DOI：10.7504/nk2016010203 中图分类号：692 文献标识码：A
摘要：目的 观察吸入性糖皮质激素（inhaled corticosteroids，ICS）对慢性肥厚性鼻炎黏膜组织中转化生长因子（TGF-β1）表达的影响。方法 20例慢性肥厚性鼻炎患者随机分为两组，实验组连续使用布地奈德混悬液雾化吸入1周，对照组连续使用生理盐水雾化吸入1周。所有患者雾化吸入前后分别取鼻腔黏膜行免疫组织化学染色，并做VAS法评估和鼻气道阻力测试。结果 实验组ICS治疗前后鼻黏膜TGF-β1阳性细胞计数差值具有统计学意义（P＜0.05）。VAS鼻塞症状评分差值实验组为2.6±0.37，对照组为0.4±0.31，进行独立样本t检验后，结果具有差异，且有统计学意义（P＜0.05）。鼻气道总阻力差值无统计学意义。结论 ICS能降低慢性肥厚性鼻炎中TGF-β1的表达，能延缓鼻黏膜的纤维化进程。
关键词：慢性肥厚性鼻炎；吸入性糖皮质激素；转化生长因子β1；纤维化
The impact of inhaled corticosteroids on transformation growth factor - beta 1 expression in the tissue of chronic hypertrophic rhinitis
Jiang Qi-chuan, Chen Dong*, Xu Ya-nan, Kang Jian, Chen Jian-guo
(Department of Otolaryngology Head and Neck Surgery. The First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University. 121000, Jinzhou, Liaoning, P.R. China)
Abstract: Objective The aim of this study was to observe the impact of Inhaled corticosteroids (ICS) on transformation growth factor - beta 1 (TGF-β1) expression in the tissue of chronic hypertrophic rhinitis. Methods 10 patients were collected respectively as control group and intervention group.The intervention group was inhaled budesonide for a week,while the control group inhaled normal saline.ResultsCompared with control group, no significant change was found in total nasal passagesresistance. Meanwhile significant changeswere found in visual analogue score (VAS) and the countdifference of TGF-β1 in nasal mucosa between before and afterintervention (P?<?0.05).ConclusionICS has no effect on reducing the symptoms but reduce the expression of TGF-β1and then delay the fibrosis process of nasal mucosa.
Keywords: chronic hypertrophic rhinitis; Inhaled corticosteroids; transformation growth factor beta 1; fibrosis
慢性肥厚性鼻炎是慢性鼻炎的一种，病变主要累及黏膜层和黏膜下层，病情较重者甚至累及骨质，组织呈局限性或弥漫性增生肥厚。目前针对慢性肥厚性鼻炎的治疗方法分为药物和手术，但单纯药物治疗患者症状改善欠佳，近年来国内外均提倡手术治疗为慢性肥厚性鼻炎的首选治疗方案。目前手术方法多样化，但手术仅能改善鼻腔通气结构，缓解患者症状，对于慢性肥厚性鼻炎黏膜病理学改变并没有帮助。在慢性肥厚性鼻炎黏膜的病理变化过程中有学者观察到有类似哮喘患者气道重塑的病理特征：鼻黏膜中的部分上皮纤毛脱落，纤毛上皮化生为复层立方上皮，固有层血管增生扩张，淋巴细胞及浆细胞大量浸润，胶原纤维增生，进而成为不可逆性的病变[1-2]。转化生长因子β1（TGF-β1）可直接影响气道壁I型和Ⅲ型胶原沉积，被认为是哮喘气道重塑的主要调控因子，它能促进纤维化的形成，是刺激成纤维细胞和胶原分泌的主要细胞因子。[3]本研究通过对慢性肥厚性鼻炎患者吸入性糖皮质激素（ICS）治疗前后的鼻黏膜TGF-β1表达，探讨ICS对慢性肥厚性鼻炎鼻黏膜重塑的影响及可能机制。
1 资料与方法
1.1 临床资料
随机选取2015年3月至2015年7月在我院确诊住院并接受手术治疗的慢性肥厚性鼻炎患者20例，其中男14例，女6例，年龄25-53岁，平均年龄47.3岁，病程3-10年。病例全部符合慢性肥厚性鼻炎诊断标准。主要临床表现为鼻塞、流脓涕、头痛、嗅觉减退等，鼻内镜检查可见鼻黏膜增生，肥厚，呈暗红和淡紫色，鼻甲表面不平，呈桑葚样。触诊有硬实感，出现凹陷不易恢复，对1%麻黄素的收缩反应差。排除鼻中隔偏曲、过敏性鼻炎、鼻息肉、鼻窦炎和严重全身疾病患者。
1.2 实验方法
患者随机分为病例组和对照组，每组各10人。对患者做如下操作：1.术前7天做VAS法评估鼻塞程度和鼻阻力检测，2.病例组雾化吸入布地奈德混悬液2000ug/d，对照组持续雾化吸入等量生理盐水，持续7天。3.手术前再次用鼻阻力仪测试鼻气道总阻力。4.治疗前后分别留取部分下鼻甲黏膜组织。
1.3 免疫组织化学染色
TGF-β1免疫组化试剂盒购于福州迈新生物技术开发有限公司，下鼻甲黏膜样本用10%甲醛固定，石蜡包埋，切成4um厚度组织片。按试剂盒说明型免疫组化SP法染色。以细胞内出现棕褐色颗粒阳性标准，在400*显微镜下分别计数四角和中央5个视野阳性细胞个数取平均值。
1.4 统计方法
用spss17.0进行统计处理，对两组用药前后的VAS评分差值、鼻气道总阻力差值和显微镜下TGF-β1阳性细胞计数进行独立样本t检验。
2 实验结果
2.1 VAS评分及鼻阻力测试
VAS鼻塞症状评分差值实验组为2.6±0.37，对照组为0.4±0.31，进行独立样本t检验后，结果具有差异，且有统计学意义（P＜0.05）。鼻气道总阻力差值实验组为0.25±0.11，对照组为0.20±0.14，进行独立样本t检验后，结果具有差异，且有统计学意义（P＞0.05）。见表1。可以得出实验组VAS评分减低，但是客观上鼻阻力未见明显减少。
表1 VAS评分及鼻阻力结果分析
2.2 TGF-β1的表达
光学显微镜下，TGF-β1免疫组织化学染色阳性细胞细胞浆染成棕黄色或棕褐色，主要表达于鼻黏膜上皮细胞、腺体细胞、血管内皮细胞及黏膜下固有层浸润的炎性细胞。实验对象治疗前取的鼻腔黏膜均呈阳性，主要散在分布于上皮细胞及固有层浸润的炎性细胞，呈棕黄色或淡棕色，大部分腺体细胞呈阴性表达（图1，图3），实验组经过ICS治疗后阳性细胞数量明显减少（图2），而对照组阳性细胞未见明显减少（图4）。TGF-β1阳性细胞计数实验组为11.3±0.96，对照组为5.3±0.42，进行独立样本t检验后，结果具有差异，且有统计学意义（P＜0.05）。见表2。
表2 TGF-β1阳性细胞结果分析
图3 对照组用药前下鼻甲黏膜DAB染色*400 图4对照组用药后下鼻甲黏膜DAB染色*400
3 讨论
目前药物治疗和手术治疗是慢性肥厚性鼻炎的主要治疗方法，其中药物治疗以局部运用糖皮质激素、收缩血管剂或鼻腔生理盐水冲洗等为主，往往疗效不佳。手术成为慢性肥厚性鼻炎的常用方法，手术方式以下鼻甲骨折外移术、鼻内镜下鼻甲成形术、鼻腔外侧壁黏膜下下鼻甲骨部分切除术、鼻内镜下低温等离子消融术等居多，这些手术优点在于能减少鼻腔黏膜的损伤，同时改善鼻腔结构，但是无论手术技术怎样改进不能缓解甚至逆转鼻腔黏膜的病理改变。
下鼻甲具有过滤吸入气体,维持鼻腔两侧阻力平衡，调控呼吸气流量的功能,使鼻腔状态适应呼吸道生理需求[4]。下鼻甲黏膜中的腺体分泌腺液,可温化和湿化吸入气体，黏膜上的纤毛持续摆动，使得鼻腔黏液向后方移动至咽部排出，具有清洁鼻腔的作用。慢性肥厚性鼻炎患者下鼻甲肥厚黏膜增生，使鼻腔有效通气面积减少，鼻阻力增强。部分鼻黏膜化生为复层上皮，固有层炎性细胞浸润，血管扩张,纤维层增厚，病变不可逆转,致下鼻甲的生理功能减退,且进一步影响正常的呼吸功能。
目前组织重塑的发生及防治的研究多集中在哮喘、COPD等疾病,机制尚未完全清楚。近年来的研究认为组织重塑是在长期、反复的炎症刺激下，多种炎症细胞和炎性介质及酶共同参与相互作用的结果。TGF-β1是目前已知的众多促气道纤维化因子中作用最强的，是气道重塑研究中的热点和重点，它是参与呼吸道内皮损伤、ECM沉积和组织纤维化、腺体细胞增生等过程的关键调控因子。[5]TGF-β是一组多效应细胞因子，包括TGF-β1、2、3三种亚型，其中以TGF-β1生物活性最强。Verrecchia等[6]研究发现气道上皮细胞和间质细胞中ECM可被TGF-β1直接激活表达，同时蛋白酶抑制剂在TGF-β1的刺激下合成增加，ECM分解减少和沉积增加，进而引发气道组织重塑进程。在结缔组织中，TGF-β1可促进多种生长因子分泌，使纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原的产生增加，进一步促进胶原纤维的形成，加重气道纤维化，促使气道重塑[7]。而本实验中观察到对照组及实验组使用ICS治疗前TGF-β1均强阳性表达于黏膜上皮细胞和腺体细胞，提示TGF-β1参与了慢性肥厚性鼻炎黏膜胶原沉积、纤维化等组织重塑过程。
糖皮质激素具有强大的抗炎作用，可以通过多种途径抑制各种促炎细胞因子和炎症介质的产生。局部应用糖皮质激素最大的优势是：在抗炎、抗水肿的同时，又规避了全身长期应用对下丘脑-垂体-肾上腺素轴功能的不良影响。通过阻断活化的T细胞增殖和Th2细胞因子（IL4、5)合成，下调TGF-β1等细胞因子的表达，抑制嗜酸性粒细胞活性及移行、趋化，达到延缓黏膜的纤维化的效用。
综上所述，虽然本研究中所有的患者最终都进行了手术治疗，但是ICS的作用不可忽视，ICS可以抑制TGF-β1的浓度，从而延缓黏膜的纤维化，通过手术治疗+ICS的综合性治疗，相信能进一步恢复慢性肥厚性鼻炎患者的鼻黏膜生理功能。
参考文献：
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[2] Ponikau J U,Sherris D A,KephartGM, et al.Features if airway remodeling and eosinophilic inflammation in chronic rhinosinusitis:is the histopathology similar to asthma?[J].J Allergy Clin Immunol, 2003, 112(5):877-882.
[3] Kenyon N J,Ward R W,Mcgrew G,et al.TGF-beta1 causes airway fibrosis and increased collagen Ⅰand Ⅲ mRNA in mice[J].Thorax,2003,58(9):772-777.
[4] 葛文彤，周兵，王琪．下鼻甲手术历史和现状．耳鼻咽喉头颈外科杂志,2003,10(4)：203-203．
[5] Halwani R, Al Muhsen S, Al Jahdali H,et al.Role of transforming growth factorβ in airway remodeling in asthma[J].AmJ Respir Cell MolBiol, 2011, 44(2):127-133.
[6] Verrecchia F,Mauviel A.Transforming growth factor beta and fibrosis [J]. World J Gastroenterol,2007,13(22):3056-3062
[7] Johnson P R, Burgess J K .GeQi,et al.Connective tissue growth factor induces extra cell ularma trixinasthmatic airway smooth muscle[J].Am J Respir Crit Care Med,2006,173(12):2005-2007
论文作者:江祺川1,陈冬2通讯作者,徐亚男3,康健4,陈建国5
论文发表刊物:《中国实用内科杂志》2016年7月第7期
论文发表时间:2016/12/12
标签：黏膜论文; 肥厚论文; 鼻甲论文; 鼻炎论文; 细胞论文; 鼻腔论文; 实验组论文; 《中国实用内科杂志》2016年7月第7期论文;