曹晓林[1]2002年在《喉癌侵袭、转移与Ⅳ型胶原、胶原酶及TIMP-1的相关性研究》文中研究指明前言 侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，是肿瘤细胞内在特性及其与细胞外基质(extracellular matrix，ECM)相互作用的结果，是患者病死的重要原因。Ⅳ型胶原是ECM的有形结构—基底膜(basement membrane，BM)中的主要成分，在组织的内皮或上皮下起着支架和分隔作用，是阻止肿瘤侵袭、转移的一道生物学防线。其表达水平取决于影响其合成与降解速度的诸多因素，其中Ⅳ型胶原酶(包括MMP-2，MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1，TIMP-1)是影响其合成和降解的重要酶类。有报道，在乳腺癌、膀胱癌及一些头颈部恶性肿瘤中，出现了Ⅳ型胶原表达的下降和相关酶类—Ⅳ型胶原酶的升高、TIMP-1表达的变化。本研究运用SP免疫组化方法对44例喉鳞状细胞癌及22例喉癌癌旁正常组织中Ⅳ型胶原、Ⅳ胶原酶(包括MMP-2，MMP-9)及TIMP-1的表达进行了检测，并通过分析它们的表达水平与喉癌临床TNM分类分期，病理分级、发生部位及预后的关系，初步探讨它们在喉癌侵袭、转移中的作用。 材料和方法 本研究选用杭州市第一人民医院1996年1月—2000年1月间喉癌手术切除、经HE染色确诊为鳞癌的标本44例，其中男41例，女3例；年龄40岁～83岁，中位年龄67岁。根据UICC1997年标准进行临床分区及分类分期：声门上型22例，声门型21例，声门下型1例；T分期，T_17例，T_29例，T_39例，T_419例；N分期，N_026例，N_110例，N_26例，N_31例；TNM临床分期，Ⅰ期7例，Ⅱ期6例，Ⅲ期10例，Ⅳ期21例。肿瘤组织病理分级：G_1(高分化)10例，G_2(中分化)33例，G_3(低分化)1例。所有病例术前均未经 放射治疗和 ＊或）化学治疗，术后随访2年～5年。另选取H例经＊E染色 确定为喉正常粘膜的癌分正常组织作为对照组，其中男ZO例，女2例。所有 林本均经10％甲醛固定，石峪包地，5 u m连续切片。 用SP ％疫组化方法检测喉癌及癌分组织中的IV型胶原、MMPZ、MMP习 及UMI。－1的表达情况（一抗消瘦：IVki胶原为1：100，＊＊卜2、＊＊卜9和TIMP一为1：50人DA1｝显色。结果以t！l现棕黄色染色为！肝脏反应，w型胶原 叽州；反应定位于细胞外，MM卜2、＊MPq及TIM卜1 均定位于细胞浆。以PBS｛ 势一抗作为阴卜Z对只；W型月 原以问 一切片 卜I厂】叶染色的 血＿管壁或神经贞顺为阳性对照，IV yig胶原酸及TIMP 以己知的阳性染色的乳腺癌切片 作为阳 化；对照。 采用的统计方法有／检验，；检验和n扣r精确检验，所有资料在计算 机＿l十［J SPSS10刀 forwindows软件包进行处理。 结 果 1．’、收协7俩分厂一 组织1 比，，收癌组＿织。二I二。IV型胶原的表达出显降 低多 MMP二、MMP司及TIMP河的表达明显增高，差异4！。常显着（Prto刀1＼二．写。JT；＿，口 9 A 比，、A门 癌组织厂1正＊ 州交原的 表达明 显卜，，M＊P－2明显 】曾高，有显着差异（P＜0．of人 MMP习现ITIMP河的表达组问无显着差异 （尸Tho刀5）；3．‘刁N＊【们添一 比罗N；＊喉大组织。二；川u周交原亡 表达降 低多 ＊M卜9增高富 差 异有见法性（P＜0．05人 MMP2和 TIMP刁’0表达组I”［1］无显着差异（P＞ 0对引2一4．｝JI 一11则喉癌＊ 比，＊河们测卫 癌： 二。IV地收原厂 表达降 低回 ＊＊P一2增；高日 又异有显着性（P＜O．0引，MMP－9和TIMP－1的表达组问无显着差异（尸 ＞0对引； 5．j：亏 GI门 J 相比，GZ－3＊ 9 grJ织 l－IJIV型胶原的 表达降 低，MMP－2明显增 高， X并丫一IO叁代以公统 工学意义（尸＜0刀1），MM卜9及厂nMP一1表达全 区 无死 》X＃； 76＠ 与厂 l气一J型｝ 癌相比罗 声 l气j且Y9；lfkl｛h组织。…I门V型月 原的表达水平下降， MMP习的表达水‘l灯 高o＜0．01），MMP王和 TIMP一组l到无显着差异；7＠ fJM冷之 织 I－一正二IIV 型胶原表达水一平越下、MMP一9 表达J 平越高不／或 你M卜yMM卜9）／IM卜1比值越高，您甘术后复发不／或转移户 可口示 越 大，依后基，反之则预后较好。 结 论1．w型胶原是机体叫＿上很癌细胞侵袭、村移的人然屏障；它的缺失范m越 人冒。工＊一R表明 可 峨大纠！胞发生侵袭凭 个移厂 可尚性越大口二．IV ｝jJ交原 视在很癌细胞侵袭、转移过W ＊可能起着重要的 作j，是二要 的没门水解酶类；它的两个W型在川。癌扩做过程rf，所起的作用不尽相同： MMP上山”能上要！1川0。瘤细胞分泌，作用于JJlll癌细胞向局部侵袭的阶段； M MM）司可能否11。1。赔g【1！胞和口 质到地人！。O分泌，主要利用在向颈淋巴自转 移的阶段。3．T且MP一l的表达水平在l很痛夕织l且认＿届增高，们它在I喉癌细胞侵袭复 转 移 叁 代中所起〔 作问I不外境，这了一能是山 下它还存在有J他作＊ 一 言 和途 t4?
严永峰[2]2009年在《MMP2和TIMP1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义》文中提出目的:探讨喉鳞癌组织中MMP2和TIMP1表达及其临床意义与喉鳞癌生物学特性的关系。方法:选择石蜡包埋的喉鳞癌标本61例,喉癌癌旁黏膜33例作为对照组,采用免疫组织化学卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(avidin-biotin peroxidase complex,ABC)法检测MMP2和TIMP1在喉鳞癌中的表达,并分析MMP2和TIMP1的表达与喉鳞癌的病理分化程度、T分级、临床分型、临床分期、淋巴结转移及浸润深度的关系。结果:MMP2蛋白在喉鳞癌及癌旁组织中表达阳性率分别为72.1%和42.4%(P＜0.05);在喉鳞癌中T1-T2级和T3-T4级阳性表达率各为57.1%和92.3%;淋巴结有无转移阳性表达率各为93.3%和65.2%;临床分期Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期阳性表达率各为51.6%和93.3%;浸润浅层与深层阳性表达率各为40.0%和82.6%,各组间比较均有统计学意义(均P＜0.05)。TIMP1蛋白在喉鳞癌及癌旁组织中表达阳性率分别为45.9%和81.8%(P＜0.05);在喉鳞癌中T1-T2级和T3-T4级阳性表达率各为62.9%和23.1%;淋巴结有无转移阳性表达率各为13.3%和56.5%;临床分期Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期阳性表达率各为67.7%和23.3%;浸润浅层与深层阳性表达率各为73.3%和37.0%,各组间比较均有统计学意义(均P＜0.05),且MMP2和TIMP1的表达与发病部位、病理分化程度、年龄、性别、民族均无相关性(P＞0.05)。MMP2和TIMP1在喉鳞癌中表达呈负相关,相关系数r=-0.601(P＜0.01)。结论:1.MMP2和TIMP1的阳性表达强度与喉鳞癌的生物学特性密切相关。2.MMP2和TIMP1在喉鳞癌的发展及侵袭和转移中发挥重要的作用。3.MMP2和TIMP1可作为判断喉鳞癌预后的重要指标。
吴成勇[3]2008年在《CD44、TIMP-1、β-catenin在子宫颈癌中的表达及其临床意义研究》文中提出目的:研究肿瘤浸润转移相关基因粘附分子吞噬糖蛋白(CD44v6)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)、β2环连蛋白(β-catenin)在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义。方法:应用免疫组化S-P法检测收集于新疆自治区人民医院经病理确诊的子宫颈癌手术切除组织60例,正常组织10例,观察肿瘤转移相关基因CD44、TIMP-1和β-catenin的表达与子宫颈鳞状细胞癌发生及浸润、转移的关系。结果:1)60例宫颈鳞状细胞癌组织中,CD44、TIMP-1、β-catenin的表达阳性检出率分别为:51.7%(31/60)、31.7%(19/60)和38.3%(23/60);2)CD44在不同组织学分级和有、无淋巴结转移的宫颈鳞状细胞癌患者中表达差异有显着性,P<0.05。TIMP-1在不同浸润深度宫颈鳞状细胞癌组织中表达差异有显着性,P<0.05,TIMP-1在晚期高表达,提示可作为联合检测肿瘤负荷的标志物之一。结论:提示CD44蛋白的低表达和β-catenin蛋白的高表达与宫颈癌的病情发展及转移的发生相关,并提示可作为预后判定的参数。TIMP-1的失活对宫颈鳞状细胞癌获得浸润转移的潜能可能起着重要作用,并提示可作为肿瘤的分期指标。
李薇[4]2008年在《MMP-1、MMP-13和TIMP-4在喉癌中的表达及其意义》文中认为目的:基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及其内源性抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)是调节基底膜(basement membranes,BM)和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成与降解动态平衡过程中最重要的蛋白水解酶类。BM和ECM的降解是癌细胞侵袭与转移过程中的一个关键步骤。MMP-1和MMP-13属于MMPs家族中的间质胶原酶,可降解BM和ECM的多种成分,TIMP-4是TIMPs家族中的最新成员,可与MMPs形成1:1的复合体,从而抑制其活性。本研究的目的在于了解MMP-1、MMP-13和TIMP-4在喉癌中的表达情况,探讨叁者与喉癌的侵袭和转移的关系,寻找可能预测喉癌侵袭和转移的肿瘤标志物,用于指导临床。方法:运用组织芯片免疫组化的方法检测50例配对喉癌组织和癌旁组织中MMP-1、MMP-13及TIMP-4的蛋白表达水平;运用荧光定量RT-PCR的方法检测22例配对喉癌组织和癌旁组织中MMP-1、MMP-13及TIMP-4 mRNA的表达水平。根据2002年UICC制定的TNM分期标准将喉癌组织分为T_1+T_2组与T_3+T_4组、根据有无淋巴结转移分为非淋巴结转移组(LN-)和淋巴结转移组(LN+),比较各组之间MMP-1、MMP-13及TIMP-4表达情况。结果:(1)喉癌组织中MMP-1蛋白高表达率(75.5%)高于癌旁组织(2.2%)、T_1+T_2组低于T_3+T_4组、LN-组低于LN+组(P＜0.05)。喉癌组织中MMP-1mRNA相对表达量(2.005±0.758)高于癌旁组织(0.476±0.350)(P＜0.05);T_1+T_2组和T_3+T_4组之间、LN-组和LN+组之间差异均无统计学意义(P＞0.05)。(2)喉癌组织中MMP-13蛋白高表达率(40.8%)高于癌旁组织(2.4%)、T_1+T_2组低于T_3+T_4组、LN-组低于LN+组(P＜0.05)。喉癌组织中MMP-13mRNA相对表达量(0.604±0.389)高于癌旁组织(0.160±0.101)(P＜0.05);T_1+T_2组和T_3+T_4组之间、LN-组和LN+组之间差异均无统计学意义(P＞0.05)。(3)喉癌组织中TIMP-4蛋白高表达率(16.0%)低于癌旁组织(51.6%)、T_1+T_2组高于T_3+T_4组、LN-组高于LN+组(P＜0.05)。喉癌组织中TIMP-4mRNA相对表达量(0.342±0.243)低于癌旁组织(0.814±0.459)、T_1+T_2组高于T_3+T_4组、LN-组高于LN+组(P＜0.05)。结论:(1)成功的制作了100点阵的喉癌组织芯片,芯片质量好,平均有效率达93%。(2)喉癌组织中MMP-1和MMP-13的表达增高、TIMP-4的表达降低,对喉癌的诊断有一定的参考价值。(3)MMP-1和MMP-13蛋白在T_3+T_4组和LN+组高表达,这两种蛋白酶可能促进喉癌的的侵袭和淋巴结转移,对临床选择治疗方案和评估预后有一定的参考价值。(4)TIMP-4蛋白及mRNA在T_1+T_2组和LN-组高表达,提示TIMP-4可能起到抑制喉癌侵袭和淋巴结转移的作用,为临床开发抗肿瘤药物提供了新思路。
白雪[5]2017年在《MMP-9在食管鳞癌上皮间质转化中的作用及机制研究》文中提出背景食管癌(esophageal cancer,EC)是人类十大恶性肿瘤之一,中国是世界上食管癌发病率和死亡率最高的国家,其中以食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)为主。随着社会经济地位,生活方式和医疗水平的改善,我国食管癌的发病率和死亡率呈逐年下降的趋势,但患者的5年生存率仍然很低,目前仍是治疗的难点,其主要原因就是肿瘤的侵袭和转移。近年来,国内外研究发现,上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是多细胞生物胚胎发生过程的基础,其在组织重建、伤口修复等过程中都有发挥重要作用。此外,EMT也是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得侵袭、迁移和抗凋亡能力的重要生物学进程。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs),是一类依赖金属钙离子(Ca2+),锌离子(Zn2+)的内肽酶家族,它的主要功能就是几乎能降解细胞外基质的各种蛋白组分。其中,MMP-9又称为明胶酶B,作为降解细胞外基质和基底膜的关键酶,对恶性肿瘤的发展、侵袭转移及间质血管生成起着重要的作用。最近研究表明,MMP除了可以降解细胞外基质的各种蛋白组分之外,一些MMP(如MMP-3 MMP-9、MMP-14和MMP-28等)可以诱导EMT或EMT相关进程。转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1是调节EMT的关键因素之一,它广泛参与人类各种恶性肿瘤EMT的发生。更为重要的是,有研究报道,MMP-9参与TGF-β诱导肾小球内皮细胞EMT进程。这说明MMPs在TGF-β介导的EMT中起到重要的作用。截至目前,MMP-9是否参与食管鳞癌EMT进程,MMP-9是否参与TGF-β1诱导的食管鳞癌EMT进程,这些都尚未见报道。本研究为了解决这些问题,将从以下四个部分进行研究。第一部分食管鳞癌组织中MMP-9、Snail和TGF-β1的表达与EMT的关系及临床意义目的:探讨MMP-9、Snail和TGF-β1与E-cadherin的关系及其与临床病理学因素的关系。方法:1.采用免疫组化SP法检测77例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常组织中MMP-9、Snail、TGF-β1和E-cadherin蛋白的表达情况。2.分析MMP-9与Snail、TGF-β1和E-cadherin的关系及与性别、年龄、肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及肿瘤TNM分期等临床病理参数的关系。结果:1.食管鳞癌组织较癌旁正常组织表达MMP-9(74.03%vs31.17%)、Snail(68.83%vs 25.97%)、TGF-β1(71.43%vs 36.36%)明显增高(P<0.01),E-cadherin(44.16%vs 100.0%)明显下降(P<0.01)。2.MMP-9蛋白表达与肿瘤组织学分级(I vsII vs III:58.33%vs 77.27%vs100.0%,P<0.05)、肿瘤浸润深度(T1 vs T2 vs T3:42.86%vs 65.0%vs 88.37%,P<0.01)、淋巴结转移(无vs有:67.21%vs 100.0%,P<0.01)及TNM分期(I vsII vsIII:66.67%vs 67.39%vs 100.0%,P<0.05)呈正相关,而与性别、年龄无关(P>0.05)。Snail蛋白表达与肿瘤浸润深度(T1 vs T2 vs T3:35.71%vs75.00%vs 76.74%,P<0.05)、淋巴结转移(无vs有:60.66%vs 100.0%,P<0.01)呈正相关,而与性别、年龄、肿瘤组织学分级及TNM分期无关(P>0.05)。TGF-β1蛋白表达与淋巴结转移(无vs有:65.57%vs 93.75%)和TNM分期(I vsII vsIII:46.67%vs 73.91%vs 87.50%)呈正相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤组织学分级及肿瘤浸润深度无关(P>0.05)。E-cadherin蛋白表达与肿瘤浸润深度(T1 vs T2 vs T3:71.43%vs 55.0%vs 30.23%)和淋巴结转移(无vs有:50.82%vs 18.75%)呈负相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤组织学分级、浸润深度及TNM分期无关(P>0.05)。3.食管鳞状细胞癌组织中,MMP-9与Snail蛋白呈正相关(γs=0.292,P<0.01)。MMP-9与E-cadherin蛋白呈负相关(γs=–0.295,P<0.01);Snail与E-cadherin蛋白呈负相关(γs=–0.241,P<0.01)。MMP-9与TGF-β1蛋白呈正相关(γs=0.327,P<0.01);TGF-β1与E-cadherin蛋白呈负相关(γs=–0.432,P<0.01)。第二部分MMP-9在食管鳞癌EMT中的作用及对其侵袭迁移的影响目的:探讨MMP-9对食管鳞癌细胞上皮间质转化及侵袭迁移能力的影响及可能的机制。方法:1.MMP-9表达上调对食管鳞癌EMT及侵袭迁移能力的影响:外源性重组人MMP-9(rMMP-9)蛋白刺激食管鳞癌EC-1细胞株不同时间(0 h,24 h,48 h),于倒置显微镜观察细胞形态学改变;Real-time PCR,Western blot及细胞免疫荧光方法检测E-cadherin和Vimentin mRNA及蛋白的表达变化;采用侵袭实验及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。2.MMP-9表达下调对食管鳞癌EMT及侵袭迁移能力的影响:MMP-9shRNA稳定转染食管鳞癌EC-1细胞株48h,于倒置显微镜观察细胞形态学改变;Real-time PCR,Western blot及细胞免疫荧光方法检测E-cadherin和Vimentin mRNA及蛋白的表达变化;采用侵袭实验及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。3.通过Real-time PCR和Western blot方法检测MMP-9表达上调/下调后对食管鳞癌EC-1细胞中Snail表达的影响。4.利用siRNA技术干扰Snail的表达,然后用rMMP-9刺激EC-1细胞48h后,通过Real-time PCR和Western blot方法检测EC-1细胞EMT分子标记物E-cadherin和Vimentin的表达变化;采用侵袭实验及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。结果:1.MMP-9表达上调对食管鳞癌EMT及侵袭迁移能力的影响:外源性rMMP-9刺激食管鳞癌EC-1细胞株后,细胞形态发生明显变化,由上皮细胞形态向间质细胞形态转变,以48h最为显着。Real-time PCR和Western blot结果显示,与空白组(0h)相比,rMMP-9刺激后E-cadherin mRNA[24h组(0.62±0.07 vs1.00±0.00)、48h组(0.48±0.09 vs1.00±0.00),均P<0.01]及蛋白[24h组(0.51±0.0.07vs 0.67±0.05),P<0.05、48h组(0.43±0.09 vs 0.67±0.05),P<0.01]的表达明显降低,Vimentin mRNA[24h组(1.30±0.08 vs1.00±0.00)、48h组(1.58±0.09vs1.00±0.00),均P<0.01]及蛋白[24h组(0.66±0.07 vs 0.50±0.07),P<0.05、48h组(0.77±0.06 vs0.50±0.07),P<0.01]的表达明显上调。细胞免疫荧光结果和Western blot结果相一致。此外,细胞侵袭实验和划痕实验结果显示:与空白组(0h)相比,rMMP-9刺激组细胞的穿膜细胞数(113±12 vs 75±9)显着增多及划痕愈合能力(0.66±0.05vs 0.43±0.07)显着增强(P<0.05)。2.MMP-9表达下调对食管鳞癌EMT及侵袭迁移能力的影响:MMP-9shRNA稳定转染食管鳞癌EC-1细胞株后,与空白组和阴性对照组(转染无义序列)相比,MMP-9 shRNA组中部分细胞形态由长梭形或间质样形态向上皮细胞形态转变,细胞粘附性增强,细胞与细胞间的连接变的紧密;Real-time PCR和Western blot结果显示,与阴性对照组和空白组相比,MMP-9 shRNA组中MMP-9mRNA(0.36±0.05 vs 0.92±0.07 vs 1.00±0.00)及蛋白(0.48±0.05 vs 0.64±0.06 vs0.72±0.08)的表达明显下调(P<0.01),E-cadherin mRNA(1.75±0.09 vs 0.90±0.07vs 1.00±0.00)及蛋白(0.80±0.06 vs 0.57±0.05 vs 0.62±0.08)的表达明显上调(P<0.01),Vimentin mRNA(0.70±0.08 vs 0.91±0.05 vs 1.00±0.00)及蛋白(0.48±0.03vs 0.63±0.04 vs 0.68±0.07)的表达明显下调(P<0.05)。细胞免疫荧光结果和Western blot结果相一致。此外,细胞侵袭实验和划痕实验结果显示:与阴性对照组和空白组相比,MMP-9 shRNA组细胞穿膜细胞数(49±5 vs 78±4 vs 82±8)显着降低及划痕愈合能力(0.25±0.07 vs 0.43±0.08 vs 0.44±0.05)显着减弱(P<0.05)。3.MMP-9对食管鳞癌细胞中调节EMT的关键分子Snail的影响:Real-time PCR和Western blot结果显示,当MMP-9表达上调时,与空白组(0h)相比,Snail mRNA[24h组(1.55±0.08 vs 1.00±0.00)、48h组(2.29±0.11 vs 1.00±0.00),均P<0.01]及蛋白[24h组(0.69±0.04 vs 0.56±0.08),P<0.05、48h组(0.80±0.07vs0.56±0.08),P<0.01]的表达显着增加;当MMP-9表达下调时,与阴性对照组及空白组相比,MMP-9 shRNA组中Snail mRNA(0.65±0.08vs 0.90±0.08 vs1.00±0.00)及蛋白(0.54±0.08vs 0.69±0.04vs 0.72±0.06)表达显着降低(P<0.01)。4.Snail表达下调对食管鳞癌EMT及侵袭迁移能力的影响:Real-time PCR和Western blot结果显示,与空白组相比,Snail siRNA组中Snail mRNA(0.43±0.04vs 1.00±0.00)及蛋白(0.31±0.05 vs 0.51±0.07)的表达水平显着下调(P<0.01),E-cadherin mRNA(1.49±0.07 vs 1.00±0.00)及蛋白(0.82±0.06 vs 0.66±0.03)的表达水平显着上调(P<0.01),Vimentin mRNA(0.56±0.08 vs 1.00±0.00)及蛋白(0.37±0.05 vs 0.52±0.06)的表达水平显着下调(P<0.01);穿膜细胞数(42±8vs 82±4)显着降低及划痕愈合能力(0.21±0.09 vs 0.41±0.05)显着减弱(P<0.05)。5.Snail表达下调对MMP-9介导的食管鳞癌EMT及侵袭迁移能力的影响:Real-time PCR和Western blot结果显示,与rMMP-9组相比,Snail siRNA+rMMP-9组中E-cadherin mRNA(0.72±0.06 vs 0.44±0.09)及蛋白(0.57±0.04 vs0.45±0.05)的表达水平升高(P<0.01),Vimentin mRNA(0.73±0.09 vs 1.36±0.08)及蛋白(0.44±0.05 vs 0.80±0.04)的表达水平下降(P<0.01);穿膜细胞数(61±10vs 121±9)降低及划痕愈合能力(0.34±0.06 vs 0.59±0.04)减弱(P<0.01)。第叁部分MMP-9在TGF-β1诱导食管鳞癌EMT中的作用及对其侵袭迁移的影响目的:探讨MMP-9在TGF-β1介导食管鳞癌EMT中的作用及对其侵袭迁移的影响。方法:1.TGF-β1(10ng/ml)处理食管鳞癌EC-1细胞不同时间(0 h,24 h,48 h),于倒置显微镜观察细胞形态学改变;采用Real-time PCR、Western blot及细胞免疫荧光方法检测E-cadherin和Vimentin mRNA及蛋白的表达变化。2.广谱MMP抑制剂GM6001处理食管鳞癌EC-1细胞后,于倒置显微镜观察细胞形态学改变;采用Real-time PCR、Western blot及细胞免疫荧光方法检测E-cadherin和Vimentin mRNA及蛋白的表达变化。3.采用Real-time PCR,荧光素酶报告实验,明胶酶谱实验及Western blot,检测TGF-β1处理食管鳞癌EC-1细胞后MMP-9 mRNA及蛋白的表达变化。4.利用shRNA干扰MMP-9的表达,然后用TGF-β1刺激细胞48h后,采用Real-time PCR和Western blot检测E-cadherin和Vimentin mRNA及蛋白的表达变化,侵袭小室实验及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。结果:1.TGF-β1诱导食管鳞癌EMT:与空白组(0h)相比,TGF-β1刺激后细胞形态发生明显变化,由典型的鹅卵石样上皮细胞形态向长梭形或纺锤型间质细胞形态转变,刺激48h时最为显着。Real-time PCR和Western blot结果显示,与空白组(0h)相比,TGF-β1刺激后E-cadherin mRNA[24h组(0.65±0.04 vs1.00±0.00)、48h组(0.46±0.08 vs 1.00±0.00)]及蛋白[24h组(0.51±0.03 vs 0.67±0.06)、48h组(0.39±0.06 vs 0.67±0.06)]的表达明显降低(P<0.01),Vimentin mRNA[24h组(1.27±0.12 vs 1.00±0.00)、48h组(1.40±0.07 vs 1.00±0.00),均P<0.01]及蛋白[24h组(0.65±0.07 vs 0.53±0.06),P<0.05、48h组(0.73±0.06 vs 0.53±0.05),P<0.01]的表达明显增加。细胞免疫荧光结果和Western blot结果相一致。2.GM6001抑制TGF-β1诱导食管鳞癌EMT:于倒置显微镜下观察细胞形态,结果显示:与TGF-β1组相比,TGF-β1+GM6001组中部分细胞由原来的长梭形或纺锤形间充质细胞形态向上皮细胞形态转变。Real-time PCR和Western blot结果显示,与TGF-β1组相比,TGF-β1+GM6001组中E-cadherin mRNA(0.62±0.04vs 0.44±0.07)及蛋白(0.55±0.03 vs 0.44±0.06)的表达水平升高(P<0.05),而Vimentin mRNA[(1.22±0.03 vs 1.42±0.07),P<0.05]及蛋白[(0.71±0.03 vs0.82±0.05),P<0.01]的表达水平降低,差异均有统计学意义。细胞免疫荧光结果和Western blot结果相一致。3.TGF-β1促进MMP-9表达上调:明胶酶谱实验结果显示:与空白组相比,TGF-β1组细胞MMP-9活性明显增高,GM6001组细胞MMP-9活性明显降低;与TGF-β1组相比,TGF-β1+GM6001组中MMP-9活性降低。Real-time PCR结果显示,与对照组(0h)相比,TGF-β1处理组中MMP-9 mRNA[24h组(1.25±0.10vs 1.00±0.00)、48h组(1.42±0.07 vs 1.00±0.00)]的表达水平升高,且具有时间依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)。荧光素酶报告实验结果显示,在转染内参质粒pGL3-Basic的实验中,空白组和TGF-β1组中MMP-9荧光素酶活性表达均无显着性差异(P>0.05)。在转染重组质粒pGL3-MMP-9的实验中,与空白组相比,TGF-β1组中MMP-9的活性(17.26±3.69 vs 36.06±5.27)显着上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组(0h)相比,TGF-β1处理组中MMP-9蛋白[24h组(0.64±0.08 vs 0.52±0.04),P<0.05、48h组(0.77±0.08vs 0.52±0.04),P<0.01]的表达水平升高,且具有时间依赖性,差异有统计学意义。4.MMP-9表达下调抑制TGF-β1诱导食管鳞癌细胞EMT及细胞侵袭和迁移能力:Real-time PCR和Western blot结果显示,与空白组相比,MMP-9 shRNA组中MMP-9 mRNA(0.42±0.05vs 1.00±0.00)及蛋白(0.31±0.04vs 0.57±0.06)的表达水平显着下调(P<0.01),E-cadherin mRNA(1.53±0.08 vs 1.00±0.00)及蛋白(0.80±0.05vs 0.67±0.06)的表达水平显着上调(P<0.01),Vimentin mRNA(0.57±0.08vs 1.00±0.00)及蛋白(0.37±0.05 vs 0.53±0.08)的表达水平显着下调(P<0.01);与TGF-β1组相比,MMP-9 shRNA+TGF-β1组中E-cadherin mRNA[(0.71±0.06vs 0.46±0.08),P<0.01]及蛋白[(0.58±0.05vs 0.45±0.06),P<0.05]的表达水平升高,Vimentin mRNA(0.70±0.04vs 1.40±0.07)及蛋白(0.42±0.04vs 0.82±0.03)的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。此外,细胞侵袭和划痕实验结果显示,与空白组相比,MMP-9 shRNA组中穿膜细胞数(27±4 vs 69±5)显着降低,细胞划痕愈合能力(0.26±0.07vs 0.46±0.08)显着减弱,差异均有统计学意义(P<0.05);与TGF-β1组相比,MMP-9 shRNA+TGF-β1组中穿膜细胞数(58±6 vs 119±7)降低及划痕愈合能力(0.36±0.04vs 0.64±0.06)减弱(P<0.01)。第四部分MMP-9阻断对裸鼠食管鳞癌移植瘤生长及EMT的影响目的:研究MMP-9 shRNA在体内对食管鳞癌EMT的影响。方法:1.建立EC-1食管鳞癌裸鼠移植瘤模型,将MMP-9 shRNA转染组、阴性对照组(转染无义序列)细胞及空白组EC-1细胞分别注入裸鼠右前肢腋背部皮下,观察移植瘤的形成及生长状况并绘制生长曲线。2.实验结束后,取瘤称重,测量体积并拍照。3.HE染色观察食管鳞癌移植瘤组织学形态;采用Real-time PCR及免疫组织化学方法检测不同组别移植瘤MMP-9、Snail、E-cadherin、Vimentin mRNA和蛋白的表达。结果:1.成功建立了裸鼠食管鳞癌移植瘤模型。2.实验结束时,与阴性对照组和空白组相比,MMP-9 shRNA组中移植瘤体积(mm~3)(624.69±136.85 vs1118.19±254.85vs 1280.74±371.78)和重量(g)(0.58±0.13 vs0.94±0.17vs1.04±0.20)明显减少(P<0.05)。3.与阴性对照组和空白组相比,MMP-9 shRNA组中MMP-9 mRNA(0.48±0.06 vs 0.92±0.05 vs 1.00±0.00)及蛋白(82±7 vs 114±6 vs 125±9)明显降低(P<0.01)。Snail mRNA(0.60±0.10 vs 0.96±0.05 vs 1.00±0.00,P<0.05)及蛋白(87±8 vs124±4 vs 132±10,P<0.01)明显降低。E-cadherin mRNA(1.48±0.08vs 0.94±0.08 vs 1.00±0.00,P<0.01)及蛋白(134±12 vs 91±32 vs 87±12,P<0.05)表达明显上调,Vimentin mRNA(0.70±0.06 vs 0.95±0.03 vs 1.00±0.00,P<0.01)及蛋白(68±6 vs 102±44 vs 122±8,P<0.05)明显下调。结论1.MMP-9在食管鳞癌组织中的高表达状态与Snail、TGF-β1呈正相关性,与E-cadherin呈负相关性,提示叁者在促进食管鳞癌EMT中具有协同作用。2.MMP-9参与食管鳞癌的EMT,且可通过EMT途径促进食管鳞癌侵袭和迁移。3.MMP-9通过调控Snail影响食管鳞癌EMT进程及侵袭转移。4.MMP-9介导的食管鳞癌EMT受到TGF-β1的调控。5.MMP-9 shRNA能有效抑制MMP-9的活性可下调Snail的表达并抑制食管鳞癌移植瘤EMT的发生。
孟粹达[6]2007年在《基质金属蛋白酶在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义》文中提出目的研究基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)和基质金属蛋白酶-14(matrix metalloproteinase-14,MMP-14)在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨两者与喉癌的发生发展、侵袭转移的关系及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测60例喉鳞癌患者的60个原发灶,34例癌旁组织,22例正常粘膜标本中MMP-7和MMP-14的表达,并统计分析两者在喉鳞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系,以及两者的相关性。结果①MMP-7在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中的阳性表达率分别为86.7%,41.1%,27.3%;强阳性表达率分别为63.3%,11.8%,0%。叁组间两两比较,喉癌组织与癌旁组织、正常粘膜差异有统计学意义(P<0.01)。癌旁组织与正常粘膜差异无统计学意义(P>0.05)。②MMP-14在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中的阳性表达率分别为80.0%,29.4%,22.7%;强阳性表达率分别为48.3%,8.8%,4.6%。叁组间两两比较,喉癌组织与癌旁组织、正常粘膜差异有统计学意义(P<0.01)。癌旁组织与正常粘膜差异无统计学意义(P>0.05)。③MMP-7/MMP-14强阳性表达与颈部淋巴结转移情况、临床分期及组织病理学分级差异有统计学意义(P<0.05)。④MMP-7/MMP-14在喉癌组织中的阳性率呈显着正相关(r=0.969,P<0.O5)。结论1.MMP-7/MMP-14蛋白在正常粘膜组织和癌旁组织表达率较低,但在喉鳞癌组织中表达率明显增高,提示MMP-7/MMP-14的高表达与喉鳞癌的发病有关。2.MMP-7/MMP-14蛋白强阳性表达与颈部淋巴结转移、临床分期及组织病理学分级差异有统计学意义,提示MMP-7/MMP-14的高表达与喉鳞癌的浸润转移相关。3.MMP-7/MMP-14两者在喉癌组织中的阳性率呈显着正相关,两者联合检测对喉癌的临床治疗和预后判断具有临床意义。
王晓兰[7]2009年在《67LR、MMP-7和TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达及其意义》文中研究指明背景与目的:恶性肿瘤的浸润、转移是多种因素参与和调节的复杂过程,可能涉及了肿瘤细胞的侵袭力、粘附力及与间质的相互作用等。67 kD层粘连蛋白受体(67kDlaminin receptor,67LR)是层粘连蛋白的一个非整合素受体,是一种多功能蛋白,既参与核糖体的组装成熟过程,又参与细胞的信号转导,还可作为多种病毒的细胞膜受体。它可以和层粘连蛋白相互作用,调节肿瘤的增殖、粘附、微血管形成和加速细胞外基质的降解,促进肿瘤的侵袭、转移。67LR在多种肿瘤组织中表达升高。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类锌离子依赖性蛋白酶家族,在体内主要起降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的作用,包括间质胶原酶、间质溶素、明胶酶等。MMP-7是基质金属蛋白酶家族中分子量最小的一员,能激活家族中其他成员,并对ECM有广谱降解作用。它常表达于肿瘤细胞,在肿瘤的发生发展中起着重要作用,与许多肿瘤的浸润、转移关系密切。基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)是MMPs的特异性抑制剂。在所有的TIMPs中,TIMP-1作用最强,作为MMP-7的天然抑制物,可与其形成稳定复合体,抑制其活性,并对ECM的降解过程起负性调控作用,从而抑制肿瘤细胞的浸润转移。此外,TIMP-1还可作为一种生长因子,促进肿瘤细胞的生长增殖和转移。食管癌是世界上发病率较高的一种恶性肿瘤,尤其在东亚国家如中国和日本较多见,其术后5年生存率仅为20%～36%。浸润、转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,同时也是导致食管癌患者死亡的关键因素,因此探讨食管癌浸润与转移机制已成为当前研究的热点之一。有关联合检测67LR、MMP-7及TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达及意义的研究,国内外文献未见报道。为进一步阐明食管鳞癌的浸润、转移机制,并寻找抑制食管鳞癌浸润、转移的有效途径,本研究采用免疫组化SP法,分别观察了56例食管鳞癌组织、26例癌旁非典型增生组织及23例正常食管粘膜上皮组织中67LR、MMP-7及TIMP-1蛋白的表达情况,探讨联合检测上述3项指标在食管鳞癌浸润、转移过程中的意义,为防治食管鳞癌的浸润、转移提供理论依据。方法1.运用免疫组化法分别检测56例食管鳞癌组织、26例癌旁非典型增生组织及23例正常食管粘膜上皮组织中67LR、MMP-7及TIMP-1蛋白的表达。2.统计学处理:所有数据均经SPSS13.0软件进行统计分析。阳性率之间的比较采用χ~2检验(chi-square);两变量之间的关系分析采用相关分析。显着性水准α=0.05。结果1.正常食管粘膜上皮组织、癌旁非典型组织和癌组织中,67LR蛋白阳性表达率依次增高,分别为13.04%(3/23)、53.85%(14/26)和67.86%(38/56),组间相比,癌组与正常组之间差异有显着性(P＜0.01),非典型增生组与正常组差异有显着性(P＜0.01);MMP-7蛋白阳性表达率分别为34.78%(8/23)、76.92%(20/26)和73.21%(41/56),组间相比,癌组与正常组差异有显着性(P＜0.01),非典型增生组与正常组之间差异有显着性(P＜0.01);TIMP-1蛋白阳性表达率依次增高,分别为0%(0/23)、19.23%(5/26)和42.86%(24/56),组间相比,差异均有显着性(P＜0.05)。2.侵及粘膜下、浅肌层、深肌层和外膜的食管鳞癌组织中,67LR蛋白阳性表达率分别为66.67%(2/3)、80.00%(12/15)、50.00%(10/20)和77.78%(14/18),组间相比,差异均无统计学意义(P＞.05);MMP-7蛋白阳性表达率依次增高,分别为33.33%(1/3)、46.67%(7/15)、85.00%(17/20)和88.89%(16/18),组间相比,粘膜下组与深肌层组、外膜组,浅肌层组与深肌层组、外膜组,差异有统计学意义(P＜0.05);TIMP-1蛋白阳性表达率依次降低,分别为66.67%(2/3)、60.00%(9/15)、55.00%(11/20)和11.11%(2/18),侵及外膜的食管鳞癌组织TIMP-1蛋白阳性表达率明显低于粘膜下组、浅肌层组、深肌层组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。3.26例伴有淋巴结转移和30例无淋巴结转移的食管鳞癌组织中,67LR蛋白阳性表达率分别为84.62%(22/26)和53.33%(16/30),两组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);MMP-7蛋白阳性表达率为92.31%(24/26)和56.67%(17/30),两组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);TIMP-1蛋白阳性表达率为23.08%(6/26)和60.00%(18/30),两组相比,差异有统计学意义(P＜0.01)。4.67LR、MMP-7及TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达相关性,经统计学分析显示:67LR蛋白的表达与MMP-7呈正相关、与TIMP-1呈负相关(P＜0.05);MMP-7在食管鳞癌中的表达与TIMP-1无相关性(P＞0.05)。结论1.67LR、MMP-7、TIMP-1蛋白异常表达可能参与食管鳞癌的发生发展过程。2.MMP-7、TIMP-1蛋白异常表达与食管鳞癌浸润有关,而67LR蛋白异常表达与食管鳞癌浸润无关。3.67LR、MMP-7、TIMP-1蛋白异常表达与食管鳞癌淋巴结转移有关。4.67LR的表达与MMP-7呈正相关、与TIMP-1呈负相关;MMP-7的表达与TIMP-1无相关性,表明67LR、MMP-7、TIMP-1在食管鳞癌的发生发展及浸润、转移过程中可能起协同作用。
朱小峰[8]2004年在《紫杉醇抑制人腺样囊性癌细胞肺转移的实验研究》文中提出[目的] 观察紫杉醇对人高转移性涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-M)在裸鼠体内肺转移的抑制作用,并进一步研究转移灶肿瘤组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达,以初步探讨其抗转移机制。[方法] 22只裸鼠,尾静脉注射接种ACC-M细胞建立实验性肺转移模型后,随机分为给药组和对照组。给药组于接种肿瘤细胞后第二天起给予紫杉醇,10mg/kg/只,腹腔给药,每叁天一次,共10次;对照组同期腹腔注射等量溶剂。接种6周后处死实验动物。观察发生肿瘤肺转移的裸鼠数目,称量体重;解剖出裸鼠肺脏,电子天平称重;记录肺转移灶数目。采用免疫组化SP法,检测ACC-M肺转移灶肿瘤细胞中MMP-2,MMP-9及TIMP-1的表达。[结果] 对照组和紫杉醇治疗组相比,肺转移率分别为100%和54.54%,肺转移结节数分别为28.6410.69和15.174.83,转移肺湿重分别为0.7020.044g,用药组0.5240.046g,均有显着性差异 (P<0.05)。与对照组比较,紫杉醇治疗组的肺转移灶中MMP-2和MMP-9的表达显着降低,而TIMP-1的表达明显增强。[结论] 紫杉醇具有抑制ACC-M细胞肺转移作用。其抑制ACC-M细胞<WP=4>对Ⅳ型胶原酶(MMP-2、MMP-9)的表达,并上调组织抑制物TIMP-1的表达,降低细胞浸润并穿过细胞外基质,抑制肿瘤血管生成,是其抗ACC-M裸鼠肺转移的可能机制。
杨喜云[9]2008年在《水红花子抑制基质金属蛋白酶治疗肿瘤的实验研究》文中认为恶性肿瘤是严重威胁人类健康的一类常见疾病,肿瘤细胞的侵袭与转移是恶性肿瘤的主要特征,也是导致肿瘤患者死亡的主要原因,而肿瘤的侵袭与转移和基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMPs)密切相关。在肿瘤的治疗方面,传统中药已经成为抗肿瘤的重要手段。目前,很多单味中药应用于防治及治疗肿瘤的研究已深入开展。实验目的:通过观察中药水红花子提取物浓度梯度的变化对MMPs抑制作用强弱的变化,探讨中药水红花子提取物对MMPs的抑制作用,并间接证实对肿瘤特别是肝癌治疗的作用机制。实验原理与方法:根据MMPs降解荧光底物而发出荧光的原理,以MMPs为药物的作用靶点,通过酶学方法检测中药对MMPs的抑制作用。实验分两部分,第一部分根据层析原理提纯水红花子,配制不同浓度的水溶液;第二部分应用荧光底物法检测,并且观察随着提取物浓度梯度的变化对MMPs抑制作用强弱的变化。实验结果:中药水红花子提取物对MMP 16有明显的抑制作用,提取物随浓度梯度的变化与对MMPs抑制强度成正比。所以,水红花子治疗肿瘤的药理作用机制可能是水红花子对MMPs的抑制有关。中药抗肿瘤具有多靶点、多环节、多效应的特点,中药是开发抗肿瘤新药不可忽视的部分,成为研究抗肿瘤药物的重点。
孙晓宏[10]2013年在《MMP-2、9和TIMP-1、2在食管鳞状细胞癌中的表达及其与HPV16E6、E7和E6/E7之间相互关系的研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨MMP-2、9和TIMP-1、2mRNA在食管鳞状细胞癌及对应癌旁组织中的表达差异及其相关性,探讨MMP-2、9和TIMP-1、2mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达是否存在名族差异,探讨HPV16E6、E7及E6/E7与MMP-2、9和TIMP-1、2mRNA表达之间是否存在调控关系以及HDAC是否参与了MMP-2、9和TIMP-1、2mRNA的表达调控。方法：选取新鲜手术切除的食管癌标本100例,每例分别取癌组织和对应的癌旁组织各一份,分为癌组织组和癌旁组织组,采用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测MMP-2、9和TIMP-1、2mRNA在癌组织组及其对应癌旁组织组中的表达：随机选取部分标本行Western-blot检测,验证这4种基因在蛋白水平的表达是否与转录水平一致；构建HPV16E6真核表达载体、HPV16E7真核表达载体及HPV16E6/E7融合基因真核表达载体,运用瞬时转染技术将上述叁种真核表达载体分别转染到HPV16阴性的食管癌细胞株KYSE450中,然后通过RT-PCR法分别检测转染后食管癌细胞株KYSE450中MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA及TIMP-2mRNA的表达情况；通过向KYSE450细胞培养基中加入HDAC抑制剂TSA,然后通过RT-PCR法分别检测加TSA后食管癌细胞株KYSE450中MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA及TIMP-2mRNA的表达情况。结果：MMP-2、9mRNA和TIMP-1、2mRNA在食管癌组织中的表达高于相应正常组织中的表达；MMP-2、9mRNA和TIMP-1、2mRNA在汉族食管癌组织中的表达高于其在哈族食管癌组织中的表达；MMP-2、9mRNA和TIMP-1、2mRNA在浸润深度为T3+T4的癌组织中的表达高于其在浸润深度为T1+T2的癌组织中的表达；MMP-2、9mRNA和TIMP-1、2mRNA在有无淋巴结转移的癌组织中的表达差别无统计学意义；MMP-2、9mRNA和TIMP-1、2mRNA在不同性别、不同年龄、不同分化程度之间的表达差别均无统计学意义；MMP-2mRNA与MMP-9mRNA之间呈正相关,而与与TIMP-1mRNA和TIMP-2mRNA之间均无相关性：MMP-9mRNA与TIMP-1mRNA和TIMP-2mRNA之间均呈正相关；TIMP-1mRNA口TIMP-2mRNA之间呈正相关；MMP-2mRNA在各pEGFP-N1转染组中的表达均极低,且无统计学差异,MMP-9mRNA在空白对照组和pEGFP-N1转染组中均有表达,且表达量相对较高,但在pEGFP-N1-E6转染组、pEGFP-N1-E7转染组及pEGFP-N1-E6/E7转染组中表达均极低,E6组、E7组及E6/E7组与阴性对照组之间均存在差异；TIMP-1mRNA在pEGFP-N1-E6转染组中表达与阴性对照组之间无差异,在pEGFP-N1-E7转染组中的表达显着降低,与阴性对照组之间差异有差异；在pEGFP-N1-E6/E7转染组中的表达也增高,与阴性对照组之间有差异；TIMP-2mRNA在pEGFP-N1-E6转染组中表达增高,与阴性对照组之间有差异；在pEGFP-N1-E7转染组中的表达降低,与阴性对照组之间无差异；在pEGFP-N1-E6/E7转染组中的表达增高,与阴性对照组之间有差异。MMP-2mRNA在TSA实验组中的平均表达量与对照组相比无差异,MMP-9mRNA在TSA实验组中的平均表达量与对照组相比无差异,TIMP-1mRNA在TSA实验组中的平均表达量与对照组相比无差异,TIMP-2mRNA在TSA实验组中的平均表达量与对照组相比有差别,差异有统计学意义。结论：MMP-2、9和TIMP-1、2在食管癌组织中的表达高于相应正常组织中的表达,说明它们可能参与了食管鳞状细胞癌的发生及进展；MMP-2、9和TIMP-1、2的表达可能与食管鳞状细胞癌浸润有关,但可能与淋巴结转移无关,与患者年龄、性别及肿瘤分化程度均无关；MMP-2、9和TIMP-1、2在食管鳞状细胞癌中的表达可能存在名族差异；MMP-2mRNA与MMP-9mRNA在食管癌中的表达呈正相关关系,MMP-2mRNA与TIMP-1mRNA和TIMP-2mRNA在食管癌中的表达之间均无相关性；MMP-9mRNA与TIMP-1mRNA和TIMP-2mRNA在食管癌中的表达之间均呈正相关；TIMP-1mRNA口TIMP-2mRNA在食管癌中的表达呈正相关关系：本研究成功构建了HVP16-E6、HPV16-E7基因及HPV16-E6/E7融合基因的真核表达载体,并成功转染了食管癌KYSE450细胞；HPV16E6和HPV16E7基因与MMP-2的表达可能不存在调控关系,可能对MMP-9的表达起抑制作用；HPV16E6/E7的协同作用可能对TIMP-1和TIMP-2的表达起促进作用；HDAC可能与TIMP-2的表达之间存在调控关系；与MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达之间可能不存在调控关系。
参考文献：
[1]. 喉癌侵袭、转移与Ⅳ型胶原、胶原酶及TIMP-1的相关性研究[D]. 曹晓林. 中国医科大学. 2002
[2]. MMP2和TIMP1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义[D]. 严永峰. 延边大学. 2009
[3]. CD44、TIMP-1、β-catenin在子宫颈癌中的表达及其临床意义研究[D]. 吴成勇. 新疆医科大学. 2008
[4]. MMP-1、MMP-13和TIMP-4在喉癌中的表达及其意义[D]. 李薇. 中南大学. 2008
[5]. MMP-9在食管鳞癌上皮间质转化中的作用及机制研究[D]. 白雪. 郑州大学. 2017
[6]. 基质金属蛋白酶在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义[D]. 孟粹达. 吉林大学. 2007
[7]. 67LR、MMP-7和TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达及其意义[D]. 王晓兰. 郑州大学. 2009
[8]. 紫杉醇抑制人腺样囊性癌细胞肺转移的实验研究[D]. 朱小峰. 福建医科大学. 2004
[9]. 水红花子抑制基质金属蛋白酶治疗肿瘤的实验研究[D]. 杨喜云. 吉林大学. 2008
[10]. MMP-2、9和TIMP-1、2在食管鳞状细胞癌中的表达及其与HPV16E6、E7和E6/E7之间相互关系的研究[D]. 孙晓宏. 新疆医科大学. 2013