（通海县中医医院 云南玉溪 652700）
【摘要】目的：为甲型血友病的诊断寻求一种简便可靠的实验方法。方法：用自制“普通冰冻血浆”和新鲜血浆对凝血因子VIII缺陷的标本，同时进行APTT纠正实验，新鲜血浆能纠正而“普通冰冻血浆”不能纠正的为凝血因子VIII缺陷。结果：实验检出全部凝血因子VIII缺陷的标本。结论：通过实验可以轻易判断病人凝血因子VIII缺陷，对基层医院诊断甲型血友病的诊断具有重要价值。
【关键词】甲型血友病；普通冰冻血浆；APTT纠正实验
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）06-0098-02
甲型血友病（hemophiliaA）是凝血因子VIII缺乏所导致的出血性疾病，约占先天性出血性疾病的85%。根据世界卫生组织（WHO）和世界血友病联盟（WHF）1990年联合会议的报告，甲型血友病的发病率约为15～20/10万人口，欧美各国统计，约为5～10/10万人，中国甲型血友病发病率约为3～4/10万人口。目前只能靠替代疗法、对症处理等来维持患者的生命，临床上没有找到有效的根治性治疗措施。临床表现为自幼反复自发或轻微创伤后全身各部的出血，除皮肤、粘膜出血外，以肌肉、关节出血为特点，反复关节出血往往导致关节畸形，重要脏器出血甚至可危及生命。[1-2]凝血因子VIII的检测是诊断甲型血友病的关键，但实际中一般医院很难开展凝血因子VIII的检测。如何简便快速地检测凝血因子VIII的缺乏，我们进行了系列实验。
1.材料和方法
1.1 标本
根据2010年血友病诊断和治疗的专家共识，诊断确证的甲型血友病标本10份，中型5例、轻型5例。正常对照标本10份。
1.2 方法
（1）自制普通冰冻血浆，AB型正常人血液按凝血检测要求抗凝，分离血浆，放置4℃冰箱进行保存，48h后凝血因子Ⅷ水平下降约40%[3]。7天后分装冰冻保存备用。
（2）实验标本一分为三，一份直接测试凝血功能，一份与自制普通冰冻血浆1:1混合后测试，一份与正常新鲜血浆1:1混合后进行凝血功能测试。
（3）普利生C-3500全自动凝血分析仪及配套检测试剂对60份样本进行进行凝血功能测定。
1.3 统计学处理
采用t检验，数据用（x-±s）表示。
2.结果
凝血功能测定检测APTT、PT、TT三项，所有测试结果PT、TT均正常，未进行统计学处理，甲型血友病标本APTT均延长20秒以上，对照组标本APTT正常。标本与普通冰冻血浆1:1混合后APTT结果与标本测试结果比较未见明显差异（P＞0.05）。标本与正常新鲜血浆1:1混合后测试，对照组与标本APTT测试结果比较未见明显差异（P＞0.05），甲型血友病组与标本APTT测试结果比较具有明显差异（P＜0.01）。见表，普通冰冻血浆和新鲜血浆APTT纠正实验不会影响对对照组结果，而普通冰冻血浆凝血因子Ⅷ、Ⅴ缺失，凡不能被普通冰冻血浆APTT纠正实验纠正的APTT异常，TT正常的标本可以确认为凝血因子Ⅷ缺失。
表 APTT实验结果
3.讨论
甲型血友病约占先天性出血性疾病的85%。临床表现为自幼反复自发或轻微创伤后全身各部的出血，除皮肤、粘膜出血外，以肌肉、关节出血为特点，反复关节出血往往导致关节畸形，重要脏器出血甚至可危及生命[1-2]。估计中国具有4～5万甲型血友病患者需要诊断治疗。同时如携带基因的女性与正常男性结婚时，所生女儿全部不表现病态，但有一半机会为血友病基因携带者；所生男孩则患现的机会各一半。若男性患者与正常女性结婚姻，所生儿子均正常，所生女儿均为血友病传递者，病人的女儿有一半的机率成为携带者。甲型血友病的诊断具有重大的意义，但普通医院无法开展凝血因子VIII检测，很多三甲医院也只是定期开展检测。迫切需要一种能简便可靠诊断甲型血友病方法。
甲型血友病是凝血因子VIII缺乏，凝血功能检测表现为PT、TT正常而APTT延长。其APTT延长可以通过加入正常新鲜血浆得到校正，因为正常新鲜血浆含有除凝血因子III外的所有凝血因子，可以补充凝血因子VIII的缺乏。文献报道在4°保存的21天内血浆中凝血因子除凝血因子Ⅷ外，凝血因子Ⅴ，纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ活性均没有明显改变；凝血因子Ⅷ水平在4℃保存8h后下降14%；在保存24h后，凝血因子Ⅷ水平下降约30%；在保存48h后，凝血因子Ⅷ水平下降约40%[3]。7天后4℃保存血浆凝血因子Ⅷ水平下降超过80%，其APTT检测出现10秒以上的延长。说明普通冰冻血浆与新鲜血浆相比，除凝血因子VIII外其他凝血因子没有明显区别。由此得出结论凡新鲜血浆可以纠正APTT延长而普通冰冻血浆不能纠正的，标本中存在凝血因子VIII的缺乏，也就是说为甲型血友病病人标本。
普通冰冻血浆APTT纠正实验简便可靠，能检测出标本中凝血因子VIII缺乏，能开展凝血功能检测的医院便能进行甲型血友病病人诊断和筛查。但由于实验标本量较小，未能进行系列实验，如能完善实验证实普通冰冻血浆APTT纠正实验与凝血因子VIII的含量关系，将对甲型血友病诊断和筛查提供有力支持。
【参考文献】
[1]李斌,吴竞生.血友病的综合治疗[J].血栓与止血学，2011(02).
[2]丁秋兰,王学锋,王鸿利,孙竞,华宝来,吴竞生,陈丽霞,杨仁池,张心声,钟小红,赵永强.血友病诊断和治疗的专家共识[J].临床血液学杂志,2010(01).
[3]聂咏梅,廖剑锋,付涌水,等.不同保存温度对血浆部分凝血因子活性的影响[J].实用医学杂志,2005(09).
论文作者:奎少云
论文发表刊物:《心理医生》2018年6期
论文发表时间:2018/3/26
标签：血友病论文; 血浆论文; 因子论文; 凝血论文; 标本论文; 冰冻论文; 甲型论文; 《心理医生》2018年6期论文;