沈思彦通讯作者 盛慧明上海市同仁医院 上海 ２００３３６ 基金项目:医学检验优势专科项目(２０１２QZK０１)资助;同仁重点培育学科检验项目(TR２０１４XK２２)资助
【摘要】 目的 通过粪便血红蛋白试验与转铁蛋白试验联合检测,提高消化道出血的检出率.方法 对１６０例消化道出血的患者及４０例健康人的粪便标本分别用化学法(还原酚酞法)、单克隆抗体胶体金法进行隐血检测.化学法检测血红蛋白、单克隆抗体胶体金法检测血红蛋白(Hb)和转铁蛋白(Tf).结果 化学法检测上消化道出血的阳性率为４５．７％,检测下消化道出血的阳性率为５６．８％,检测健康组阳性率为１２．５％;血红蛋白(hb)单克隆抗体胶体金法检测上消化道出血的阳性率为４８．６％,检测下化道出血的阳性率６７．０％,检测健康组阳性率为２．５％;转铁蛋白单克隆抗体胶体金法检测上消化道出血的阳性率为４１．７％, 检测下消化道出血的阳性率６３．６％,检测健康组阳性率为２．５％;联合检测法(血红蛋白与转铁蛋白同时检测,有一项阳性即为阳性)检测上消化道出血的阳性率５２．８％,下消化道出血的阳性率为７０．４％,健康组阳性率为２．５％.结论 采用血红蛋白与转铁蛋白联合免疫法检测,可提高消化道出血的阳性检出率[１]. 【关键词】 粪便隐血; 化学法; 单克隆抗体法; 转铁蛋白【中图分类号】R４４６．１【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１０－００１１－０１
消化道出血是临床常见症状之一,常规粪隐血试验可协助临床医生及时发现消化道出血(特别是少量出血),从而进一步明确消化道出血原因.已知的化学法易出现假阳性结果,是因为易受饮食和药物的影响.胶体金法与化学法相比,灵敏度、特异性都有了很大的提高,在临床上已得到广泛应用,但由于Hb易受胃内各种消化酶的作用和肠道内的细菌分解的作用而变性,减弱免疫反应故结果易出现假阴性.同时测定Hb与Tf,使消化道出血性疾病的阳性检出率有明显的提高.为了探讨Hb与Tf联合检测在临床上的应用价值, 我们选择了本院１６０例临床诊断有消化道出血的患者和４０例健康者分别用三种方法检测.现将结果报告如下.
１ 材料与方法１．１ 材料①还原酚酞试验(化学法)所用试剂,本院自制.②大便隐血诊断试纸(单克隆抗体胶体金法),生产厂家:万华普曼生物工程有限公司.③转铁蛋白胶体金诊断试纸(单克隆抗体胶体金法),生产厂家:万华普曼生物工程有限公司. １．２ 方法检测血红蛋白(Hb)化学法即还原酚酞法,利用血红蛋白中含铁血黄素催化H２O２,释放新生态氧,氧化还原酚酞,产生紫红的颜色,据此判断结果[２];检测血红蛋白(Hb)单克隆抗体法,采用胶体金双抗体夹心法;检测转铁蛋白(Tf) 单克隆抗体法,采用胶体金免疫夹心法. １．３ 研究对象经本院临床确诊有消化道出血的患者１６０例和健康者４０例.
２ 结果消化道出血患者与健康者粪便中Hb和Tf检出结果的比较见附表.从附表中看出化学法在检测健康组中出现了１２．５％的假阳性率.而血红蛋白单克隆法与转铁蛋白单克隆法仅分别出现一例阳性,说明在化学法检测健康组中有４例系假阳性,经证实在检测前均食入了动物肉类.
附表 各组粪便中化学法检测Hb与Hb、Tf的单克隆抗体胶体金法联合测定的结果比较(％)
３ 讨论粪便隐血是检测消化道出血最常用的方法之一,也是最重要的方法.目前化学法是大多数实验室所采用的方法,但是化学法的影响因素太多,缺乏准确性和特异性,当患者食入动物的肉、血、肝脏及VitC、铁剂、中药、富含叶绿素的食物等干扰物时,化学法易出现假阳性结果.化学法在消化道出血患者中的检率略低于血红蛋白单克隆法和转铁蛋白单克隆法.因为血红蛋白化学法的检测范围在０．５μg/ml以上,而血红蛋白单克隆法检测范围是大于或等于０．２μg/ml,转铁蛋白单克隆法检测范围是大于或等于１０ng/ml.目前目前单克隆抗体可以做到半定量检测,当出现阳性结果时,可以在试纸条的前端滴加厂家提供的过氧化氢,使前端试纸变色,通过颜色的深浅判断阳性的强弱(１＋,２＋,３＋,４＋),因此已经开始逐步取代化学法,帮助临床上判断消化道出血,起到一个正确引导的作用. 从附表中可看出上消化道出血的患者,转铁蛋白单克隆法的敏感性低于血红蛋白单克隆法,这是由于在血液中Hb和Tf的比值为５１．２:１,而粪便中Hb和Tf的比值为５．４:１,尽管血红蛋白在胃肠内受到消化酶和细菌的作用易变性,转铁蛋白在肠道内有抗菌能力强,性质比较稳定的特点,但如果出血很少,那么转铁蛋白检测法则达不到它的检测下限,因此易出现假阴性结果.而联合检测血红蛋白和转铁蛋白时发现阳性率明显提高,为５２．８％,说明在检测上消化道出血时有一部分病例,用单克隆法不能测出Hb,以至出现了假阴性,
原因可能有三:①过量大出血而致反应体系中抗原过剩出现前带现象;②上消化道出血后,血红蛋白或红细胞经过消化后已不具有原来的免疫原性,抗原性发生改变;③部分病人血红蛋白与单克隆抗体不匹配而致假阴性[３].从附表中还可看出在下消化道出血患者中转铁蛋白单克隆法检出阳性率仍较血红蛋白单克隆法低,这是因为约１０％的病例出现转铁蛋白值较低的现象[４].已知遗传性无转铁蛋白血症,各种恶性疾病,炎症为主的多种疾病(如手术、创伤、心肌梗死、感染等均可导致转铁蛋白值低下,Tf为负性急性时相反应蛋白[５], 只有大肠癌患者的粪便中会出现大量的Tf),因此这些情况下,转铁蛋白单克隆抗体检测结果为阴性.联合检测Hb和Tf发现阳性率为７０．４％,这可能是由于有一部分消化道大量出血的病例,血红蛋白单克隆法测定隐血很容易出现前带现象,造成假阴性,而通过Tf测定可以将这部分假阴性结果检出,起到弥补作用,提高检出率.通过上述比较我们得出,联合检测Hb和Tf对检测消化道出血更具有临床意义,可起到优势互补的作用.
参考文献[１] 杨明,丛玉隆,章子其．转铁蛋白与血红蛋白同时检测消化道出血[J]．临床检验杂志,２００３,２１(２),８３—８５． [２] 叶应妩,王毓三,申子俞．全国临床检验操作规程[M]．第３版．南京:东南大学出版社,２００６:３１０—３１１． [３] 马小露,李艳莲．血红蛋白、转铁蛋白联合免疫法检测便潜血在临床中的应用[J]．大连医科大学学报,２００３,２５(４):２７８—２８０． [４] 三好博文．免疫学便潜血:粪便中血红蛋白、转铁蛋白同时检测的实用性[J]．日消集检志１９８９,８３(１):９７． [５] 周新,涂植光．临床和生物化学和生物化学检验[M]．第３版．北京:人民卫生出版社,２００５:５７—５８．
论文作者:沈思彦通讯作者 盛慧明
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年9月供稿
论文发表时间:2016/2/23
标签：消化道论文; 血红蛋白论文; 阳性论文; 蛋白论文; 胶体论文; 隐血论文; 化学论文; 《中国综合临床》2015年9月供稿论文;