李慧义[1]1997年在《1. 左旋紫草素生物转化研究 2. 牛蒡子中木脂素成分分析方法研究》文中研究表明本论文包括两部分内容：左旋紫草素的生物转化研究和牛蒡子中木脂素成分的分析方法研究． 一、本论文对左旋紫草素(以下简称紫草素)的代谢转化进行了研究。首先建立了紫草素代谢样品的分离分析方法，并将此方法用于紫草素的体外代谢研究，优化了体外代谢系统，其后并用于体内代谢转化的研究。主要包括以下几个方面： 1．根据文献报导，采用大鼠肝微粒体混合功能氧化酶P—450催化的体外温孵代谢系统对紫草素进行代谢，用RP-HPLC作为分离条件，并建立梯度及恒组成RP-HPLC／二极管阵列检测器(DAD)分离检测代谢产物的方法。以此为检测手段，考察了温孵系统的组成、不同给药方式及代谢时间、PB诱导与否对代谢结果的影响，优化了代谢体系。考察了S9和微粒体温孵方法代谢结果的异同。结果表明，紫草素有7个与其UV光谱相似的代谢产物，其中有3个含量相对较高。 2．建立LC-ESP-MS方法，对紫草素大鼠肝微粒体体外温孵之提取物进行分离并对其结构作初步推断。优化了色谱柱、固定相、流动相组成及流速，以匹配LC-MS。采用柱后补偿技术，选择负离子模式进行检测，并对柱后补偿流动相及流速进行优化，以达到较高的灵敏度。通过调整CID电压，得到了原药及代谢产物的碎片峰。提高CID电压，碎片峰和[M-1]峰的丰度比例亦相应提高，从而进一步确证了其相关性。结果表明，紫草素的3个主要代谢产物分别是在萘醌环上加羟基形成的，其中S-1为加双羟基，S-2，S-3为加单羟基代谢物，但羟基的具体位置无法确定。 3．采用制备HPLC方法对紫草素代谢产物进行分离，因紫草素及其代谢产物的不稳定性，分离过程中采取了快速、避光、冰冻等方法，提取得到了2个代谢物纯品，并用NMR、MS进行结构鉴定。结果表明，S-3为2-OH，S-2为6-OH或7-OH取代。
刘抗伦[2]2008年在《牛蒡子的化学成分研究与抗肿瘤作用初步研究》文中进行了进一步梳理牛蒡子(Fructus arctii)为菊科(Compositae)牛蒡属植物牛蒡的干燥成熟果实,属辛凉解表药,具疏散风热、宣肺透疹、消肿解毒之功效;用于治疗风热感冒、咳嗽痰多、咽喉肿痛、斑疹不透、风疹作痒、痈肿疮毒等症。自1929年日本人田川越等从牛蒡子中获得牛蒡苷以来,关于牛蒡化学成分的研究取得了重要进展,前人对化学成分及其抗肿瘤、抗病毒作用进行过研究,从牛蒡种子,茎叶和根中获得了多种化合物,主要有木脂素,脂肪油及有机酸类化合物,硫炔类,挥发油类,倍半萜,三萜,糖,蛋白质等,其中牛蒡子苷和牛蒡子苷元具有多种生物活性。但对其他化学成分的药理报道还不多。为了进一步寻找该植物的有效成分,本项研究对其化学成分进行了分离、鉴定和体外抗肿瘤作用研究,以期有新的发现,为牛蒡子的深入研究和开发应用奠定基础。牛蒡子乙醇提取物的氯仿萃取部分经过硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、SephadexLH-20凝胶柱层析、半制备高效液相色谱分离,得到13个化合物。运用光谱分析(UV、MS、ESIMS、1D-NMR,2D-NMR)鉴定了13个化合物的结构,这些化合物分别是:异牛蒡酚C(isolappaol C)(1)、牛蒡酚C(lappaol C)(2)、牛蒡酚H(lappaol H)(3)、油酸(oleie acid)(4)、牛蒡酚F(lappaol F)(5)、牛蒡子苷元(arctigenin)(6)、罗汉松脂素(matairesinol)(7)、牛蒡酚B(lappaol B)(8)、7,8-双脱氢牛蒡苷元[(+)-7,8-didehydroarctigenin](9)、牛蒡子苷(arctiin)(10)、牛蒡酚E(lappaol E)(11)、异牛蒡酚A(isolappaol A)(12)、牛蒡酚A(lappaol A)(13)。本研究以人慢性髓原白血病细胞K562为靶标,初步测试了从牛蒡子分得的木脂素类化合物对白血病细胞株K562的影响。实验结果显示,lappaol B,isolappaol A,lappaolA对K562细胞的IC_(50)分别为38.5μg/ml,53.5μg/ml,51.1μg/ml。
邵晶, 郭玫, 任远, 余晓晖[3]2016年在《大孔树脂富集纯化牛蒡子中木脂素的工艺研究》文中认为目的:优化筛选大孔树脂富集纯化牛蒡子中木脂素的工艺条件。方法:以牛蒡苷、牛蒡苷元的比吸附量、比解吸量、吸附率、解吸率为指标,采用静态吸附-解吸试验,对比5种树脂的纯化效果;通过静态吸附-解吸附动力学曲线,确定吸附和解吸时间;通过单因素考察,确定解吸剂浓度、上样液浓度、流速等相关参数。结果:D-101型树脂对牛蒡子中木脂素的吸附和解吸性能较好,根据试验结果并结合生产实际,确定工艺条件为:上样液浓度以牛蒡苷计为4.5~6.0 mg/m L,树脂用量(g)与上样液体积(m L)比例为1∶3~1∶4为宜,吸附时间10~11 h,70%乙醇以1.5 m L/min流速动态解吸10~11 h。结论:经D-101型大孔树脂纯化富集后,所得干浸膏中牛蒡苷和牛蒡苷元总量的质量分数提高了2倍以上。木脂素得到有效富集,确定的工艺条件稳定可行,重复性好,可实现工业化生产。该研究为牛蒡子木脂素相关药物的开发提供研究基础,为提高其临床用药价值提供技术支持。
李慧义, 罗淑荣[4]1995年在《RP－HPLC法测定牛蒡子中木脂素的含量》文中提出用ＲＰ－ＨＰＬＣ法分离并测定了牛蒡子中５种２，３－二苄基丁内酯型木脂素——牛蒡甙（Ⅰ）、牛蒡酚Ａ（Ⅱ）、牛蒡酚Ｆ（Ⅲ）、牛蒡甙元（Ⅳ）、牛蒡素Ｂ（Ⅴ）。以安定为内标，分析柱Ｃ１８，甲醇－水－乙腈－四氢呋喃（５７：４９：１１：１）为流动相，梯度流速，１．０～１．５ｍ１／ｍｉｎ。检测波长２２０ｎｍ，线性范围０．０２９～０．２４２μｇ，相关系数ｒ＝０．９９９３～０．９９９９，回收率９６．１４～１０４．９９％。本法简便、快速、灵敏。
鞠玫君[5]2008年在《牛蒡子中木脂素类成分的提取工艺研究》文中认为牛蒡子为菊科(Compositae)牛蒡属(Arctium)植物牛蒡(Aretium lappa Linne)干燥成熟果实,为常用中药。采用硅胶柱色谱,反相色谱以及高效液相色谱对牛蒡子提取物的化学成分进行研究,分离出6个化合物,根据其理化性质和光谱学数据,确定6个化合物分别为牛蒡苷、牛蒡苷元、罗汉松脂素、Lappol A、β-谷甾醇和胡萝卜苷。其中制备了大量的牛蒡苷和牛蒡苷元标准品提供给国家药典委员会。在提取工艺研究中,分别对牛蒡子提取方法,提取用的溶剂及其剂量进行了考察,并采用高效液相色谱法对提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元进行了含量测定,选择最佳的提取工艺。采用正交试验优选了牛蒡子原药材酸水解制备牛蒡苷元的方法,并通过高效液相色谱对酸水解提取物中牛蒡苷元进行含量测定,确定了牛蒡子原药材直接制备牛蒡苷元的方法。本文用牛蒡苷元抑制α-葡萄糖苷酶的活性研究,证实了牛蒡苷元单一化合物具有降糖活性。同时也进行了牛蒡苷元对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌试验,测定出了牛蒡苷元的最小抑菌浓度。结果表明,牛蒡苷元单体对二者的抗菌效果较好,最小抑菌浓度为20mg/ml。本研究得到国家药典委员会课题支助。
李孝庆[6]2013年在《牛蒡子中木脂素类成分抑制人前列腺癌PC3细胞增殖及其机理研究》文中指出目的研究牛蒡子苷(Arctiin)、牛蒡子苷元(Arctigenin)及牛蒡酚F (Lappaol F)对人前列腺癌PC3细胞增殖的影响,并探讨其相关机制。方法采用不同浓度的Arctiin、Arctigenin及Lappaol F作用于PC3细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测对细胞增殖的影响；瑞姬氏染色观察用药前后细胞形态变化；Annexin-V FITC/PI双染结合流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况；PI单染-流式检测法检测不同浓度下的三种药物对细胞生长周期的影响；Western-blot法检测凋亡相关蛋白bcl-2、Bax和Caspase3的表达情况。结果(1) Arctiin (0.313-20μmol/L)、Arctigenin (0.313-20μmol/L)及Lappaol F(20-120μmol/L)均能显著抑制PC3细胞的增殖,此抑制作用均具有时间和浓度依赖性(2)瑞姬氏染色结果显示：Arctiin (5μmol/L)或Arctigenin (5μmol/L)作用细胞48h,部分细胞胞膜回缩,细胞质减少,胞膜紧贴胞核,胞液纤维网状结构；Lappaol F (100μmol/L)作用细胞48h,部分细胞体积缩小,细胞质凝聚,细胞膜固缩并伴有出芽。(3)Annexin-V FITC/PI双染结合流式细胞术检测发现：与空白对照组比较Arctiin (1.25-20μmol/L)或Arctigenin (0.625-20μmol/L)均可显著增加Annexin-V FITC/PI双染阳性率(P<0.01或P<0.05),P1单染阳性率在高浓度组(Arctiin5-20μmol/L或Arctigenin2.5-20μmol/L)时也显著增加(P<0.01),但Annexin-V FITC单染阳性率均无明显变化,说明Arctiin和Arctigenin并未诱导PC3细胞发生凋亡,而是诱导其发生了坏死；与空白对照组比较,Lappaol F可显著增加FITC单染阳性率(P<0.01),即细胞早期凋亡率,说明Lappaol F可诱导PC3细胞发生凋亡(4)细胞周期检测结果显示：Arctiin和Arctigenin均能不能程度的升高细胞的S期比例,同时降低G0/G1期比例,但是降低或升高的比例较小,Sub G1峰的比例(Sub G1/%)与对照组比较并无明显变化,均低于3%,这一结果同前面流式细胞术检测凋亡的结果相一致,即更进一步证实,Arctiin或Arctigenin诱导PC3细胞死亡的方式是非凋亡性的,同时也提示提示Arctiin和Arctigenin并不是以细胞周期为靶点,通过干扰细胞周期来抑制PC3细胞增殖,其细胞毒性亦与细胞周期没有很大的关系；不同浓度的Lappaol F均能不同程度的升高细胞G2/M期比例,此作用并不完全依赖于药物浓度大小,这一结果提示,Lappaol F阻滞细胞周期于G2/M期,抑制了细胞的分裂,导致细胞增殖减慢。同时Lappaol F作用的组与空白对照组比较Sub G1峰所占的比例随着药物浓度的增加均不同程度升高,说明细胞凋亡的比例均有不同程度升高,更进一步证实了Lappaol F诱导PC3细胞死亡的方式是细胞凋亡(5) Werstern-blot分析显示,Arctiin或Arctigenin作用细胞48h时,可显著降低bcl-2表达水平(P<0.01),但对Bax和Caspase-3蛋白的表达无明显影响(P>0.05)。不同浓度的Lappaol F作用细胞48h,bcl-2表达水平显著降低(P<0.01),同时Bax的表达水平显著升高(P<0.01),但对Caspase3的表达无明显影响(P>0.05)。结论Arctiin或Arctigenin均能显著抑制体外PC3细胞增殖,并呈现出一定的剂量效应,时间效应关系。Arctiin或Arctigenin诱导PC3细胞死亡的方式以坏死为主,这一作用可能与其能够下调bcl-2的表达相关,但对细胞周期阻滞作用并不明显,提示Arctiin或Arctigenin并不是以细胞周期为靶点,通过干扰细胞周期来抑制PC3细胞增殖,其细胞毒性亦与细胞周期没有很大的关系。Lappaol F能显著抑制体外PC3细胞增殖,并呈现出一定的剂量效应,时间效应关系。Lappaol F可诱导PC3细胞发生凋亡,这一作用与其可以下调bcl-2表达,同时上调Bax的表达相关,并且也能将细胞周期阻滞于G2/M期,抑制了细胞的分裂,进而进一步阻滞了细胞增殖。
边巴次仁, 尼玛仓决, 赤列旺久, 常瑛, 何斌[7]2018年在《中草药牛蒡子化学成分及药理研究进展》文中进行了进一步梳理牛蒡子是一种常用中药,性寒,味辛、苦,归胃、肺经,具有疏散风热、宣肺透疹的功效,临床上用于治疗外感风热、咳嗽气喘、咽喉肿痛等症。综述了牛蒡子的主要化学成分木脂素类、挥发油类、脂肪油类及帖类及其抑菌、抗病毒、抗肿瘤、治疗肾病、降血糖等众多药理作用现状,旨在为牛蒡子的化学成分及其药理作用的研究与开发提供参考,指导传统中草药牛蒡子在畜牧业养殖生产中的临床应用。
蔡恩博, 郭雪, 赵岩, 刘享享, 王大龙[8]2015年在《牛蒡子化学成分研究进展》文中提出牛蒡子主要分布于我国东北,有着广泛的药理活性,目前已分离出百余种化合物,包括木脂素、挥发油和萜类等。本文结合了国内外牛蒡子的研究现状,并按照化合物结构类型进行了归纳,综述了牛蒡子的化学成分研究进展,为牛蒡子的进一步开发利用提供一定参考。
米靖宇, 宋纯清[9]2002年在《牛蒡子中木脂素类化合物的抗肿瘤及免疫活性》文中进行了进一步梳理目的 :综述牛蒡子中木脂素类化合物的抗肿瘤及免疫活性。方法 :对近十年来国外对牛蒡子中木脂素类物质的药理活性研究文献进行了检索和综述。结果 :总结了牛蒡子中木脂素类化合物的抗肿瘤及免疫活性研究情况。结论 :牛蒡子中的木脂素类化合物具有抗肿瘤和免疫活性的有效成分主要为牛蒡子苷元 ,这为人们深入开发这一资源提供了很好的依据
刘抗伦[10]2013年在《牛蒡子木脂素成分的抗肿瘤作用和机理研究》文中研究指明癌症是全世界范围内的一个主要的健康问题。因为有些肿瘤患者死于对现有的抗癌药物不敏感,或者在经过一定时间的治疗,对已有药物产生耐药性,所以在目前,研究和开发新的抗癌疗法和抗癌药物是有价值和迫切需要的。本论文的研究目的是在天然产物中发现抗癌的先导化合物并研究其体内和体外的作用效果和机理。背景与目的根据现有文献和我们以前的实验结果数据显示,在中药牛蒡子中,两个木脂素类化合物牛蒡子苷元和牛蒡子苷发现对一系列肿瘤细胞具有抗肿瘤作用。牛蒡子苷元,牛蒡的种子中发现的一种活性化合物,可以根除缺乏营养的肿瘤细胞。在除了它对不同肿瘤细胞株的广谱抗肿瘤活性结果,例如胰腺癌细胞系PANC-1和AsPC-1,牛蒡子苷元对于在葡萄糖剥夺条件下的癌细胞表现出一个高选择性细胞毒作用[91]。牛蒡子中的拉帕酚B,拉帕酚A和异拉帕酚A对于白血病K562细胞的IC50分别为38.5μg/ml,53.5μg/ml,51.1μg/ml[137]。因此,研究牛蒡子中木脂素类化合物的抗肿瘤活性及作用机理,从而发现安全有效地抗肿瘤先导化合物仍具有十分重要的意义。方法(1)牛蒡子提取物氯仿部位经由正相硅胶,SephadexLH-20凝胶色谱,ODS-B反相硅胶色谱分离出牛蒡子苷,牛蒡子苷元和LappaolF。用波谱解析的方法,对其结构进行了鉴定。对所有分离的化合物的光谱数据进行了测定;在TU-1901紫外光谱仪(普析通用,中国)上测定紫外吸收光谱;在API 2000的LC/MS/MS测量设备测定电喷雾电离-质谱(ESI-MS);在Bruker drx-400记录1H和13C核磁共振谱(NMR),以四甲基硅烷(TMS)仪器使用作为内标。(2)牛蒡子苷元,牛蒡子苷,和LappaolF,采用MTT法和平皿克隆法对肿瘤细胞株进行药效学检测。通过流式细胞仪测定细胞周期。蛋白质印迹法法分析研究化合物作用机理。(3)在HeLa肿瘤细胞荷瘤裸鼠体内对Lappaol F,牛蒡子苷和牛蒡子苷元进行药效学试验。结果1.牛蒡子中木脂素类化合物的制备。通过各种色谱方法分离得到牛蒡子中的三个化合物,1-3。通过光谱解析,结合化合物的薄层层析结果和紫外光谱数据,与文献1H和13C NMR数据比较,化合物1-3分别被确定为牛蒡子苷元,LappaolF和牛蒡子苷。通过戴安P680型高效液相色谱仪进行纯度测定。测定条件:PDA-100二极管矩阵检测器设定吸收波长为280 nm。色谱柱为菲罗门Luna,柱长4.6 x 150mm,柱填料孔径5μm,柱温35℃,甲醇和水为流动相,比例为47%的甲醇和53%水(体积/体积),流速1.0mL/min。LappaolF的出峰时间在15.93分钟。2.牛蒡子木脂素的体外抗肿瘤药效学研究LappaolF呈时间和剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖,对MCF-7,MDA-MB-231和RKO细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为13.3,16.8和25.2μM。同时,LappaolF对人正常乳腺MCF-10A细胞,3天或治疗时间延长到6天处理时表现出极小的细胞毒性。3.Lappaol F的抗肿瘤作用机制.流式细胞仪分析结果表明,Lappaol F显著增加了 2N G1期细胞比例或4N G2/M期细胞比例。在MCF-7和HeLa细胞中,细胞主要被主要阻滞在2N G1期。实验结果显示,LappaolF处理的MCF-7细胞中在G1期观察到的数量显著的增加(从65%到87%);Lappaol F处理的HeLa细胞中在G1期观察到的数量显著的增加(从56%至67%)。同时,LappaolF处理的HeLa细胞中在G1前期观察到的数量也显著的增加(从1%至15%)。在MDA-MB-231和RKO细胞中,细胞主要被主要阻滞在4N G2/M期。实验结果显示,LappaolF处理的MDA-MB-231细胞中在G2期观察到的数量显著的增加(从21%到45%);Lappaol F处理的RKO细胞中在G2期观察到的数量显著的增加(从19%到 71%)。研究结果表明,LappaolF的分子机制是通过调节细胞周期依赖蛋白阻滞剂的表达水平来诱导细胞周期阻滞。实验显示,Lappaol F处理的MCF-7细胞,CDK抑制剂p21和p27蛋白的表达水平明显升高,而CDK2,cyclinB和CDK1的水平都显著下降。Lappaol F处理的HeLa细胞,CDK抑制剂p21和p27蛋白的表达水平明显升高,而cyclinB和CDK1的水平都显著下降。LappaolF处理的MDA-MB-231细胞,CDK抑制剂p21和p27蛋白的表达水平明显升高,而CDK2,cyclin B和CDK1的水平都显著下降。LappaolF处理的RKO细胞,CDK抑制剂p21和p27蛋白的表达水平明显升高,而cyclinB和CDK1的水平都显著下降。机理研究表明,LappaolF可以有效地使肿瘤细胞阻滞在G1和G2期。LappaolF也改变了调节细胞周期的关键调节蛋白p21和p27的表达,从而使CDK2,cyclin B和CDK1的水平都显著下降。因此,Lappaol F是很好的抗肿瘤的先导化合物。4.Lappaol F的体内抗肿瘤药效学研究天然产物的活性成分的体外筛选和机制研究为其称为候选药物提供了基础,但它还需要进行体内的药效学研究。在前一节中,确定了中药来源的抗肿瘤先导化合物Lappaol F在多种肿瘤细系中具有抗肿瘤作用并对其机理进行了研究。接下来我们进行了 LappaolF的抗肿瘤体内药效学试验。对雌性裸鼠皮肤用75%乙醇消毒,用1ml、5号针头的注射器皮下注射100μL HeLa肿瘤细胞悬浮液(5X107细胞/mL),建立肿瘤异种移植模型。观察裸鼠情况,是否有悬浮液泄漏,出血,血肿,呼吸等生命体征。肿瘤细胞注射9天后,裸鼠的肿瘤平均体积为90 mm3-290 mm3,随机分为3组,每个治疗组小鼠的肿瘤体积平均初始分别为161.28±23.9 mm3(vehicle),160.7± 17.7 mm3(Lappaol F 5 mg/kg)和 144.5±20.5 mm3(Lappaol F 10 mg/kg)。Vehicle 组:等量DMSO加吐温80在5%葡萄糖溶液中,5 mg/kg/d,N = 7,尾静脉注射15天。Lappaol F 预防剂量组:5mg/kg/d,N = 7,尾静脉注射 15 天。Lappaol F组:10mg/kg/d,N =6,尾静脉注射15天。在实验中,Lappaol F处理的HeLa细胞荷瘤裸鼠的肿瘤生长比用空白溶剂处理的荷瘤裸鼠中的要缓慢。经过15天给药期间,在LappaolF处理过的小鼠的肿瘤体积为 634.8±54.9(LappaolF10mg/kg)和 820.3±86.0mm3(LappaolF5mg/kg),远小于溶剂对照组肿瘤体积为1765.3± 91.8mm3(P<0.001)。在实验结束时,对比各组裸鼠的剥离肿瘤平均重量。在肉眼观察下,肿瘤在Lappaol F给药组小于溶剂对照组。肿瘤重量在Lappaol F给药组分别为0.40±0.07g(10mg/kg)和0.53±0.07g(5mg/kg),与对照组相比,统计学上有显著差异。在给药过程中,LappaolF和空白对照组相比,动物体重没有明显下降。在本实验中,Lappaol F显著抑制肿瘤的生长,荷瘤裸鼠没有任何可观察到的毒性或副作用。LappaolF治疗的小鼠与空白对照组的裸鼠有相似的体重曲线。给药15天后,LappaolF的两个剂量组与空白对照组体重增加相比,差异无统计学意义(P>0.05)。Lappaol F给药15天后,与空白对照组比较,抑制肿瘤的生长达到54%(5 mg/kg/day,P<0.001,N = 7)和 64%(10mg/kg/day,P<0.001,N = 6)。同时这个结果也表明,增加Lappaol F的剂量从5 mg/kg/day,到10 mg/kg/day,可以进一步减少荷瘤裸鼠的肿瘤体积和重量。更加重要的是,我们在Lappaol F(5 mg/kg/day和10 mg/kg/day)给药组,在15天的治疗期中没有观察到裸鼠鼠中的死亡或体重减轻。这些结果表明,Lappaol F可以抑制HeLa荷瘤裸鼠肿瘤的生长以及裸鼠对Lappaol F具有良好的耐受性。4.Arctiin和Arctigenin的体内抗肿瘤药效学研究在对牛蒡子中木脂素成分Lappaol F的体外抗肿瘤药效学、机制研究和体内药效学研究后,因为和其有相似的化学结构,我们有必要了解Arctiin和Arctigenin这两个牛蒡子中主要成分的抗肿瘤体内作用。对雌性裸鼠皮肤用75%乙醇消毒,用1ml、5号针头的注射器皮下注射100μL HeLa肿瘤细胞悬浮液(5×107细胞/mL),建立肿瘤异种移植模型。观察裸鼠情况,是否有悬浮液泄漏,出血,血肿,呼吸等生命体征。裸鼠的肿瘤平均体积为60 mm3-340 mm3,随机分为4组,每个治疗组小鼠的肿瘤体积平均初始分别为 143.2 ± 21.8 mm3(vehicle),135.4 ± 28.3 mm3(Arctigenin 15 mg/kg),139.3±19 7 19.7mm3(Arctiin15mg/kg)和 141.1±17.6 mm3(Arctiin30mg/kg)。Vehicle组:等量DMSO加吐温80在5%葡萄糖溶液中,5mg/kg/d,N = 9,腹腔注射14天。Arctigenin 组:15mg/kg/d,N = 9,腹腔注射14 天。Arctiin 低剂量组:15mg/kg/d,N=9,腹腔注射14天。Arctiin高剂量组:30mg/kg/d,N = 9,腹腔注射14天。在实验中,Arctiin和Arctigenin处理的HeLa细胞荷瘤裸鼠的肿瘤生长比用空白对照处理的荷瘤裸鼠中的要缓慢。经过14天给药期间,在Arctiin处理过的裸鼠的肿瘤体积为 733.3±88.4(Arctiin30mg/kg)和 795.6±82.9mm3(Arctiin15mg/kg),在Arctigenin 处理过的裸鼠的肿瘤体积为 711.7± 104.9 mm3(Arctigenin 15 mg/kg),远小于溶剂对照组肿瘤体积为1351.7± 122.1 mm3(P<0.001)。我们在 Arctiin(15 mg/kg/day 和 30 mg/kg/day)给药组,Arctigenin(15 mg/kg/day)给药组在15天的治疗期中没有观察到裸鼠鼠中的死亡或体重减轻。这些结果表明,Arctiin和Arctigenin可以抑制HeLa荷瘤裸鼠肿瘤的生长以及裸鼠对Arctiin和Arctigenin具有良好的耐受性。结论与创新1.本研究从牛蒡子的木脂素类成分发现一种新型抗癌先导化合物,Lappaol F。Lappaol F呈时间和剂量依赖性抑制多种生长在人类的各种组织类型的肿瘤细胞株。本研究首次发现:Lappaol F在MCF-7,MDA-MB-231和RKO细胞系的IC50值的为13.3,16.8,25.2 μM。2.本研究首次发现:Lappaol F引起细胞周期G1和G2期阻滞,可以较强的诱导细胞周期依赖蛋白抑制剂p21和p27表达上升,CDK2,cyclin B1和CDK1表达降低。Lappaol F调控的CDK1,cyclin B下降引起的细胞阻滞中,p21和p27起到了至关重要的作用。3.本研究首次对Lappaol F在体内抗肿瘤作用进行研究,并且本研究首次发现,Lappaol F在HeLa肿瘤荷瘤裸鼠体内表现出强烈抑制肿瘤增长作用,且实验动物对其表现出良好的耐受性。实验前,裸鼠肿瘤平均体积144.5 ± 22.4(Lappaol F 10 mg/kg),160.7 ± 19.1(Lappaol F 5 mg/kg)和 161.28 ± 25.8 mm3(空白对照组)。给药 15 天后,Lappaol F 给药组为 634.8 ± 60.1((Lappaol F 10 mg/kg)和 820.3 ± 92.9 mm3((Lappaol F 5 mg/kg),空白对照组肿瘤体积为1765.3 ±99.2 mm3,给药组与对照组相比,统计学上有显著差异(P<0.01).4.本研究首次发现:Arctiin和Arctigenin在荷瘤裸鼠体内对HeLa肿瘤有生长抑制效果。实验前,裸鼠肿瘤平均体积 141.1 ± 17.6(Arctiin 30 mg/kg),139.3 ± 19.7(Arctiin 15 mg/kg)and 135.4 ± 28.3 mm3(Arctigenin 15 mg/kg),143.2 ± 21.8 1mm3(空白对照组)。给药 14 天后,Arctiin 给药组为 733.3 ± 88.4 mm3(arctiin 30 mg/kg)和 795.6 ± 82.9 mm3(Arctigenin 15 mg/kg),Arctigenin 组为 711.7 ± 104.9 mm3(Arctigenin 15mg/kg),空白对照组肿瘤体积为1351.7± 122.1 mm3,给药组与对照组相比有统计学意义(P<0.05).
参考文献：
[1]. 1. 左旋紫草素生物转化研究 2. 牛蒡子中木脂素成分分析方法研究[D]. 李慧义. 中国协和医科大学. 1997
[2]. 牛蒡子的化学成分研究与抗肿瘤作用初步研究[D]. 刘抗伦. 广州中医药大学. 2008
[3]. 大孔树脂富集纯化牛蒡子中木脂素的工艺研究[J]. 邵晶, 郭玫, 任远, 余晓晖. 中药材. 2016
[4]. RP－HPLC法测定牛蒡子中木脂素的含量[J]. 李慧义, 罗淑荣. 药学学报. 1995
[5]. 牛蒡子中木脂素类成分的提取工艺研究[D]. 鞠玫君. 辽宁中医药大学. 2008
[6]. 牛蒡子中木脂素类成分抑制人前列腺癌PC3细胞增殖及其机理研究[D]. 李孝庆. 广州中医药大学. 2013
[7]. 中草药牛蒡子化学成分及药理研究进展[J]. 边巴次仁, 尼玛仓决, 赤列旺久, 常瑛, 何斌. 中国兽药杂志. 2018
[8]. 牛蒡子化学成分研究进展[J]. 蔡恩博, 郭雪, 赵岩, 刘享享, 王大龙. 人参研究. 2015
[9]. 牛蒡子中木脂素类化合物的抗肿瘤及免疫活性[J]. 米靖宇, 宋纯清. 时珍国医国药. 2002
[10]. 牛蒡子木脂素成分的抗肿瘤作用和机理研究[D]. 刘抗伦. 广州中医药大学. 2013