田源1,2 刘建国2 王斯玮1,2 白国辉2,3 管晓燕1,2 苗晨琛1,2
（1遵义医学院附属口腔医院 贵州 遵义 563000）
（2贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室 贵州 遵义 563000）
（3遵义医学院医学与生物学研究中心 贵州 遵义 563000）
【摘要】 目的：观察新型漱口液对变异链球菌（S.mutans）和牙龈卟啉单胞菌（P.g）两种口腔常见致病菌的抑菌效果。方法：以不同浓度配比的茶多酚和绿原酸为主要成分，添加甘草酸及薄荷油研制一种新型健康的漱口液，通过测定其对于两种口腔常见致病菌的抑菌环直径，观察其抑菌作用。结果：用茶多酚浓度为0.0625 mg/ml，绿原酸浓度为6.25 mg/ml配制成的漱口液对S.mutans的抑菌环直径为14.8±0.3mm，对P.g的抑菌环直径为12.9±0.3mm，与阳性对照比较均无统计学差异（P>0.05）。结论：本课题组研制的新型漱口液对S.mutans和P.g两种口腔常见致病菌具有良好的抑菌效果。
【关键词】 漱口液；牙龈卟啉单胞菌；变异链球菌；抑菌效果
【中图分类号】R78 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）18-0129-02
医学研究证明，寄生于口腔中的各种细菌、真菌和病毒是导致人们发生龋病、牙周病的始动因素[1]。采用漱口液是一种口腔临床常用的预防保健措施，是一种有效预防和控制口腔疾病发生的重要手段，目前文献报道的口腔清洁剂多为化学剂或中西药混合配方剂[2]，毒副作用较多，也不宜长期使用。本实验对自行研制的一种绿色健康的漱口液进行了实验研究，探讨其抑菌效果，现进行如下报道。
1.资料与方法
1.1 漱口液制备
茶多酚选择浓度为 0.125 mg/ml、0.0625 mg/ml、0.031 mg/ml为浓度梯度，绿原酸选择12.5 mg/ml、6.25 mg/ml、3.125 mg/ml为浓度梯度，两两配比后，加适量甘草酸及薄荷油，制成不同浓度的漱口液。
1.2 实验菌种与材料
茶多酚和绿原酸均购自北京索莱宝科技有限公司（Solarbio）；S.mutans（UA159血清）和P.g（ATCC33277）均由贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室提供；西帕依固龈液购自新疆奇康哈博维药有限公司。
1.3 实验方法
1.3.1药敏片制备
用打孔器将滤纸打成直径为6mm的圆纸片，高压蒸汽灭菌后，将无菌滤纸片分别浸入不同浓度配比的漱口液、西帕依固龈液（阳性对照）、蒸馏水（阴性对照）后取出，将浸有药液的纸片摊平在培养皿中，自然干燥，制成药敏纸片。
1.3.2抑菌实验
甘油菌经复苏、培养和鉴定后，用涂布棒将50ul菌液涂布整个90mm固体培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面，纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴6张纸片，每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15min内贴完纸片。将涂有S.mutans的平板置37℃恒温培养箱中培养24h，将涂有P.g的平板置37℃厌氧培养箱中培养24h后，用游标卡尺测定抑菌圈直径。以上实验重复3次。
2.结果
用茶多酚浓度为0.0625 mg/ml，绿原酸浓度为6.25 mg/ml配制成的漱口液对S.mutans的抑菌环直径为14.8 ± 0.3mm，与阳性对照比较无统计学差异（P>0.05）（见表1）；自制漱口液对P. g的抑菌环直径为12.9 ± 0.3mm，与阳性对照比较无统计学差异（P>0.05）（见表2）。
表1 对S.mutans的抑菌效果
3.讨论
人体口腔中存在种类复杂的微生物，当机体抵抗力低下时，条件致病菌会大量繁殖导致感染甚至其他严重的合并症，比如口臭、牙龈炎、引起口腔医生和患者的交叉感染等，对人们的正常生活造成了一定的影响。本研究根据绿茶中茶多酚和山银花中绿原酸的药效特点，拟用茶多酚和绿原酸为主要成分，适当添加甘草酸及薄荷油研制一种健康的漱口液，其药源在贵州遵义地区广而易得。
茶多酚是一类多羟基酚类化合物的总称，约占茶干重的25%，其主要成份包括表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素等，大量研究表明其具有抗菌、抗突变、抗感染、降低胆固醇和抗糖尿病等药理作用[3-5]。
绿原酸属高效低毒的物种，具有抗菌、抗病毒、解热、抗氧化活性及保护作用等功效，其对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等致病菌有较强的抑制作用[6-7]。作为甘草中主要的活性成分，甘草酸能够有效抑制细菌和病毒，而且能够使人体免疫力增强。薄荷油提取自薄荷，属于驱风药、调味药和芳香药，在粘膜或皮肤处应用可以产生清凉感，使不适及疼痛感减轻。
本研究结果显示，用茶多酚浓度为0.0625 mg/ml、绿原酸浓度为6.25 mg/ml、适当添加甘草酸及薄荷油配制成的漱口液对S.mutans的抑菌环直径为14.8±0.3mm，对P.g的抑菌环直径为12.9±0.3mm，与阳性对照比较均无统计学差异，说明其对S.mutans和P. g两种口腔常见致病菌具有良好的抑菌效果，这为新型漱口液的研发提供良好的实验基础。
【参考文献】
[1] 吴飞华,肖忠革,陈晓文等.复方苦参漱口液对口腔常见致病菌的抑制作用[J].上海口腔医学,2013,24(1):63-65.
[2] 周燕萍,白海燕,谭杭剑.金银花替硝唑含漱液的制备及其质量控制[J].中国药房,2011,22(25):2360-2362.
[4]王春风,刘建国等.茶多酚治疗口腔疾病的研究现状[J].口腔医学研究,2008,24(5):591-593.
[5]董璐,代增英,韩晴等.茶多酚的抑菌作用研究进展[J].山东食品发酵,2004.3(174):42-44.
[6] 焦守国.金银花研究现状及综合利用[J].齐鲁药事,2009.28(8):487-489.
[7] 王爱萍，郑茂东，徐今宁等.金银花中绿原酸的提取工艺及制剂研究进展[J].中国药业,2013,22(14):9-12.
基金项目：贵州省科学技术基金项目（合同编号：黔科合J字[2011]2262号）、遵义市优秀青年科技人才项目（合同编号：遵科合人[2014]8号）、贵州省卫生厅科学技术基金项目（合同编号：gzwkj2012-1-024）、贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室建设项目（合同编号：黔教合KY字[2013]109号）、贵州省科技创新人才团队建设项目（合同编号：黔科合人才团队[2013]4026）、贵州省重点学科建设项目（合同号：SZXK—201207-04号）、遵义市口腔疾病研究重点实验室（合同编号：省市科合[2014]41号）.
论文作者:田源1,2,刘建国2,王斯玮1,2,白国辉2,3,管
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第18期供稿
论文发表时间:2015/9/15
标签：抑菌论文; 浓度论文; 贵州省论文; 致病菌论文; 遵义论文; 纸片论文; 口腔论文; 《医药前沿》2015年第18期供稿论文;