木兰县疾病预防控制中心 151900
摘要：致泻性的大肠埃希菌在类型上具有很多的种类，这是一种存在于人体肠道内的一种的致病菌，一旦感染上这种致病菌，患者最明显的一个患病特征就是腹泻，但是在众多的病情特征中可以导致人腹泻的疾病有很多，并且大肠埃希菌的上的种类也有很多，所以这就给医学上的检定增加了很多的难度，文章通过对大肠埃希菌上检验技术发展子啊未来的方向进行看了研究，望能给相关专业技术上的研究人员带来帮助。
关键词：致泻性病菌；大肠埃希菌；检验技术；进展
对于致泻大肠埃希菌上的检验技术上的发展，许多的国家一直致力于在分子生物学上的研究，其中PCR技术上的进展迅速，基因芯片上的技术研究也得到了很大成果。这两种技术的组合在粪便中含有的大肠埃希菌的检测上具有很好的应用效果，但是因其技术使用上的一些限制因素，在临床上的推广效果一直不是很理想，所以大肠埃希菌感染患者的临床表现与粪便呈现出来的形状成为了主要的检验手段。
1.临床表现和粪便性状对大肠杆菌性腹泻的提示作用
现已知重要致腹泻性大肠埃希菌有产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、产志贺毒素大肠杆菌（STEC，曾名为肠出血性大肠杆菌EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠聚集性大肠杆菌（EAEC）、细胞脱落性大肠杆菌（或细胞致死膨胀性大肠杆菌，DAEC）、产坏死性毒素大肠杆菌（NTEC）、产志贺毒素且具侵袭力大肠杆菌（ES-IEC）等。下面的文章中对于各种菌种上的名称会用英文的缩写进行代替，望采谅。
1.1ETEC所致腹泻
20%~40%成人旅行者腹泻患者的病原为ETEC，易发生暴发流行。患者临床特点是发病急，可出现发热或呕吐，粪便性状为水样便，无脓血，症状与霍乱近似。1.2EPEC所致腹泻主要患者是5岁以下幼儿，但肠黏膜免疫功能低下的成人或感染菌量大时（108~1010）也可发病。患者可有低热、呕吐。在成人中可出现暴发流行。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆1.3STEC所致腹泻STEC感染可引起腹泻、出血性结肠炎，儿童、老人或免疫功能低下的感染者，可发生严重的溶血性尿毒综合征（hemolyticuremicsyndrome，HUS）。肠外感染与胆囊炎、胰腺炎、阑尾炎、肠穿孔、肺炎、出血性膀胱炎、心肌损伤等有关。患者粪便中有血是重要特征。
1.4EIEC所致腹泻
患者有腹痛、低热。粪便特征为脓血便，也见稀便，镜检可见脓细胞和红细胞。
1.5EAEC所致腹泻
EAEC是发展中国家儿童持续性腹泻的主要病原。腹泻患者有低热、呕吐，腹泻一般持续18~20d。患者粪便为稀便、黏液便或水样便，镜检有白细胞，常出现暴发流行。
1.6DAEC所致腹泻
患者腹泻症状较轻，但DAEC可产生坏死性细胞毒素和溶血素，故患者可出现腹痛、发热。粪便多为稀便或黏液便。
2.常规应用的快速检验技术
粪便检验乳铁蛋白阳性，有助于感染性腹泻的诊断现有简易的聚苯乙烯粒子（Latex）凝集试剂，可用粪便悬液直接进行试验，且可作半定量测定。如粪便1∶50稀释呈阳性，其敏感性为93%，特异性为83%；如粪便1∶400稀释呈阳性，则敏感性为66%，特异性达100%，但此试验并非致腹泻性大肠埃希菌所特有。
此菌在弱选择培养基上培养后，直接以成套诊断血清作血清学分型鉴定，但由于EPEC的血清型众多，且与其他致腹泻性大肠埃希菌有较多交叉，常难以确定。此菌作用于细胞，使细胞α-肌球蛋白收缩变粗，用免疫荧光法检查，即荧光肌球蛋白收缩（FAS）实验。培养的Hep2细胞，与培养2~6h离心取得的上清液作用后
2.1STEC的快速检验
一般情况下，STEC的临床表现上的特征是不具有发酵山梨醇的特性，可以利用山梨醇作为培养基进行筛选上的实验，在进行实验的过程中可以选择多种培养基进行组合，选择这样的组合的方式原因是抑制除了STEC以外的其他菌种的生长，这样可以让实验最终的数据更具有准确性与可参考性。也更利于后续实验结束以后的分离提取。将实验后的结果进行分离后，将不发酵山梨醇的生长出的白颜色的菌落进行提取，并制作血清型上的鉴定，需要采取的快速的方式，原因是菌落一旦离开进行培养的环境以后，生长的势头就会减弱，随之减弱的还有菌株的活性。实验的方法主要是O157抗体上的Latex粒子实验，这种实验方法可以对O157新型STEC做快速的诊断。虽然这种方法初见成效，但是最近的科学研究指出现有一种新型的可迅速发酵的山梨醇STEC，在进行实验的过程中STEC的菌群数量比一般正常的实验的结果要多很多，并且同样可以引起结肠炎等临床上的症状，所以这也说明山梨醇实验的具有局限性，不能作为唯一的实验指标。面对这样的情况最好的措施继续在实验的过程中寻找新的方法。
在STEC鉴定的众多方法有一种可以应用于很多菌种检验的是快速的荧光或色原底物法，这种方法检验的原理是利用STEC中的β葡萄糖醛酸酶上的阴性特点，利用生长的菌落或是具有荧光特点的底物进行快速实验，可以在20分钟之内将结果制作出来，如果此时才采用的是含有底物的培养基进行实验的话，就需要等到第二天再观察得到的结果。如果在实验的过程中不能将结果进行确定，可以将血清型上的结果作为参考的数据。
2.2EIEC的快速检验
针对于EIEC上的检验方法需要根据EIEC上的基本特征进行选择，这种菌种自身的特点是运动时没有明显的动力，对于乳糖上的表现是不发酵，进行检验的过程中，一般情况下人们比较喜欢利用生化检验法进行实验，因为这种方法对于EIEC与其他菌种上鉴别具有较好的效果，但是有一点需要注意的是EIEC进行实验的过程中表型上的特征不是很稳定，所以在实验体的选择上一般会采用经典的豚鼠角膜进行侵袭上的实验。
2.3EAEC快速检验
EAEC可以在肉汤的培养基中生长，生长到一定程度就会形成一层较厚的菌膜，这层菌膜就可以作为筛选上的方法，将基因上的检查作为最后的参照，可以将会结果进行最后的鉴定。最近的研究发现生物膜技术也可以用来进行鉴定EAEC，因为EAEC毒力基因会与此种菌的aggR、set1A、aatA产生一定的联系，可以进行检验。
3.结语
在进行致泻大肠埃希菌的检验技术进行科学研究的过程中，可以采取的方法有很多。但是众多的方法中最为实用有效的还是基因芯片上的研究技术，因为基因芯片进行实验的结果具有可靠的性与准确性，并且在这一个实验中可以将多种病原体的存在给检验出来，这种检验上的方法已经得到很多专家与学者的推荐。
参考文献：
[1]余涛.致泻性大肠埃希菌流行状况及耐药性研究[D].浙江工业大学2014
[2]张敏.2013年杭州市腹泻病原谱调查和致泻性大肠埃希菌特征分析[D].浙江大学2015
[3]杨永刚.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分型及流行现状[D].浙江大学2014
论文作者:姜羽亭
论文发表刊物:《健康世界》2016年第25期
论文发表时间:2017/1/6
标签：粪便论文; 大肠论文; 患者论文; 大肠杆菌论文; 培养基论文; 菌种论文; 性大论文; 《健康世界》2016年第25期论文;