李晓丽1 姜鹏2 姚如永2
（1青岛市崂山区社区卫生服务中心 山东青岛 266021）
（2青岛大学医学院附属医院肿瘤中心 山东青岛 266021）
【摘要】目的：观察康莱特对Lewis肺癌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－３（Caspase-3）和存活素（Survivin）表达的影响。方法：Lewis肺癌细胞，分别加入5，10，15，20μl/ml康莱特，测定其生长抑率细胞凋亡及 Caspase-3Survivin和Survivin的表达。结果：康莱特使肺癌细胞增殖抑制，凋亡增加,且 Caspase-3蛋白升高Survivin蛋白降低。结论：康莱特可改变Caspase-3和Survivin来诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
【关键词】康莱特；Lewis肺癌；细胞凋亡
【中图分类号】R730.5 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）17-0016-02
【Abstract】Objective To investigate effects of kanglaite injection on tumor cellular apoptosis of Lewis pulmonary carcinoma Methods Lewis pulmonary carcinoma cells were prepared and randomly divided into 5 groups equally with different concentrations of kanglaite,cell inhibition rate was detected and apoptosis of Lewis pulmonary carcinoma and level of Caspase-3,Survivin protein expression were examined. Results KLT Produced an obvious inhibition effection on the lewis cell ,It induced the expression of Caspase-3 protein increased the expression of Survivin protein decreased.Conclusion KLT could increase the apoptosis of the carcer cell by changing the expression of Caspase-3 and Survivin.
【Key words】Kanglaite; Lewis pulmonary carcinoma; Apoptosis
康莱特注射液主要成分为中药薏苡仁的提取物[1][2]，本实验观察康莱特注射液对Lewis肺癌增殖活性、Leweis肺癌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶－３（Caspase-3）和存活素（Survivin）表达的影响，并探讨其对肺癌细胞的作用机制。
1.材料和方法
1.1 主要试剂和仪器
MTT购自Sigma公司；PCR试剂盒购自大连宝生物技术公司；原位凋亡细胞检测试剂盒购自Roche公司。美国BD公司出品FACSort流式细胞仪。
1.2 检测lewis肺癌细胞抑制率
荷有lewis肺癌肿瘤的小鼠处死后,分离肿瘤组织,剪碎后经砚磨稀释制成瘤细胞悬液，吸取细胞悬液，接种于新的培养瓶内，继续培养。细胞移入培养板，培养24小时，加分别加入5，10，15，20μl/ml 康莱特的培养液200μl,各药物设4个平行复孔，空白对照孔加等量生理盐水，分别培养48小时。细胞分组备用。一组分别加入5g/L MTT液20μl。继续培养4小时，吸弃上清液，加入DMSO150μl终止反应，计算细胞增殖抑制率。
1.3 测定细胞凋亡及Caspase-3和Survivin 表达
用缓冲液重新悬浮细胞，加入碘化丙锭溶液10μl，混均，避光孵育15min，加入PBS 400μl,流式细胞仪检测细胞凋亡情况[3]。离心，PBS重悬细胞，加终止液，药物组加入Caspase-3 和 Survivin荧光抗体20μl，对照组加入同型Mouse IgG1/IgG1,FITC/PE 20μl,冰盒内避光震荡孵育15min，每管加入2mlPBS,离心，加入多聚甲醛重悬，流式细胞仪检测。
1.4 统计学处理
采用SPSS 13.0 for windows 统计软件包，设P<0.05为差异显著性标准。
2.结果
2.1 康莱特对lewis肺癌细胞增殖的抑制作用
各组细胞增殖得到不同程度的抑制，随着康莱特浓度的增加，对肺癌细胞的抑制作用增强，各组间比较有明显差异，差别有统计学意义（P<0.01）。
2.2 凋亡及Caspase-3 和 Survivin表达的检测结果
康莱特浓度的升高，lewis肺癌凋亡率明显增加[4]，Caspase-3表达增加，Survivin表达减少，且各组间比较有统计学意义（P<0.01）。
3.讨论
肺癌是恶性程度较高的肿瘤，中药的抗癌疗效越来越得到重视。康莱特主要成分为薏苡仁油，具有益气养阴，消癖散结的功能。康莱特对肝癌、胃癌都有较好的作用[5]。该实验证实康莱特可以抑制肺癌细胞的增殖，并导致细胞凋亡升高，Caspase-3和Survivin表达检测表明康莱特经过多种途径达到抗癌治疗的效果。
【参考文献】
[1]Neuzi1)，WeberT，GellertN，eta1.Se1eetiveeaneeree1lki11ingbya1pha一toeophery sueeinate[J].BrJCaneer，2001，84(1):87-89.
[2]王俊杰，俞莉章，中文江，等.惹该仁提取物体外对肾癌细胞系放射敏感性的影响及作用机制探讨[J].癌症，1999，18(6):680-682.
[3]李瑛.康莱特诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究[J].中国肿瘤临床，2002，29(12):869-873.
[4]曹炜，牛建昭.细胞凋亡研究概况[J].解剖学报，1995，26(4):443.
[5]冯斌.康莱特注射液对晚期恶性肿瘤的姑息治疗[J]．中国肿瘤临床，1999,26(3):238-240．
论文作者:李晓丽1,姜鹏2,姚如永2
论文发表刊物:《心理医生》2015年17期供稿
论文发表时间:2016/5/11
标签：细胞论文; 肺癌论文; 莱特论文; 凋亡论文; 抑制论文; 肿瘤论文; 作用论文; 《心理医生》2015年17期供稿论文;