曹小春陈艳王利华
（四川省江油市人民医院四川江油621700）
【摘要】 目的：我们的实验室如何去规范操作酶联免疫检测，是我们实验室应该做的一件大事，不认真对待灰区的出现，就会引发和滋生错误的报告发生。灰区应该有一个可操作性“规定”，在没有一个统一规定的情况下，实验室就无法做好工作。方法：通过165296例酶联免疫检测，总结出来灰区出现如何处理的路子-方法。结果：根据总结的方法完成制度管理和SOP文件，按照执行这些方法和文件，让我们在灰区出现时能够正确处理，近两年来，我们按照科室制定的制度执行操作，没有在灰区的问题上出现误差和失误。
【关键词】灰区；免疫；复检
【中图分类号】R446【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）14-0354-02
酶联免疫检测，这个定性试验，经过多年的实验室应用，为检验事业的发展、为免疫性疾病患者解决了不可磨灭的功劳，也为医务工作者争得了名誉。但对于检验工作者，也带来了一些不好解决的难题—灰区[1] [2] [3]问题；酶联免疫检测结果报告，按照相关规定，只能出具阴性或者阳性报告，模棱两可的报告确实难倒了检验工作者。用ELISA方法检测的各种免疫试验，如乙肝两对半、丙型肝炎、艾滋病、丁肝、戊肝、ANA、甲肝等，都存在着灰区的问题，我们如何在工作上，对这个问题进行分析处理，我们做了这方面的研究分析。
1.对象与方法
1.1 研究对象
选择2012年至2014年，两年在我院的乙肝表面抗原58997例、丙型肝炎抗体检测49234例、艾滋病抗体检测49076例、丁型肝炎抗体581例、戊型肝炎抗体检测669例、甲型肝炎抗体检测4112例，ANA2597人次，检测样本共计165296例。
1.2 方法
其中乙肝两对半是用达安的时间分辨检测的，灰区相对要少些；ANA采用欧蒙酶联免疫检测试剂盒；其他项目全部采用北京万泰的酶联免疫检测试剂盒。
2.结果
通过两年的检测，共检测出灰区169例，其中乙型肝炎表面抗原39例，采用的是时间分辨检测，检测灰区值最高0.58，最低0.43。下面的项目采用的酶联免疫检测；HIV17例，丙型肝炎抗体测定15例，丁肝2例，戊肝6例，甲肝11例，ANA79例；检测的SCO值最高1.1453，最低0.8571。
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3.讨论
3.1 酶联免疫法和时间分辨荧光分析法都存在灰区，灰区如何处置，我们通过检测数据；把乙型肝炎表面抗原设定为0.425～0.575ng/L为灰区，乙肝表面抗原灰区的结果应检测其HBe抗体和HBc抗体，特别是后者，如果HBc抗体是阴性的，则HBsAg的阳性基本不太可能，可以发阴性报告；如是阳性，则：将标本10000g，10min离心，然后复检[4] [5]（如果离心机没有g的标注，用10000转/min的高速离心也可达到这个目的）。如果高速离心后复检为阴性，应报告阴性结果，若仍为弱阳性：应换用另一款比较公认的试剂，比如雅培Architect的化学发光法试剂，重新检测；如果没有这样的进口试剂，用其他厂家的HBsAg检测一下，如果是阴性，可发阴性报告，如果也是阳性，则需要慎重对待，可以进行血清HBV PCR检测，当然PCR阳性的话基本就可以发送HBsAg阳性报告，而PCR阴性也不能排除HBsAg阳性可能。所以，最后这种情形下确认HBsAg确实比较复杂。总之，乙肝的诊断是一个很考验临床知识的项目，要综合考虑，不可过于匠气，给患者带来不必要的负担。.
3.2 其他的酶联免疫法设定为S/CO在0.85～1.15之间为灰区，在灰区内的检测数据进行复查，根据复查结果进行判断，如果复查仍然在灰区，担心标本污染；为了严谨，保证结果质量，体现全面质量管理的理念。写上S/CO值，告诉临床医生一定要注意该病人了；模板：“该标本检测结果为弱阳性，S/CO=*.**，建议结合临床情况诊断或选择其他方法做确认试验。”不同项目也有不同的描述，如果是有诊断意义的指标，备注后面可以说明定期复查，建议一个月后复查之类的。 门诊患者，一是向患者说明，重抽标本复查。二是，如果患者不愿意重新采血复查，应在检验报告单上说明三个月后或定期复查。
3.3 科室根据ISO15189 [6]的有关规定，制定了SOP文件，写清楚了3.1的内容和复查操作规定。
综上所述，按照执行这些方法和文件，让我们在灰区出现时能够正确处理；近两年来，我们按照科室制定的制度执行操作，没有在灰区的问题上出现误差和失误。
【参考文献】
[1] Kearney H, Schneider T, Yiannakas MC, Altmann DR,Wheeler-Kingshott CA, Ciccarelli O, Miller DH.J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2014 Aug 5. pii: jnnp-2014-308241. doi: 10.1136/jnnp-2014-308241.
[2] Riera R, Becerro MA, Stuart-Smith RD, Delgado JD, Edgar GJ.Mar Pollut Bull. 2014 Aug 1. pii: S0025-326X(14)00450-0. doi: 10.1016/j.marpolbul.2014.07.014.
[3] Castellano G, Manzano ML.Gastroenterol Hepatol. 2014 Jul;37 Suppl 2:15-21. doi: 10.1016/S0210-5705(14)70064-0. Spanish.
[4] Leucht S, Helfer B, Hartung B.Cochrane Database Syst Rev. 2014 Jan 15;1:CD002832. doi: 10.1002/14651858.CD002832.pub3. Review.
[5] Hao Q, Shi X, Zhang X, Zhu J.Zhongguo Yi Liao Qi Xie Za Zhi. 2013 Sep;37(5):373-5, 378. Chinese.
论文作者:曹小春陈艳王利华
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第14期供稿
论文发表时间:2015/8/5
标签：免疫论文; 抗体论文; 阴性论文; 阳性论文; 方法论文; 报告论文; 乙肝论文; 《医药前沿》2015年第14期供稿论文;