1.南华大学研究生院 湖南衡阳 421001；2.湖南省肿瘤医院老干内科 湖南长沙 410013
【摘 要】癌症是造成人类死亡最为主要的原因，其中肺癌占了绝大部分，而肿瘤转移则会导致肺癌患者最终的死亡。非小细胞肺癌（NSCLC）属于肺癌比较特殊的一种，其死亡常见原因为转移及复发，其中血行播散是主要转移途径，早期诊断为NSCLC的部分患者基本已有远处转移。循环肿瘤细胞（CTC）属于NSCLC分期系统有益补充，能更好地反应患者综合情况。为此，越来越多的研究认为CTC计数在NSCLC临床应用中有很高的价值，本文进行了相关综述。
【关键词】非小细胞肺癌；循环肿瘤细胞；计数；研究
癌症是常见恶性疾病，而且大部分患者接受根治性治疗后依旧有复发，复发者死亡率极大，而且部分患者早期诊断时就有转移[1]。癌症转移比较复杂，先由原发癌边缘恶性细胞侵入基底膜，之后间接或直接通过血管、淋巴管等，最终定植与蔓延到远处组织、器官等形成转移灶[2-4]。目前，大部分癌症患者循环系统存在循环肿瘤细胞（CTC），认为加强其计数及检测，对于诊断肿瘤及其预后有着积极的意义。为了进一步探讨CTC计数在非小细胞肺癌（NSCLC）中的应用，本文进行如下综述。
1 CTC计数检测技术分析
CTC计数检测技术目前较多，笔者当前常用的几种进行如下简述：
1.1 芯片技术
CTC计数芯片技术指的是一种微流体硅胶芯片，可检测血液极微量肿瘤细胞，芯片排布7.8×104个微位点（包有抗体），在检测时有血液经过该芯片，抗体和肿瘤细胞会发生抗原-抗体反应，进而黏附于芯片，进而捕捉CTC[5]。这种技术比较新颖而先进，分离纯度极高，更利于检测CTC，但因需要先进的技术作为支撑，在国内应用还无法广泛普及，不过就目前国内外已有应用来看，已经为NSCLC CTC计数检测提供了更为广阔的平台。
1.2 聚合酶链反应技术（PCR）
PCR属于最为常用的分离与检测NSCLC的方法，而且类型较多，各有优劣。最早应用的PCR技术为细胞学检测，阳性率基本可达到100%[6]，但随着研究增多，显示其假阳性率较高。分析原因主要在于极易和血液其他成分（如巨核细胞）相互混淆。之后PCR技术逐渐成熟，
依次出现了荧光定量RT-PCR与巢式RT-PCR等。PCR技术主要是根据特异抗原表达，以免疫
细胞化学法为主，可提高检测效率，并提高早期转移、微小残余肿瘤等的诊断效率，有着高效率与高灵敏度等优势，逐渐广泛应用在各类检测与诊断中。Yoon等学者采取PT-PCR表明
甲状腺转录因子可以作为CTC标志物，同时进一步通过研究表明连续检测到CTC可以提示NSCLC术后的预后效果不佳[7]。不过，随着该技术在NSCLC检测中应用增多，敏感性与特异性提高，导致假阳性率也增加，比如临床标本有轻度污染时极易发生假阳性事件，这些需要在以后应用中加强重视。
1.3 血液CTC检测系统
血液CTC检测系统的应用也十分广泛，目前国内外已有大量的关于该技术的研究与报告。Kerbs等学者采取该项技术对101例NSCLC晚期患者进行了研究，检测化疗前后的CTC变化情况，结果显示Ⅳ期患者的外周血中每7.5ml含有的CTC计数明显比Ⅲ期患者更高，而且揭示前者的预后效果更差。从以往研究来看，该技术应用十分广泛，但依旧存在一些不足与缺陷，比如极易遗漏一些表面无法表达的上皮特异性黏附分子CTC。
2 CTC计数与非小细胞肺癌临床分期
NSCLC临床分期以往多依靠病理学与影像学，随着分子生物学在诊断中逐渐广泛应用，目前已有学者认为NSCLC临床分析可实施分子分期，而CTC计数在其临床分期中作用巨大。研究显示直径低于1cm的NSCLC发生转移，对早期转移Ⅰ期患者不管有无转移均能检出CTC，尽管血液中CTC并不等同于一定转移，但结果表明CTC和肿瘤TNM分期有一定的关联。Wu等学者采取免疫荧光法研究肺癌患者47例，显示CTC和肿瘤分期有关，故而可将CTC计数作为肿瘤TNM分期补充。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆Krebs等学者通过研究发现NSCLC患者治疗前外周血中每7.5ml中CTC计数不低于5的要明显比低于5的更差，而且中位无进展生存期及总生存期均明显更差，可见CTC计数对于NSCLC预后评估及分期有潜在价值[7]。此外，因原发灶与微转移灶间有显著异质性，将CTC计数应用在微转移灶中也能很好地进行临床分期，从而可弥补病理学、影像学等检查方式无法及时反映的不足，对分期与治疗有更好的价值，并指导临床治疗方案的选择，从而降低细胞毒性作用。
3 CTC计数与非小细胞肺癌疗效评估
NSCLC患者主要疗法为化疗，对化疗方案及其药物评估最为主要的依据为影像学检查，但原发灶与转移灶患者存在肿瘤细胞异质性，部分化疗方案与药物对原发灶有效但可能对转移灶无效，而此时采取常规检查方式难以评估。因CTC和肺癌转移有着密切的关系，为此进行CTC计数，可间接反应转移灶化疗效果，通过对比化疗前后CTC计数水平，便可对化疗疗效进行评估[8]。Nagrath等学者针对9例NSCLC患者进行研究，通过评估CTC计数判断疗效，显示CTC计数变化和实体肿瘤在影像学诊断上的结果基本一致，为此认为加强CTC监测可实施评估化疗效果。当前，已有学者将肿瘤血液灌注CT成像和CTC监测联合应用在NSCLC患者化疗疗效评估中，结果显示二者结合评估效果更佳[9]。可见，CTC计数对于NSCLC疗效监测有着积极的意义，有着实时监测的效果，对化疗方案调整有着指导价值。
4 CTC计数与非小细胞肺癌预后监测
NSCLC患者预后因素较多，CTC计数能为预后评估提供更科学与可靠的依据，而目前已有很多学者进行了CTC自身特异性研究，能更好地综合评估预后情况。Pailler学者通过研究显示，CTC或许隐藏有间变性淋巴瘤激酶基因重排，通过不断克隆，使得NSCLC患者病情进展与细胞转移，从而揭示预后不佳[10]。因目前鲜有常规方式评估早期NSCLC，为此CTC可能作为其主要的客观判断标准，加上CTC计数越来越成熟，相信以后会为NSCLC预后监测提供更为可靠的帮助。
5 结语
尽管近几十年CTC计数的研究越来越广泛，但其概念并非新颖词汇，因为早在一百多年前一些有远见的科学家与医生便对其进行了描述，但碍于无先进的科学技术支撑，故而无法如当前一样广泛研究与探讨。CTC计数及其检测技术在NSCLC患者中的应用，属于非侵入性活检，目前可将其与EGFR突变检测结合，从而直接分析CTC基因，进而对原发肿瘤情况进行总结。不过，目前在CTC研究中依旧存在很大挑战，毕竟没有任何一个技术是明显优于其他技术的，都有自身的缺陷与不足，只能不断完善。
从当前发展趋势来看，在未来研究领域中，若仅仅单纯研究CTC计数在NSCLC中的应用是远远不够的，还应重视CTC基因表达从而确定NSCLC特定亚型也是十分重要的，同时NSCLC有一定转移可能，利用分子计数提取、分离及分析CTC可得到相关信息，此外抗CTC治疗目标也将成为富有的成果战略，可能在根本上避免转移灶形成，这些都是以后要不断研究与探索的，依旧任重而道远。
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论文作者:干争光1,罗以2
论文发表刊物:《航空军医》2015年11期供稿
论文发表时间:2015/12/28
标签：细胞论文; 肺癌论文; 肿瘤论文; 患者论文; 技术论文; 已有论文; 学者论文; 《航空军医》2015年11期供稿论文;