（1云南省肿瘤医院乳腺外一科 云南昆明 650118）云南省第二人民医院生殖科 云南昆明 650221）
【摘要】临床医学本科教学中关于学生科研思维的培养以及科研方法的教学已成为当今教学的热点问题。我们在该研究中回顾了我们自己的立体化教学，对学生科研思维的培养、科研方法的教学、统计方法的教学进行了探讨及可行性分析。
【关键词】临床医学；本科；科研；教学
【中图分类号】R-4 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）34-0343-03
高层次的临床医学本科教学应是一种包含课堂学习、临床技能培养、临床实践以及科研能力提升等内容的多元化教学[1]。当前医学发展的大背景要求临床专业的本科学生在能够认真听课取得优异考试成绩的同时完成一定的临床技能操作。除此之外，在临床学习中发现科学问题，并用科学思维去解决问题的能力也显得尤为重要。我们在日常的本科教学中除了教会学生基本外科操作、规范的病历书写、缜密的临床思维之外也注重对学生科研能力方面的培养。现将我们所取得的阶段性成绩做一报告。
1.科研思维的培养
严谨的科研思维、缜密的逻辑推理以及合理的实验设计是进行科学研究、解决科学问题的根本。在对学生进行科研方法的教学之前我们需要通过合科学讲座、小班教学深入透彻分析，让学生逐步有做科研的思路。通过教学，我们让学生明白课题开始之前所需要做哪些准备工作；需要阅读多少文献，若是SCI文献影响因子分别多少，每一篇文献读到什么程度；发现问题以及对问题提出合理可行的科学假设；对科学假设做出一定的实验规划并且进行可行性分析。当学生能够把如何思考问题、如何做科研、如何分析数据以及如何写好文章都基本掌握时，科研体系的建立也就逐渐完成，此时便可以开始下一步具体科研方法的教学。
2.科研方法的教学
2.1 生存分析、单因素统计分析、多因素统计分析的教学
这一部分属于最基本的临床数据分析方法，是在集科研、医疗以及教学三位一体的大型三甲医院工作的科研人员必须掌握的基础科研方法。我们在日常的教学中，我们首先让本科学生进入到基础实验室中，学习PCR引物的设计与合成，用TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit、PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser以及SYBR Premix Ex TaqTM II（Tli RNaseH Plus）进行癌和癌旁组织中目的基因mRNA的提取，并且通过免疫组化以及蛋白质印迹等方法分析目的基因蛋白的表达。在得到所需的数据之后，通过公式计算mRNA相对表达量，根据基因和蛋白的表达，我们指导学生使用SPSS22.0以及Graphpad Prism软件绘制目的基因在癌和癌旁的表达柱状图，通过logrank检验进行生存分析并且绘制生存曲线图。图1图2所展示是我们前期已取得的实验结果[2]。
在让学生了解了目的基因在癌和癌旁的表达之后我们需要进一步教学让学生了解该基因在预后以及诊断中的价值。我们再次使用SPSS22.0以及Graphpad Prism软件，通过COX模型进行统计分析，将基线特征中的因素分别纳入统计得到单因素统计分析结论，在全部同时纳入，得到多因素统计分析的结论。通过比较P值判断目的基因在判断预后中的价值。
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图2 不同RAB22A表达患者的预后
2.2 基因敲除、细胞侵袭迁移实验、细胞增值实验的教学
在学生了解目的基因的临床价值之后，我们需要让学生研究更多的目的基因在肿瘤尤其是乳腺癌中表达对癌细胞的影响。基因工程的手段对目的基因进行过表达或者敲除是肿瘤学基础研究中的重要方法。我们详细分析了siRNA对目的基因进行瞬转以及慢病毒或腺病毒所带shRNA对目的基因进行稳转的差异以及用途，并指导学生对GOLPH3目的基因干预，通过PCR以及western blot实验观察转染的效果，图3是我们已经取得的研究成果[3]。
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图3 siRNA干扰GOLPH3表达之后GOLPH3在MCF-7细胞中的mRNA以及蛋白表达
细胞功能学实验中transwell侵袭迁移实验以及CCK-8实验是研究肿瘤细胞增值以及转移的实验方法。在我们的科研教学中，我们让学生亲自在transwell小室中铺基质胶并且用转染前后的细胞培养后在无血清培养基中完成实验。之后本科学生在转染前后的细胞中加入CCK-8试剂，在不同培养时间点记录0D450值以了解细胞的增值情况，图4和图5是我们已经取得的研究成果[3]。
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图5 CCK-8细胞增值实验结果
2.3 动物实验的教学
动物实验是靶向药物进入临床试验之前所必经之路，也是发表高分SCI论文必不可少的实验方案。在我们的指导下，本科学生在手术室获取刚切除的乳腺癌以及肺癌标本，置于冰浴胎牛血清中，15分钟内转移至无菌手术室并将肿块切碎置于裸鼠皮下脂肪垫以建立人肺癌或乳腺癌裸鼠移植瘤模型。通过特异基因的检测以及免疫组化人源鼠源抗体的分析得到人源肿瘤移植瘤模型。使模型能够保持原肿瘤的基因型以及表现型，可以用于进一步的临床研究。此外，我们还教学使用注射法，将乳腺癌细胞打至裸鼠脂肪垫建立移植瘤模型。以上实验均取得成果并已发表论文[4-6]。
3.统计方法的教学
合理的统计方法以及正确的统计操作是进行数据分析以及论文发表的必备条件。在我们的指导下，学生能够熟练使用SPSS22.0统计软件，并且了解两独立样本t检验在分析癌和癌旁组织表达中的应用，掌握基因表达与基线特征分析的卡方检验，掌握基因表达与预后分析的log-rank检验以及实验数据分析的方差分析。
4.小结与展望
我们科室的本科教学开创了一种新的模式----集外科技能操作、病历书写、医学文书书写以及科研能力培养一体的立体化教学。在这种新的培养模式下，需要学生付出更大的努力，因为科研的入门属于学术型硕士的培养，当更高级别的培养模式下放之后只有学生付出更多的努力才能取得成绩。在当前的培养模式下，我们科室已经有一定量的本科学生完成了我们所布置的学习任务，在不影响临床教学的情况下，这些学生已经能够发现并独立思考临床问题，通过合理的科研思维设计合理的简单实验并且付诸实施取得成果。我们希望未来能够延续并推广这样的教学模式，只有在这样的教学模式下才能够培养全能型人才，为国家的医疗教育贡献有能力的人才。
【参考文献】
[1]赵炬明.论新三中心:概念与历史——美国SC本科教学改革研究之一[J].高等工程教育研究,2016 ,03:35-56.
[2]唐向辉，唐诗聪，张凡.RAB22A在乳腺癌组织中的表达及临床意义[J].中国癌症防治杂志,2017,9(6):469-472.
[3] Shicong Tang, Hong Pan, Wei Wei.GOLPH3: a novel biomarker that correlates with poor survival and resistance to chemotherapy in breast cancer[J].Oncotarget,2017,8(62):105155-105169.
[4] SHICONG TANG, RIRONG YANG, XIN ZHOU.Expression of GOLPH3 in patients with non-small cell lung cancer and xenografts models[J].ONCOLOGY LETTERS,2018,15:7555-7562.
[5]唐诗聪，潘泓，黄耀元.人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤模型的建立[J].昆明医科大学学报2017,38（2）:28-32.
[6]唐诗聪，潘泓.组织块移植法建立人肺癌裸鼠移植瘤模型[J].昆明医科大学学报2014,35（11）:169-171.
论文作者:唐诗聪1,谭明建1,李春香1,李红万1,张恒瑀1,
论文发表刊物:《心理医生》2018年34期
论文发表时间:2018/12/13
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