【摘要】目的：探析微生物实验室副溶血性弧菌能力验证结果。方法：依据《食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验》对农贸市场的10份水产品样品进行检测。结果：a1、a2、a4、a7、a8、a10、均未检出副溶血性弧菌；a3、a5、a6、a9、标准菌种均检出副溶血性弧菌。结论：借助此次检测能力验证，能够促进本实验室检测食品中副溶血性弧菌水平的提升，对证实实验室检测技术能力具有积极意义。
【关键词】微生物；实验室；副溶血性弧菌；能力验证
【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）11-0358-02
能力验证指的是对实验室检测水平的一种判定渠道。通常由检测实验室、认可机构以及实验室管理部门进行验证。因此，能力验证是对实验室质量控制的有效保证。鉴于能力验证活动是对实验室能力进行决断的国际通行做法。因此，其判定结果往往能够获取广泛的认可。能力验证能够促进对实验室的了解，对提升与证实实验室能力均意义重大。本次研究通过10份水产品样品进行检测，就微生物实验室副溶血性弧菌能力验证结果进行探究，现报道如下。
1.资料和方法
1.1 一般资料
由CNCA委托某疾病预防控制中心提10份水产品样品，每份样品约中500。样品代码分别为a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7、a8、a9、a10。对本实验室的标准菌株与待检样品同时进行检测。标准菌株是由中国药品生物制品检定所鉴定过的副溶血性弧菌89001。
1.2 依据
依据《食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验》对农贸市场的10份水产品样品进行检测。
1.3 方法
于生物安全柜内分别处理10份水产品，用3％NaCl碱性蛋白胨水1mL,溶解冻干粉末；溶解后，取悬浊液0.5mL加入盛有5mL3％NaCl碱性蛋白水胨水试管中。同时把标准菌种加入到盛有5mL3％NaCl碱性蛋白胨水中。同时放置在（36±l）℃的培养箱中培养16h。采用ABff900型荧光定量PCR仪，a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7、a8、a9、a10，10份样品培养物以及标准菌种培养物，开展副溶血弧菌核酸荧光PCR检测。使用接种环分别挑取a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7、a8、a9、a10，10份样品培养物与标准菌种培养物。然后划线接种在TCBS板上，并放置在（36±l）℃培养箱中培养24h观察结果。
2.结果
通过综合分析生物学特性、初步鉴定、ATB全自动细菌鉴定及药敏测试仪读取结果以及荧光PCR结果。可知a1、a2、a4、a7、a8、a10、均未检出副溶血性弧菌；a3、a5、a6、a9、标准菌种均检出副溶血性弧菌。经荧光PCR检测，156a呈阴性、156b呈阳性、156c呈阴性、156d呈阳性、156e呈阴性。标准菌种呈阳性、阴性对照呈阴性、阳性对照呈阳性。经TCBS平板上分离培养，156a未生长；156b、156c、156d、156e标准菌种均中等大小，且均为圆形、光滑、湿润、半透明的绿色菌落。
分别选取156b、156c、156d、156e四份样品与标准菌种TcBs平板上的可疑菌落；划线接种于3％NaCl胰蛋白胨大豆琼脂平板上纯培养；放置在（36±l）℃培养箱中培养；培养24h后，选取156b、156c、156d、156e与标准菌种纯培养的单个可疑菌落；开展初步鉴定，结果见表1。
分别取156b、156c、156d、156e与标准菌种纯培养的3％NaCl胰蛋白胨大豆琼脂平板上的单个菌落；用生理盐水制成05麦氏单位的菌悬液；加入到ID32 E生化鉴定试验条中；置入湿盒中，并放置在（36±l）℃培养箱中培养24h。由ATB全自动细菌鉴定与药敏测试仪读取结果。鉴定结果见表2。
3.讨论
疾病防控机构成立微生物检验室的目的是为卫生行政部门制定疾病预防与控制措施以及采取对策[1]。微生物检验室作为检测机构，其职责是向卫生监督提供实验室技术支持, 为社会卫生需求提供卫生技术服务。为确保所提供数据的及时、可靠与合理，就必须要求检测实验室，能够确保其所检测出的数据福否检验质量标准[2]。通过开展能力验证活动，能够显著提升实验室检测技术及水准。从而有效提升实验室质量，确保实验室检测结果真实、准确且可靠。
通过参与到历年开展的能力验证活动，可对微生物检测工作了解得更加深刻。微生物检测工作的每一个环节均与检测质量密切相关。因此，对每一工作环节均需严格控制检测质量。例如新添置的培养设备，在投入运行前均需开展质量验收环节；定期对热灭菌箱、高压灭菌器等器械开展灭菌效果监测；进行检测样品时，采取阴阳对照或者空白对照为宜；定期对检测环境施行灭菌效果监测；确保每一操作环节，均在无菌条件下进行要。本次能力验证样品检测所用的培养基质量均达到规定标准；检测全程，附带标准菌种；荧光PCR检测过程，携带阴阳对照；因此本次实验过程完整，检测结果真实、可靠。研究结果，156a、156c、156e均未检出副溶血性弧菌；156b、156d、标准菌种均检出副溶血性弧菌。
综上所述，借助此次检测能力验证, 能够促进本实验室检测食品中副溶血性弧菌水平的提升，对证实实验室检测技术能力具有积极意义。
【参考文献】
[1]吉彦莉,郭勇峰,王敬辉.食品微生物学检测能力验证分析[J].公共卫生与预防医学,2015,26(03):110-112.
[2]舒鹃娟,张伟冲,袁峰.食品微生物的检测能力验证[J].上海预防医学,2014,26(3):154-157.
论文作者:闫华伟,刘明丽,左聪
论文发表刊物:《医药前沿》2017年4月第11期
论文发表时间:2017/5/3
标签：弧菌论文; 实验室论文; 菌种论文; 能力论文; 样品论文; 标准论文; 溶血性论文; 《医药前沿》2017年4月第11期论文;