湖南省株洲市二医院（株洲市肿瘤医院）病理科 412005
摘要：目的：分析淋巴结病理组织免疫组化技术与其标准化操作的方法。方法：选取我院2016年10月-2017年10月间收治的96例患淋巴结的患者临床资料，随机分成对照组（n=48）和观察组（n=48）。观察组患者通过标准化的淋巴结组织采取苏木精-伊红染色片穿刺的免疫运用于组织化学上的染色，对照组患者未行苏木精-伊红染色片穿刺，比较各组免疫组化的染色切片上相关请况。结果：观察组切片的优良率为97.92%，明显高于对照组切片优良率（54.17%），P<0.05对比差异存在明显。结论：通过病理组织运用免疫组化穿刺技术，可明显地提高染色切片整体优良效果，提供更可靠的诊断参考，该方法值得在临床上进行广泛应用。
关键词：免疫组化技术；淋巴结病理组织；标准化操作
医学上免疫组化技术（immunocytochemistry）是利用免疫学抗体-抗原原理，联合组织化学相关技术，对组织切片通过运用化学物质进行成分的定位、定量的研究技术方法[1]。为了有效分析、探讨淋巴结病理组织运用免疫组化技术以及相关的标准操作方法，针对我院2016年10月-2017年10月间收治的96例淋巴结患者临床资料展开分析探讨，现总结如下[2]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
对我院2016年10月-2017年10月间收治的96例的淋巴结患者的相关临床资料随机分成对照组（n=48）和观察组（n=48）。收治的96例患者中，男女比例49：47例，其中观察组的男女比例为25：23，对照组为24：24；年龄结构在21~80岁之间，平均年龄为45.2±4.3岁，其中观察组46.3±4.6，对照组44.5±4.2。患者淋巴结的部位：颈部37例（观察组19例，对照组18例）、锁骨下位30例（观察组15例，对照组15例）、腹膜后位29例（观察组14例，对照组15例）。两组患者的一般资料不存在明显差异（P>0.05）。研究对象及其家属均知情同意参与本次研究，并签署知情同意书。患者一般资料对比见表1，2。
1.2 方法
观察组的患者行免疫组化染色及标准化淋巴结组织苏木精-伊红染色片穿刺，对照组的患者不给予该操作[3]。标准化淋巴结组织苏木精-伊红染色片制作及免疫组化技术具体操作如下[4]。①标准化的淋巴结组织苏木精-伊红染色片。取材时淋巴结组织厚度应控制在1.7-2.0mm。组织离体后，浸在浓度4%的偏中性甲醛，并固定染色片。标本如果出现多穿刺组织的情况，用过滤纸虑过每条穿刺组织，保证包埋程序进行时，组织水平位相同。染色切片厚度一般不超过2.5μm，每张制作完成的蜡片分切7小片，对其中一张行苏木精-伊红染色，完成制片后涂于载玻片，做好免疫组化技术前提准备。②免疫组化技术。切片置于水中，取浓度3%甲醇溶液进行脱蜡作用，实验过程维持实验室温度。一段时间后用蒸馏水对切片进行清洗。同时取pH值为6.0的标准柠檬酸溶液1000mL，将切片置于装有标准柠檬酸溶液的高压锅中加热2min后自然冷却。取出后用磷酸盐平衡生理盐水（PBS）进行切片冲洗，每次冲洗持续2min，行2次冲洗。后进行二抗添加，直到在DAB出现显色即可停止，之后比较抗体的阴阳性[5]。
1.3 指标标准
染色切片的优良率评定的相关标准：抗体的阳性可以准确定位，淋巴组织的结构不受变形、破坏，背景干净清晰，无脱色现象，敏感、特异性较高[6-7]。
1.4 统计学方法
采用SPSS16.0对实验数据进行分析整合，以百分比记录患者淋巴组织染色切片的优良率，P<0.05表示具有统计学上的差异。
2 结果
2组患者染色切片的优良率对比
观察组患者其淋巴组织的免疫组化染色切片优良率（97.92%）明显高于对照组（54.17%），组间存在明显差异（P<0.05），对比见表3。
3讨论
本次研究中，观察组患者淋巴组织免疫组化染色切片（优良切片47例，优良率97.92%）明显高于对照组（优良切片26例，优良率54.17%），P<0.05组间的对比存在明显差异。实验证明行免疫组化染色及标准化淋巴结组织苏木精-伊红染色片（HE片）的穿刺对于提高切片的优良率有极大的帮助，是有效的、较为标准的操作方法；而不行标准化淋巴组织是苏木精-伊红染色片（HE片）的穿刺则切片的优良率难以得到保障。
近几年医疗上的免疫组化技术相比以前已经有了较大的发展，技术上具有很大的进步，制作切片的敏感、特异性都比较高。因此其应用也越来越广泛，回顾以往免疫组化技术，一般的抗体稀释程度最多只能达到几十倍稀释，其低敏感度对于医疗上的应用性不高，但而今医疗技术水平的长足提高，免疫组化技术中的抗体稀释甚至可达到万倍以上，高稀释度赋予的高敏感、高特异性使其在医疗上的作用日益凸显。在高标准的技术需求中，各医疗单位对于该免疫组化技术上海缺乏较为统一的标准。因此，对于有一个明确、统一的标准是这门技术的进步和完善所需要的迫切要求。一套标准化的操作方法对于免疫组化技术的切片优良率的提升有着极大的作用。对于抗原的修复，以往是采用微波加热进行修复，修复效果不明显，在观察组的标准化操作中，运用的高压加热方法可以进行很好的修复，从而使染色的最终效果得到保障。
结语
综上述，只有在标准化的操作，才能使淋巴结病理组织免疫组化技术得到保障与提高，从而使染色切片的作用得到更充分的发挥，以便于医护人员更好的了解患者的内在病情，从而实现免疫组化技术的临床应用。通过淋巴病理组织上运用免标准化的疫组化技术，可以明显使染色切片优良率得到保障与提高，该标准化操作方法值得临床上的推广与应用。
参考文献：
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[2]张睿，朱正鹏，马健波等.淋巴结免疫组化制片技术体会[J].临床与实验病理学杂志，2015，4（2）：220-221
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论文作者:谭云艳
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第8期
论文发表时间:2018/5/28
标签：免疫论文; 切片论文; 淋巴结论文; 组织论文; 苏木论文; 技术论文; 病理论文; 《中国误诊学杂志》2018年第8期论文;