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摘要：研究了紫外分光光度法测定食品中防腐剂(苯甲酸)的含量。 样品中苯甲酸的最小检出量为 0.0010mg/ml, 回收率为 98%。 该方法简便易行, 灵敏准确。
关键词：防腐剂;测定;紫外分光光度法
食品防腐剂苯甲酸的测定 ,通常采用乙醚提取碱滴定法和水蒸气蒸馏紫外分光光度法测定,这两种方法测定程序复杂且周期长 ,回收率也较低。本文作者在前人工作的基础上 ,采用了新的测定方法。即乙醚萃取紫外分光光度法测定 。样品分析结果表明：该方法简便准确、快速可行。
1食品防腐剂
对微生物或霉菌具有杀灭 、抑制或阻止生长作用的食品添加剂为防腐剂 。我国准许使用的防腐剂GB2760-1986 有：苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、二氧化硫、焦亚硫酸钠及其钾盐、丙酸钙 、丙酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、丙酯、脱氢醋酸、双乙酸钠、葡萄糖-δ-内酯和乳酸链球菌素。1996 年对GB2760-1986 作很大修订,把二氧化硫、焦亚硫酸钾及其钠盐列入漂白剂。将葡萄糖-δ-内酯归到稳定和凝固剂中。特别是把保鲜剂 、过氧化氢 、乙氧基喹、仲丁胺、桂醛 、噻苯咪唑、苯基苯酚、苯基苯酚钠等统统归到防腐剂中。这与日本相反 。1997 年以前日本把噻苯咪唑、联苯、苯基苯酚 、苯基苯酚钠等列为防腐剂,1997 年单列项为防霉剂。食品防腐剂 GB2760-1996共有 28个品种,1997 年新增丙酸 、纳他霉素和液体二氧化碳(催化法)。1998 年增补单辛酸甘油脂。1999 年增加脱氢醋酸钠。2002 年增加对羟基苯甲酸甲酯钠,对羟基苯甲酸乙酯钠和对羟基苯甲酸丙酯钠。截止到2003 年共 36 个品种。
2试剂与仪器
苯甲酸标准溶液：0.05mg/ml (准确 称取 0.5000g 苯甲酸以 0 .01mol/L 的 NaOH 溶解并定容至1000ml, 使用时再以蒸馏水稀释 10 倍)。
756 型紫外可见分光光度计 上海分析仪器厂
3实验条件的选择
取 0.05mg/ml 苯甲酸标准溶液 3ml 于 125ml 分液漏斗中 ,加入 20ml 饱和氯化钠溶液, 再加入一定量的1：1HCl 和 25ml 乙醚, 充分振荡后静置 。弃去无机相, 以空白试剂为试样参比, 在 λmax 处测定吸光度。
2.1 λ max 的选择 如前操作, 以不同波长测定吸光度,实验表明 λ max 为 223nm 。
2.2 饱和氯化钠溶液加入量的影响 取数份标准溶液,只改变氯化钠饱和溶液的用量(不足 20ml 以蒸馏水补足 20ml)实验结果表明 15.0ml 以上时吸光度最大且趋于稳定, 实验中加入20.0ml 饱和氯化钠溶液。
2.3 1：1HCl 加入量的影响 改变 1：1HCl 的加入量, 测定其吸光度。实验结果表明 , 随着 HCl 用量的加大 ,吸光度上升, 大于 6.0ml 以上时 ,基本处于稳定状态 。实验中为了操作方便 ,加入 10.0mlHCl。
2.4 振荡时间和萃取温度的影响 实验结果表明：吸光度在振荡 4 分钟之后出现最强的稳定值。本实验振荡时间控制在 4 ～ 6 分钟 。萃取温度实验结果表明 ：温度越低吸光度越大, 在接近室温时吸光度趋于稳定值 ,为了操作方便 ,实验在室温下进行。
4结果与讨论
4.1工作曲线的绘制
分别取 0 .05 mg/ml 苯甲酸标准溶液 0 .5,1 .0, 2.0 ,3.0, 4.0, 5.5ml 于 125ml 分液漏斗中 ,加入 20ml 饱和氯化钠溶液 ,10ml 1：1HCl 和25 ml 乙醚 。充分振荡 5 分钟 ,静置分层后弃去无机相 ,以空白试剂为参比 , 在 223nm 处测定其吸光度 ,绘制 A～ C 曲线 。
4.2样品测定
4.2.1 苹果汁中苯甲酸的测定
准确称取样品 10 .0g于 250ml 容量瓶中,以蒸馏水稀释至刻度 。取上述溶液 3ml 于125ml 分液漏斗中,操作同前。由所测得的A 值从工作曲线上查得 C 值, 再由下面公式计算结果
X = c ×10-3×25 ×250V ×G×10 6 (ppm)
其中 C 为标准曲线中查得的值(mg/ml)、V 为样品体积 ml ,G 为样品重量(g)。五次测定查得 C 的平均值为 5 .45, 计算结果 X=908 .33(ppm)。
4.2.2 酱油中苯甲酸的测定
因酱油中含有一定量的酯类物质 ,需要进行氧化处理 。称取 10 .0g 样品于250ml 烧杯中加入 25mlK 2 Cr 2 O 7 (0.4mol/L)溶液、7ml 硫酸溶液(8mol/L), 在水浴上加热 30 分钟 ,然后冷却,转移至 250ml 容量瓶用以水稀释至刻度, 以下操作同前 。在本实验中 G=28.0g ,V =3ml ,三次测定查得 C的平均值为 3.84 ,计算结果 X =285 .71(ppm)。平均回收率为 98 .0%。
5饱和硫酸铵蒸馏法
食品中苯甲酸 、山梨酸 、脱氢醋酸对羟基苯甲酸酯类九种防腐剂同时测定法。食品中防腐剂的分析 ,试样前处理的方法有水蒸气蒸馏法和有机溶剂提取法。一般用气相色谱法定量, 近年来发表很多高效液相色谱法(HPLC)8, 这些方法试样前处理简单, 测定结果较准确,但是多数方法仅限于某种食品 ,应用于多种多样食品时 ,常常出现防碍峰干扰 。用水蒸气蒸馏法进行试样预处理时 ,对羟基苯甲酸酯类(PHBA -Es)的回收率低 , 用饱和硫酸铵-水蒸气蒸馏法进行试样预处理, 用 HPLC 法测定苯甲酸(BA)、山梨酸(SOA)、脱氢醋酸(DHA)和 PHBA-ES。用GC 法测定丙酸(PA)。研究水蒸气蒸馏盐析效应 , 分别用 NaCL 、KCL、NH4CL 、Na2SO4、K2SO4和(NH4)2SO4饱和溶液做试验 ,结果(NH4) 2SO 4 效果最好, 回收率达 100%。
6回收率实验
将处理样品上机测试，比较不同比例提取剂的回收率。
根据上表，乙醇∶水 =100∶0 或者 80∶20 时提取效率较高，但同时基线噪音较高，干扰较大，故选定最优比例提取剂为乙醇∶水 =50∶50。下图为面包样品以乙醇∶水 =50∶50 作为提取剂时的色谱图。
结论
国外多篇文献采用同时检测技术进行食品中防腐剂的测定，B.H.Chen 等人在 1992 年用液相色谱法同时检测了食品中的甜味剂、防腐剂和抗氧化剂，认为方法可行。Kishi Hiroko 等人在 2007 年对食品中的 9 中防腐剂进行了同时检测，检出限可达到 0.005g/kg [20] 。本研究通过对不同比例乙醇水提取效率的比较，确定一种回收率最高的提取剂，利用高效液相色谱仪的梯度洗脱和波长切换，一次进样同时检测食品中苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸酯类的含量，回收率均能达到90%以上，检出限均小于 2mg/kg，方法简便、快捷，重现性好。该方法可以满足 GB 2760—2011《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》标准中各种食品添加剂的规定使用量的检测要求。为食品安全检测工作提供了一种简便、快捷、准确的检测方法。
参考文献：
[1] 林科. 食品防腐剂的种类及其研究进展[J].广西轻工业，2009，131（10）：9-11.
[2]西山修、栗田礼子、黑 斡子等.硫酸铵水蒸气蒸馏法食品中防腐剂的分析, 食品卫生学杂志(日),1995, 36(4)：495～ 500
论文作者:陈聪汉
论文发表刊物:《基层建设》2017年第17期
论文发表时间:2017/10/30
标签：苯甲酸论文; 防腐剂论文; 光度论文; 溶液论文; 食品论文; 羟基论文; 山梨论文; 《基层建设》2017年第17期论文;