高山植物水母雪莲的组织培养,本文主要内容关键词为:高山论文,水母论文,植物论文,组织论文,此文献不代表本站观点,内容供学术参考,文章仅供参考阅读下载。
雪莲是一类包括菊科风毛菊属雪莲亚属和雪兔子亚属的药用植物,通常生长在气候多变,冷热无常,雨雪交替高山雪线附近。水母雪莲(或水母雪兔子)属雪兔子亚属,是一种高山稀有的名贵药用植物,地上部分可入药;治炭疽、风湿关节炎、下死胎、高山反应等症。经现代医学药理实验证明,对风湿关节炎、引产和抗早孕有效。由于雪莲种子成熟时,高山地区已是大雪季节,不易采集到种子,造成引种栽培上的困难。且由于人类过度的采集、挖掘,雪莲已处于濒危状态。本文选择青海高原生长的水母雪莲为研究对象,探索其组织培养方法,便于雪莲的保护、开发与利用。
材料与方法
实验材料
水母雪莲(saussureamedusa),取自青海省祁连山脉海拔4,150m冷龙岭的流石坡(冰雪碎石带)。该植物的生物学特性为:多年生草本,株高5~20cm,全株密被白色绒毛,根肉质粗壮,茎直立,顶部稍膨大,下部和茎部被褐色枯存叶柄,茎中下部叶具宽而长的柄,柄长2~5cm,叶片形成扇形,边缘具条状裂齿,长宽相等,长2~25cm。头状花序,密集呈半球形,总苞筒状,宽约5mm,花果期7~9月(青海经济植物志,1987)。
实验方法
取水母雪莲叶片洗净,用95%乙醇漂洗3次,之后用5%次氯酸钠消毒10~15分钟,无菌水漂洗3次,将叶片切割成02cm×02cm的小块接种,以MS为基本培养基,附加有不同浓度的6~BA、NAA,培养基的pH为58,琼脂08%,蔗糖深度2%~3%。接
种后于培养箱中培养,培养箱温度(昼/夜)控制在22/18℃。
结果与讨论
愈伤组织的诱导叶片外植体在MS+BA2+NAA0.2的培养基上诱导14天后,愈伤组织开始形成,所得愈伤组织疏松,为粉红色。在MS+2.4-D1+KT0.1的培养基上培养,色素逐渐消失,愈伤组织变为白色。粉红色雪莲愈伤组织细胞内淀粉粒丰富,而且在低温锻炼前后含量变化不大。本实验诱导得到的粉红色的愈伤组织生长较快,每两周就要继代一次。该愈伤组织在低温下(4~5℃)甚至0℃冰箱中也能生长。
芽的诱导
将粉红色愈伤组织转移到MS+BA0.5+NAA0.05的培养基上,一周后在愈伤组织上即可诱导出幼芽,伸长后即成为明显的小苗。为了更好地促进芽的分化与伸长,将生长素的浓度降低,两周后转移到MS+BA0.5+NAA0.025的培养基上。本实验证明,雪莲是喜低温植物,无论是愈伤组织还是组培苗都需在较低温度下才能生长良好,超过25℃愈伤组织逐渐变褐,组培苗枯死,较大温差也是促进其生长的有利因子。
幼苗生根
将从愈伤组织分化出的幼苗移植到MS+NAA0.2的生根培养基上,大约7天后,即开始直接从茎基部长出不定根。3周后已形成粗壮的根。
水母雪莲的组织培养研究,以往还未见报道。本研究首次探索了此种植物的组培过程,并发现其喜低温的特性,这同水母雪莲生长环境密切相关。本研究为水母雪莲这种名贵药材的人工繁殖及资源保护奠定了基础,具有潜在的应用价值。