乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值分析论文_文雯

乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值分析论文_文雯

文雯

毕节市第一人民医院 贵州毕节 551700

【摘 要】目的:本文就乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值进行分析与研究。方法:选择我院自2014年9月-2015年10月期间确诊为乙型肝炎病毒患者50例,其后将上述患者进行平均分组,接受ELISA法的患者设为A组,接受实时荧光定量PCR检测的患者设为B组,其后对比检测结果。结果:B组患者的HBV-DNA阳性率明显高于A组,且组间由统计学软件分析,结果存在显著性差异。结论:在乙型肝炎病毒检测中应用实时荧光定量PCR,具有较高的敏感度,且可以对疾病的预后奠定基础。

【关键词】乙型肝炎病毒DNA;实时荧光定量PCR检测;诊断价值

乙型肝炎病毒所属乙型肝炎病原体范畴,一旦患者感染此病毒,其免疫标志物会出现变化[1]。从以往的检测手段来看,临床常以ELISA法为主,虽然该方法可以使病毒状态得以展现,但是相对受限。近年来,实时荧光定量PCR检测法应运而生,凭借较高的敏感性和特异性广泛应用于临床。为此,本文为探究该检测方法的诊断价值,选择我院近一年收治的确诊为乙型肝炎病毒患者50例作为研究对象,现将研究结果进行如下分析。

1 资料内容与检测方法

1.1 资料内容

本次研究数据结果选择我院自2014年9月-2015年10月期间确诊为乙型肝炎病毒患者50例,其后将两组患者进行平均分组,即A组和B组,每组患者25例。A组(n=25)患者中,男性患者15例,女性患者10例,年龄分布范围在25-48岁之间,中位年龄为(31.2±4.7)岁。B组(n=25)患者中,男性患者20例,女性患者5例,年龄分布范围在22-50岁之间,中位年龄为(32.3±4.4)岁。统计学软件分析两组受检者的资料内容,结果并无显著,可进一步研究。

1.2 检测方法

首先收集A组和B组患者的样本,收集方法为:选取患者的静脉血,并对上层血清进行分离,其后选取患者的上层血清,100μ,与此同时,将等量的DNA浓缩液加入其中,利用振荡器将其摇匀,并进行离心,时间约为10分钟。最后将上层血清除去后将30μL的DNA提取液加入其中,混匀后进行离心,并静置在恒温条件下。其后给予A组患者ELISA法检测,最后结果依据酶标仪进行诊断;给予B组实时荧光定量PCR检测,最后结果依据宏石SLAN核酸扩增仪进行诊断[2]。

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1.3 指标观察

对A组和B组患者的检测结果进行对比,最后将所得记录进行分析和统计。

1.4 数据整理

本次研究所涉及的数据均由软件包(SPSS11.0)进行整理和计数,阳性率为本次的计数资料,以%表示,组间检验结果选择卡方进行,当P〈0.05则表示差异具有显著性。

2 结果

A组(n=25)患者接受ELISA法检测,并对其HBsAg、HBeAgy以及HBcAb标记,结果显示:15个样本结果呈阳性,标记物为:HBsAg和HBcAb,检测阳性率为60.0%;B组(n=25)患者接受实时荧光定量PCR检测,并对其HBsAg、HBeAgy以及HBcAb标记,结果显示:25个样本结果呈阳性,检测出的标记物为:HBsAg、HBeAgy以及HBcAb,检测阳性率为100%;组间结果由统计学软件进行分析和整理后得知:B组患者的阳性检测率高于A组,且差异显著。

3 讨论

据有关统计显示,乙肝肝炎以及携带HBV的患者达到数亿人以上,且感染发生率可达10%[3]。一般而言,HBV的传播途径以母婴为主,在一定程度上会危及其生命安全,因此,及早诊断及早治疗对临床有着重要的意义。在以往的检测手段中,HBV血清标志物检测应用较为普遍,临床上又将其称之为两对半检测,该检测方法可以将患者体内的HBY免疫反应得以展现,虽然可以明确病毒入侵信息,但是存在一定的局限性。近年来,实时荧光定量PCR检测广泛应用于临床,该检测方法不仅可以将病毒携带水平得以体现,同时具有较高的特异性和敏感性[4]。与此同时该检测方法可以量化HBV-DNA,在一定程度上可以进一步了解患者的传染性,以及HBV复制情况,从而对疾病的治疗奠定良好基础,利于预后。此外,实时荧光PCR检测技术具有一定的优势,其主要是PCR与DNA探针技术相结合,对PCR进行探测时,会改变荧光信号,与此同时,在实验期间,其主要过程均在封闭状态中实施,免于PCR的后期处理,同时免于PCR的电泳检测,在一定程度上使PCR定量和污染问题得到处理,且速度较快,同时具有较高的准确性和特异性[5]。因此,实时荧光定量PCR检测可以作为诊断乙型肝炎病毒的手段。

一般而言,HBV的抗原主要HBsAg、HBeAgy、HBcAb以及HBeAb,而HBcAb呈现阳性时,则提示HBV感染。结合本次实验数据结果可以得知,B组患者采用实时荧光定量PCR检测,A组患者采用ELISA法检测,研究结果显示:B组阳性检测率明显高于A组,且组间由统计学软件进行检验和整理,结果差异显著。这一研究结果足以体现实时荧光定量PCR检测的价值和优势。

综上结果进行总结,在乙型肝炎病毒检测中应用实时荧光定量PCR,具有较高的敏感度和特异性,从而可以做到及早诊断及早治疗,在一定程度上可以对疾病的预后奠定基础。

参考文献:

[1] 夏吉荣,曹炬,杨双双等.实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA性能验证的临床应用[J].激光杂志,2014(10):131-133.

[2] 夏吉荣,杨双双,罗志鑫等.多参数在实时荧光定量PC R检测乙型肝炎病毒DNA室内质控中的应用[J].激光杂志,2013(4):123-124.

[3] 周丹.乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测在临床诊断中的价值[J].检验医学与临床,2010,07(20):2271-2272.

[4] 宋广辉,王清,伦立民等.Taqman锁核酸探针实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA[A].//第四届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛论文集[C].2011:175-177.

[5] 魏留柱.乙型肝炎病毒核酸实时荧光定量 PCR 检测在临床诊断中的价值[J].转化医学电子杂志,2015(1):134-135.

论文作者:文雯

论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年2月第3期

论文发表时间:2016/6/7

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