（哈尔滨圣泰生物制药有限公司）
摘要：对该品种的质量标准进行研究，主要对含量的方法学进行考察，对其线性、精密度、准确度、耐用性和重复性进行研究、经研究本方法可靠，能准确反映产品质量，为其检测结果的准确性提供保证。
关键词：麝香脑脉康胶囊；含量测定；方法学
麝香脑脉康胶囊根据原卫生部（87）卫药字第33号文件“关于推广应用鹅喉羚羊角、黄羊角、山羊角的通知”的文件精神及国家五部委联合下发的林护发[2007]242号及国家食药监办注函[2012]67号《关于征求进一步加强含麝香等药材中成药品种监督管理意见的通知》，对该品种处方中的“羚羊角”进行了替换研究，并对替代后产品的质量标准进行研究，主要修订三七所含主要成分的含量测定，对其方法学进行分析研究，经研究该方法准确、可靠，为其含量检测的准确性奠定了基础，提供了保证。
1、实验条件与方法
1.1、仪器与试药
仪器：高效液相色谱仪；紫外检测器；超声波振荡仪。
对照品:人参皂苷Rb1 人参皂苷Rg1 三七皂苷R1
试剂：色谱纯乙腈，纯化水，其它试剂均为分析纯。
1.2色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B；按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为203nm。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于4000。
2、方法学考察
2.1仪器精密度考察
分别精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品，分别为12.54mg、12.53mg, 置5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。再精密称取三七皂苷R1对照品12.50mg，置5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，分别精密量取上述两溶液4ml、1ml置25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。连续进样5次，进样10μl。
2.2线性关系考察
精密称取三七皂苷R1对照品10.13mg，加甲醇至10ml容量瓶中得储备液（5），精密量取储备液（5）3ml，加甲醇定容至10ml容量瓶中，得储备液（4），精密量取储备液（4）2ml，加甲醇定容至5ml容量瓶中，得储备液（3），精密量取储备液（4）3ml，加甲醇定容至10ml容量瓶中，得储备液（2）, 精密量取储备液（4）1ml，加甲醇定容至5ml容量瓶中，得储备液（1）,即得。取上述5个浓度的对照品溶液，进样量均为10μl，按含量测定方法测定峰面积，并以对照品浓度为横坐标，峰面积的积分值的均值为纵坐标建立标准曲线，计算回归方程，三七皂苷R1回归方程为：y = 3038261.24x - 35228.43，R2 = 0.999，三七皂苷R1在0.0678mg/ml～1.013mg/ml范围内呈良好的线性关系；
精密称取人参皂苷Rg1对照品24.14mg、人参皂苷Rb1对照品21.10mg，加甲醇定容至10ml容量瓶中得储备液（6），精密量取储备液（6）2ml，加甲醇定容至5ml容量瓶中，得储备液（5），精密量取储备液（5）2ml，加甲醇定容至5ml容量瓶中，得储备液（4），精密量取储备液（6）1ml，加甲醇定容至10ml容量瓶中，得储备液（3）, 精密量取储备液（5）1ml，加甲醇定容至5ml容量瓶中，得储备液（2）, 精密量取储备液（4）1ml，加甲醇定容至5ml容量瓶中，得储备液（1）即得。取上述6个浓度的对照品溶液，进样量均为10μl，按含量测定方法测定峰面积，并以对照品浓度为横坐标，峰面积积分值的均值为纵坐标建立标准曲线，计算回归方程，人参皂苷Rg1回归方程为：y = 2945124.26x + 50582.69；R2 = 0.999，人参皂苷Rg1在0.0721mg/ml～2.2543mg/ml范围内呈良好的线性关系；人参皂苷Rb1回归方程为：y = 2925332.30x + 42576.58；R2 = 0.999，人参皂苷Rb1在0.0647mg/ml～2.0234mg/ml范围内呈良好的线性关系；
2.3重复性试验
分别精密称样品6份，按正文含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值，结果见表1。
表1 重复性试验结果（ｎ=9）
2.4准确度试验
精密称取已知含量（三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1分别为1.06mg/g、4.54mg/g、4.284mg/g）的样品6份，每份各约2.54g。分别精密称取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品28.04mg、126.32mg、112.92mg置于10ml容量瓶中，加甲醇定容。6份样品中各精密加入三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品溶液各1ml（相当于三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品2.80mg、12.63mg、11.29mg）；按正文含量测定项下供试品溶液制备方法制备供试品溶液，并测定含量，计算回收率。
2.5耐用性试验
2.5.1稳定性试验
取同一供试品，按含量测定方法测定后，样品置室温下放置，4小时测定1次，连续测6次，结果24小时内的RSD小于2.0%，证明供试品制备后24小时内测定结果稳定。
2.5.2不同色谱柱考察
分别在Kromasil 100-5C18（250×4.6mm）,结果Rg1（分离度10.92，塔板数123855），Rb1（分离度72.12，塔板数365151）；
YMC-Pack ODS-A （5μ，150×4.6mm），结果Rg1（分离度9.88，塔板数75270），Rb1（分离度75.59，塔板数338959）；
CAPCELL PACK C18（5μ，150×4.6mm）,结果Rg1（分离度7.22，塔板数45717），Rb1（分离度55.58，塔板数221096）。
通过上述三根色谱柱进行试验，结果色谱峰的峰形、分离度、理论塔板数均可达到满意的效果。
2.6、样品的含量测定结果：经对10批样品按含量测定方法测定，测定结果均符合标准。
经研究，该方法准确、可靠，能准确反映产品质量，为其检测结果的准确性提供保证。
论文作者:齐洋
论文发表刊物:《医师在线》2018年2月上第3期
论文发表时间:2018/5/7
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