:10)为流动相B，梯度洗脱，流速1.0mL·min-1；检测波长225nm；柱温40℃。结果：该方法能检测出所有已知杂质和降解产生的未知杂质，各杂质峰与喹硫平峰的分离度良好，且各杂质之间也能很好的分离。结论：本方法简便、准确、专属性强、重现性好，可用于富马酸喹硫平缓释片中有关物质的测定。
【关键词】富马酸喹硫平缓释片；有关物质；HPLC
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）20-0370-02
1.仪器与试药
Waters 2695 HPLC system/ Empower 3 software；
甲醇、乙腈、磷酸氢二钾均为色谱纯，磷酸、盐酸、氢氧化钠、过氧化氢均为分析纯；
富马酸喹硫平系统适应性对照品；富马酸喹硫平对照品；富马酸喹硫平API；富马酸喹硫平缓释片。
2.方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱Inertsil ODS-2 C8-3（4.6mm×150mm，5μm）；以甲醇-乙腈（33:67）为流动相A，以0.01mol·L-1磷酸氢二钾溶液（用磷酸调节pH值至6.5）-流动相A（90:10）为流动相B，流速为1.0mL·min-1，线性梯度洗脱程序见表1；检测波长为225nm；柱温为40℃；进样体积为20μL。
2.2 溶液的制备
2.2.1稀释液：流动相A-流动相B（50:50）。
2.2.2供试品溶液：精密称取富马酸喹硫平缓释片研磨的细粉适量（相当于喹硫平25mg）于100mL量瓶，加入稀释液超声10分钟，再加入稀释液至刻度，混匀后过滤即可。
2.2.3对照品溶液：精密称取富马酸喹硫平对照品适量（相当于喹硫平25mg）于100mL量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密移取5.0mL于100mL量瓶中，加稀释液至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密移取该储备液2.0mL于50mL量瓶中，加稀释液至刻度，摇匀即可。
2.2.4系统适用性溶液：精密称取富马酸喹硫平系统适用性对照品约10mg于50mL量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
2.3 系统适用性试验与方法专属性考察
2.3.1系统适用性试验 取稀释液、空白辅料溶液、系统适用性溶液、对照品溶液及样品溶液注入液相色谱仪进行测定。结果表明，稀释液和空白辅料溶液在喹硫平及已知杂质保留时间处无色谱峰检出，系统适应性溶液中喹硫平峰的拖尾因子小于1.5，喹硫平与相邻杂质的分离度为大于2，系统适应性符合要求。
2.3.2强制破坏试验 取富马酸喹硫平缓释片、制备该片剂的原料药及其空白辅料，分别进行如下处理：（1）加入稀释液适量，超声，加入1N盐酸溶液5mL，于80℃条件下放置24小时，碱中和；（2）加入稀释液适量，超声，加入2N氢氧化钠溶液5mL，于80℃条件下放置24小时，酸中和；（3）加入5mL3% H2O2溶液，于室温下放置0.5小时；（4）高温破坏（105℃，24小时）；（5）高湿破坏（92.5%RH，10天）；（6）光照破坏（4500±500 Lux，10天）。按照“2.2.2”项下供试品溶液的配制方法配制溶液并进行测定。
结果显示，空白辅料经酸、碱、氧化、高温、高湿及光照破坏后均未产生对主成分及其杂质测定有影响的色谱峰；原料药及制剂破坏实验结果基本一致，经碱、高湿和光照破坏后未产生杂质，但经酸、氧化及高温破坏后，均产生少量降解产物，说明本品对酸、氧化及高温均不稳定，对碱、高湿和光照稳定。降解后的产物与主成分峰均能达到有效分离，且各杂质之间分离情况良好，主峰纯度均达到1.000。
以上实验结果证明，该色谱条件专属性强，适合本品有关物质的检查。
2.4 方法精密度
取本品的细粉适量（约相当于喹硫平25mg），照“2.2.2”项下供试品溶液制备方法，平行制备6份。精密量取10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，计算6份样品中喹硫平的含量的相对标准偏差（RSD）。
结果6份样品中喹硫平含量的RSD为2.7%，由此表明该方法精密度良好。
2.5 溶液稳定性
将富马酸喹硫平对照品溶液和样品溶液在室温条件下放置，并在第0d、1d、2d、4d分别取样进行测定，记录色谱图，结果见表2和表3。
由上述结果可见，对照品溶液和样品溶液在放置4天内测得的主峰峰面积无明显变化，样品溶液中最大单杂及总杂量也无明显变化，表明该对照品溶液和样品溶液稳定性良好。
3.讨论
对USP monograph[3]的流动相进行调整，将有机相的乙腈换为乙腈与甲醇的混合，这样可降低流体的粘度，减轻柱压对柱子的损耗，同时调整了缓冲盐的pH值，优化梯度，最终使各杂质均达到了理想的分离效果。
4.结论
富马酸喹硫平缓释片在新版药典（2015版）中无有关物质检查方法，经验证，本测定方法简便、准确、专属性强、重现性好，可用于富马酸喹硫平缓释片中有关物质的测定。
【参考文献】
[1]戴婕,李芳芳.富马酸喹硫平片人体生物等效性研究[J].中国现代应用药学,2013,30（6）:641.
[2]中国药典2015年版.正文:富马酸喹硫平.
论文作者:胡小雪,郭圣荣（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2018年7月第20期
论文发表时间:2018/7/31
标签：溶液论文; 稀释液论文; 色谱论文; 杂质论文; 富马酸论文; 平缓论文; 精密论文; 《医药前沿》2018年7月第20期论文;