1.武汉市第六医院妇产科 湖北武汉 430015 2.华中科技大学同济医学院计划生育研究所 湖北武汉 430030
摘要：目的 利用药效学实验方法，探讨溪黄草浸膏退黄、散淤的作用机制。方法 采用大鼠胆汁分泌实验；非特异型免疫功能-碳廓清实验和体液免疫功能-血清溶血素实验，对溪黄草浸膏退黄、散淤功能进行论证。结果 溪黄草浸膏在给药 30min后，剂量为8g.kg-1、16g.kg-1时，对麻醉大鼠的胆汁流量有明显增加，其增加率分别为57.14%和64.28%。剂量为9g.kg-1和27g.kg-1能极明显提高NIH小鼠单核细胞吞噬功能，对小鼠血清的溶血素有明显的增加作用。结论 溪黄草浸膏通过提高动物免疫功能，促进胆汁分泌作用达到退黄疸，散淤、清湿热的功能。
关键词： 溪黄草浸膏；免疫功能；胆汁分泌
Abstract: Object To validate effect of Xihuangcao Extracts in bile secrete and immunity function respectively in rat and mice Methods Experimentation applied to increase the bile secrete of rat and to be observed immunity function of NIH mice .Conclusion Bile secrete of anaesthesia rat could patience increase when Xihuangcao Extracts dosage were respectively 8g.kg-1 and 16g.kg-1, increase percent were 57.14% and 64.28%. Dosage were respectively 9g.kg-1 and 27g.kg-1in mice, The uncorrected phagocytic index and hemolysin were salence advanced in mice . The result indicated effect to promoted the bile secrete and to improve immunity function of Xihuangcao Extracts.
Keywords: Xihuangcao Extracts ；Immunity function；Bile secrete
溪黄草为香茶菜属植物(Rabdosia (Bl.) Hassk)，具有清热解毒，退黄，凉血散淤之功能，民间习用于急性黄疸，湿热泻痢，跌打淤肿。由于该药的功能及作用，从70年代起，有关溪黄草资源、鉴定、化学成分、药理作用、临床研究逐渐引起国内外学者的注意，做了大量工作并取得了一定的进展[1][2]。溪黄草是已上市成药消炎利胆片，胆石通胶囊的主要成分。应生产方的要求，我们拟图从影响动物胆汁分泌、非特异型免疫功能和体液免疫功能的动物实验，对溪黄草利胆作用的机制进行探讨性论证。
1.材料
1.1药品： 溪黄草浸膏由广东翁源县青云山中药厂提供，每克浸膏含生药4.12g。批号： 20000909 。利胆醇由广州星群（药业）有限公司生产，批号：0003002。联苯双酯由上海天平制药厂生产，批号：0005004。环磷酰胺为江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号：000723。
1.2动物：清洁型Wsitar大鼠，体重180—200g，雌、雄各半，健康状况良好，为湖北省卫生防疫站动物中心提供，受试动物总数40只。NIH小鼠，体重18-22 g。雌雄各半。武汉生物制品研究所提供。受试动物总数110只。
1.3仪器：721分光光度计，上海第三分析仪器厂。
2. 方法[3]
2.1对大鼠胆汁分泌的实验[4] 取大鼠称重后，用乌拉坦腹腔注射麻醉（0.01g.kg-1),然后沿腹中线切开，找出胃与十二指肠的接合处，从与十二指肠相连的大网膜找出上通肝脏下连十二指肠的胆管，用眼科剪做V型切口插入塑料管，接收胆汁。每30分钟收集胆汁一次，术后30分钟为恢复期，流量为胆汁分泌的基础量。30分钟后从胃与十二指肠的接合处用注射器注入配置好的受试药，给药后每30分钟收集胆汁一次，连续三次。三次收集的胆汁分别与给药前30分钟收集的胆汁量进行比较，计算增加流量的百分率。计算公式如下：
胆汁流量增加的百分率（%）=给药后流量（ml）—给药前流量(ml)/ 给药前流量(ml)×100%
溪黄草浸膏在实验中用蒸馏水配制，剂量分别为：2 g.kg -1、8g.kg-1和16g.kg-1。阳性对照-利胆醇在实验中用蒸馏水配制0.1g.kg-1。
2.2 对非特异性免疫功能的影响-碳廓清率实验[4] 动物随机分为正常对照组，溪黄草浸膏3g.kg-1、9g.kg-1和27g.kg-1三个剂量组，阳性对照药-联苯双酯组（0.2g.kg-1）。各受试组每天灌胃给予受试药物，正常对照组给予生理盐水，连续十天，于末次给药30min后，尾静脉注射中华黑汁（用生理盐水配制1：6）0.1ml.10g-1体重，注射后2min 和8min用吸管从眼眶后静脉丛取血40ul, 溶于4ml 0.1%Na2CO3 溶液中摇匀，应用721型分光光度计，在波长580 nm下比色，测定光密度（0D）。各组测得的OD值经公式转换后用于评价药效。转换公式：K= Log OD2 – LogOD1/T 2 –T1
2.3对体液免疫功能的影响-溶血素测定[4] 动物分六组，每组10只。正常对照组，联苯双酯（0.2g.kg-1）、环磷酰胺（0.02g.kg-1）组，溪黄草浸膏（3g.kg-1、9g.kg-1和27g.kg-1）三个剂量组。联苯双酯组和受试药三个剂量组每天灌胃给药。正常对照组灌胃给予生理盐水。环磷酰胺组皮下注射给药。连续十天，并于给药后第五天给每只动物腹腔注射3：5（V/V）用生理盐水稀释的羊红血细胞悬液0.2ml进行免疫，致敏后第五天，眼眶取血0.5ml，分离血清，血清用生理盐水1：600稀释，按表1操作测定溶血素。各组的OD值经公式：HC50=样品OD值/半红血细胞半数溶血OD值Χ稀释倍数换算后，用于评价药物作用。
2.4数据处理 采用孙瑞元等编制NDST软件包对实验数据进行处理，并以此为依据评估药物效果。
3．结果
3.1溪黄草浸膏对大鼠胆汁流量的影响（n=10）
3.2溪黄草浸膏对小鼠非特异性免疫功能的影响
3.3溪黄草浸膏对小鼠体液免疫功能影响的实验结果
4.结论与讨论
溪黄草浸膏在给药 30min后，剂量为8g.kg-1、16g.kg-1时，对麻醉大鼠的胆汁流量有明显增加，其增加率分别为57.14%和64.28%。利胆醇0.1g.kg-1在给药后30、60min增加大鼠胆汁流量65.63%。表明溪黄草浸膏能增加麻醉大鼠胆汁流量，但作用强度及维持时间不及利胆醇。溪黄草浸膏剂量为9g.kg-1和27g.kg-1能极明显提高NIH小鼠单核细胞吞噬功能，对小鼠血清的溶血素有明显的增加作用。结果表明溪黄草浸膏能提高小鼠的非特异性免疫和体液免疫功能。
中医认为“气”是脏腑组织生理功能的体现。肝淤气滞、脾胃气滞正是气机不畅。胆汁分泌排泄与消化功能以及黄疸形成密切相关。对大鼠胆汁分泌的实验进一步表明溪黄草退黄疸、散淤功能与其促进胆汁分泌作用相关。单核巨噬细胞系统具有强大而迅速的吞噬廓清异体颗粒或某些可溶性异物的能力。并能迅速清除机体自身产生的某些有害物质，如：病原微生物及其毒素，衰老、死亡或突变细胞等，是机体保持内环境的重要系统，也是中医“正气”的重要生理依据。提高体液免疫实验体现的是中医“扶正固本”概念。溪黄草浸膏正是通过增加小鼠溶血素，提高碳廓清率，促进胆汁分泌这些生理功能的改善，显示其退黄疸，散淤、清湿热之功能的。
参考文献
【1】陈建南、蒋东旭等 溪黄草药材的显微鉴别研究[ J ] 广州中医药大学学报. 2016（23）1，52－55p.
【2】丁利君 周燕芳 林 楠等 溪黄草中黄酮类物质提取及对羟自由基清除作用[ J ] 食品与机械 2014（20）3，13－14p.
【3】肖树雄 黄德嘉 林伟忠 马丽霞 溪黄草研究进展[ J ] 中草药2013（31）2 ， 951-952.
【4】中华人民共和国卫生部药政管理局 中药新药研究指南（药学、药理学、毒理学）》[S]. 2015 140p 、151p.
【5】陈奇主编 中药药理研究方法学[M ]. 人民卫生出版社2013年 第一版 445-447；757-759；750-751.
论文作者:张帆1 庞雪冰2
论文发表刊物:《临床医学教育》2018年9期
论文发表时间:2018/10/19
标签：浸膏论文; 胆汁论文; 功能论文; 免疫论文; 小鼠论文; 给药论文; 联苯论文; 《临床医学教育》2018年9期论文;