香榧（Torreya grandis cv. merrillii.）是裸子植物红豆杉科榧属常绿乔木，是我国特有的珍稀树种。香榧能够润燥，杀死蛔虫，消除食积，健脾补气，去瘀生新，常用于治疗小儿疳积、虫积腹痛、痔疮等，此外，还用于预防血管老化和冠心病[69-71]。香榧种子、叶子和假种皮均含有大量的黄酮类和酚酸类化合物具有良好的生物活性[72]。本文选取了香榧的不同部位，采用NaNO2-Al(NO3)3显色法和Folin-Ciocalteu法分析了其总黄酮和总酚酸，以期为香榧进一步开发利用提供依据。
1实验材料
采集了浙江省诸暨市赵家镇的香榧的不同部位，种、叶和假种皮，由浙江省诸暨市林业局童品璋教授鉴定。
2实验仪器与试剂
R201B旋转蒸发仪（上海申胜生物技术有限公司），PL2002电子分析天平（梅特勒-托得多仪器有限公司），Multiskan F酶标仪（赛默飞世尔仪器有限公司），WFZ UV-2000紫外可见分光光度计（尤尼克仪器有限公司）。
芦丁（标准品，上海源叶生物科技有限公司），没食子酸（标准品，上海源叶生物科技有限公司），Folin-Ciocalteu试剂（安徽合肥博美生物科技有限公司）。
3实验方法
3.1样品溶液的制备
精确称取香榧树的种、叶和假种皮粉末1.0000 g，用70%乙醇冷浸提取3次，每次6 h，合并提取液，抽滤。滤液置于旋转蒸发仪浓缩，用无水乙醇定容于10 mL容量瓶中，即得样品待测液。
3.2 对照品溶液的制备
用电子天平精密称取芦丁对照品16.38 mg，用无水乙醇定容于100 mL容量瓶中，摇匀，得质量浓度为0.1638 mg/mL的对照品溶液。
3.3总黄酮含量测定
精密量取对照品溶液0、0.5、1.5、2.5、3.5、4.5 mL分别置于10 mL的容量瓶中，加无水乙醇至5 mL，再加5% NaNO2溶液1 mL，混匀，放置6 min，加10% Al(NO)3溶液1 mL摇匀，放置6 min，加4％NaOH溶液3 mL，最后用无水乙醇定容至10 mL，摇匀，放置15 min，以相应的试剂溶液为空白，在510 nm波长处测定吸收度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，经处理分析得到回归方程Y=11.644X-0.0382，R2=0.9964，见图1。总黄酮的含量用芦丁当量RE（Rutin equivalent）表示。
图1芦丁标准曲线
3.4总酚酸含量的测定
根据FC（Folin-Ciocalteu）比色法[74]测定，用电子天平精密称取没食子酸对照品29.42 mg，用蒸馏水定容100 mL容量瓶中，即得到质量浓度为0.2942 mg/mL的对照品溶液。精密吸取没食子酸对照品溶液0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3 mL分别放置于10 mL的容量瓶中，加入0.3 mL福林酚试剂，10% Na2CO3溶液2 mL，用蒸馏水定容，反应30 min，测定在760 nm下的吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，处理分析得到回归方程Y=39.810X+0.0193，R2 =0.9982，见图2。总酚酸含量以没食子酸当量GAE(gallic acid equivalent)表示。
图2没食子酸标准曲线
2.4 实验结果
榧假种皮中的总黄酮和总酚酸含量分别为(4.86±0.30) mg RE/g、(23.59±0.87) mg GAE/g，香榧种子中总黄酮和总酚酸含量是(15.89±1.63) mg RE/g、(16.69±2.34) mg GAE/g，即种子中的总黄酮含量大于假种皮，总酚酸含量小于假种皮。以上实验结果表明，废弃的香榧假种皮可以合理开发利用。
以上实验结果表明，香榧有巨大的应用价值迫切的需要开发利用，研究结果可谓为香榧进一步开发利用提供依据。
致谢：本论文得到绍兴市大学生科技创新项目的支持。
参考文献：
[1]E. Middleton Jr., C. Kandaswami, T.C. Theoharides, The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implications for inflammation, heart disease, and cancer, Pharmacol. Rev., 2000, 52, 673-751.
[2]Evans JL,Goldfine ID, Maddux BA, et al. Oxidative su'eu and stress-activated signaling pathways：a unifying hypothesis of type 2 diabetes[J]. Endocr Rev, 2002, 23, 599-622.
[3]Hagberg, C.E., Mehlem, A., Falkevall, A., Muhl, L., Fam, B.C., Ortser, H., Scotney, P., Nyqvist, D., Samén, E., Lu, L., Stone-Elander, S., Proietto, J., Andrikopoulos, S.,Solm, A., Nash, A., Eriksson, U., Targeting VEGF-B as a novel treatment for insulin resistance and type 2 diabetes. Nature 2012, 490, 426-430.
[4]Hininger-Favier, I., Benaraba, R., Coves, S., Anderson, R. A., & Roussel, A. M. Green tea extract decreases oxidative stress and improves insulin sensitivity in an animal model of insulin resistance, the fructose-fed rat. Journal of the American College of Nutrition, 2009, 28, 355-361.
[5]Hwang, I. S., Ho, H., Hoffman, B. B., & Reaven, G. M. Fructose-induced insulin resistance and hypertension in rats. Hypertension, 1987, 10, 512-516.
论文作者:徐润生※，赵晓佳
论文发表刊物:《科技新时代》2017年12期
论文发表时间:2018/1/29
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