杨成轩1 王仰坤2
(1新乡市第一人民医院乳腺科 453000)
(2解放军第150中心医院病理科 471031)
【摘要】目的 探讨CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因与微血管密度值与胃癌组织浸润和转移的关系。方法 采用免疫组织化学和原位杂交技术，检测77例胃癌组织、20例肠化生胃粘膜组织和30例正常胃粘膜组织中CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因与微血管密度值。结果 CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因及微血管密度值与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期相关。结论 胃癌微血管的生长促进胃癌的浸润和转移，CDX-2蛋白和NM23-H1mRNA基因共同抑制胃癌的浸润和转移。
【关键词】胃肿瘤 微血管密度值 NM23-H1 mRNA基因 CDX-2蛋白
【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）44-0087-02
癌转移是一个复杂的多步骤的肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程，浸润是癌转移的前提和关键步骤，是导致手术失败和病人死亡的主要原因。肿瘤浸润和转移的过程受与肿瘤发生所不同的另一组基因控制，包括转移基因和转移抑制基因。CDX-2基因与胃粘膜肠上皮化生有关，并参与了胃粘膜癌变过程。本研究通过免疫组织化学和原位杂交方法检测CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因与CD34标记的微血管密度值，通过对比在正常胃粘膜组织、肠化生胃组织及胃癌中的表达，探讨胃癌它们与胃癌的关系。
资料与方法
1 临床资料 本研究所有胃癌标本均来自新乡市第一人民医院病理科，标本共分为肿瘤组、肠化生组及正常组，①胃癌组 共收集胃癌标本77例，均为新乡市第一人民医院2006年03月到2008年10月期间手术切除胃癌根治标本，并全部经病理学确诊，术前均未进行化学药物治疗和放射治疗。其中男性病人51例，女性病人17例，年龄25-75岁，中位年龄57岁。②肠化生组 共20例，均为肠型胃癌根治手术距离肿瘤边缘5厘米以上切缘处组织，并已经病理学证实无癌浸润并发生肠化生。③正常组 对照组标本30例，全部为胃癌根治标本距离边缘5厘米以上切缘处组织，并经病理学证实无癌浸润、肠化生及异常增生。
2 研究方法 采用免疫组化SP法及原位杂交技术分别检测胃癌组、肠化生组、正常组中的CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因与CD34标记的微血管密度值。
3 结果判定 (1)ＣＤ34结果判定标准：每一个染成棕黄色的、可与周围血管、肿瘤细胞和其他结缔组织区分开来的内皮细胞或内皮细胞簇，不论管腔和红细胞出现与否，均作为一个单一的、可计数的微血管。取3个视野的均值作为ＭＶＤ值。分辨不清或染色模糊的细胞不计数。结果判定在双盲法下进行，每张切片由两位病理医师分别判定、计数。两人计数相差10%以上重新计数。（2）原位杂交NM23-H1mRNA基因染色阳性信号呈棕黄色，阳性染色均位于胞膜和（或）胞浆内。切片染色强度分为3级：淡黄色为Ⅰ级（评分为1分），棕黄色为Ⅱ级（评分为2分），棕褐色为Ⅲ级（评分为3分）。（3）免疫组化CDX-2阳性染色位于细胞核，结果判定同原位杂交染色。
4 统计学处理 采用χ2检验、方差分析、t检验，应用SPSS 11.5统计软件进行数据处理，P <0.05视为差异具有显著性意义。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
结果
1 CDX-2蛋白正常胃粘膜组织、胃粘膜肠化生、肠型胃癌和弥漫型胃癌表达 免疫组织化学方法检测结果显示：CDX-2蛋白为核转录因子，正常情况下表达在结肠粘膜上皮细胞，其染色为棕黄色，定位于细胞核；正常胃粘膜上皮细胞中无表达，其细胞核无着色。20例胃粘膜肠化生中阳性率85.0％，77例胃癌中阳性表达率57.1％，组间差异相关。按照Lauren分型标准，32例肠型胃癌阳性表达率68.8％，45例弥漫型胃癌中阳性率42.2％，组间差异相关。
2 NM23-H1mRNA基因及微血管密度值在胃癌组和正常组表达情况 77例胃癌组织中NM23-H1mRNA基因的阳性表达率分别为49.4%，微血管密度值为52.37±17.9。30例正常胃组织中NM23-H1mRNA基因的阳性表达率分别为90％，MVD值为25.11±7.5。
3 CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因及微血管密度值在胃癌中的表达 CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因及微血管密度值与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期相关。
4 CDX-2蛋白、NM23-H1mRNA基因的表达与胃癌MVD的关系 胃癌组织中NM23-H1mRNA表达阴性组MVD值显著高于阳性组；MMP-9表达阳性组MVD值显著高于阴性组。
讨论
CDX-2的过度表达在上消化道肠化生中起着关键作用[1]。在活体外的研究表明胃粘膜上皮细胞可能是由于CDX-2的表达而向肠型细胞分化[2]。正常胃粘膜组织中CDX-2蛋白呈阴性表达，但在绝大多数胃粘膜肠化生中呈阳性表达，说明CDX-2蛋白在胃粘膜细胞中的异位表达是发生胃粘膜肠化生的重要起始事件，而肠化生又是胃癌的癌前病变[3]。本研究采用Lauren分型方法，将胃腺癌分弥漫型胃癌和肠型胃癌，并选取胃粘膜肠化生组20例进行对比研究。结果发现肠型胃癌中CDX-2蛋白呈现高表达（68.8％），高于弥漫型胃癌（42.2％），低于胃粘膜肠化生组（85.0％），三组间存在相关性。本研究还发现CDX-2蛋白表达强度随胃癌组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移呈明显负相关。以上结果表明CDX-2蛋白表达与胃腺癌发生发展密切相关，CDX-2对胃肿瘤的浸润和转移具有明显抑制作用，并且在由正常胃粘膜到肠化生到肠型胃癌的发展过程中，CDX-2蛋白表达呈现由增强到减弱，说明CDX-2蛋白在肠型胃癌发生中发挥着明显的抑制作用。本研究通过CDX-2蛋白与微血管密度的对比研究，发现两者之间不存在统计学意义，CDX-2蛋白表达缺失可能与癌细胞的免疫逃逸有关。但CDX-2在胃粘膜肠化生中如何被上调表达有待进一步研究。
NM23-H1基因是较为明确的转移抑制基因[4]，S Kapitanovi等发现 NM23-H1基因蛋白表达与胃癌转移和预后相关[5]。本研究运用原位杂交的方法，检验结果显示NM23-H1基因表达阳性率为49.4%（38/77）。浸润深度越高、淋巴结有转移、TNM分期越晚、肿瘤分化程度越差，NM23-H1基因蛋白表达越低，本实验的结果与他们的结论均相一致。本研究发现，NM23-H1基因与胃癌的微血管密度值存在负相关。进一步证实了NM23-H1基因是一种肿瘤转移抑制基因，通过调节细胞内微管系统的状态和阻断肿瘤信息传递而抑制细胞增殖的理论，同时NM23-H1基因还通抑制血管内皮细胞增殖的因子，阻断血管内皮细胞增殖表达，致使肿瘤微血管生长减少。
参考文献
[1] Barbara AM,Jean EC,M,et al.Helicobacter pylori regulates the expression of inhibitors of DNA binding(Id)proteins by gastric epithetial cells[J].Microbes and Infection.2006;8:1064-1074.
[2] Fukamachi H, Ito K,Ito Y.Runx3-/-gastric epithelial cells differentiate into intestinal type cells[J].Biochem Biophys Res Commun,2004;321:58–64.
[3] Guan-Zhen Y,Ying C,Can-Rong N,et al.Reduced protein expression of metastasis-related genes(nm23,KISS1,KAI1 and p53)in lymph node and liver metastases of gastric cancer.Int J Exp Pathol，2007，88(3):175-83.
[4] Nesi G, Palli D, Pernice LM, et al. Expression of NM23 gene in gastric cancer is associated with a poor 5-year servial. Anticancer Res,2001,21:3643.
[5] S Kapitanovi, T aev, M Berkovi,et al. NM23-h1 expression and loss of heterozygosity in colon adenocarcinoma .Journal of Clinical Patho-logy 2004, 57:1312-1318.
论文作者:杨成轩1,王仰坤2
论文发表刊物:《中外健康文摘》2013年第44期供稿
论文发表时间:2014-4-25
标签：胃癌论文; 化生论文; 基因论文; 微血管论文; 蛋白论文; 胃粘膜论文; 组织论文; 《中外健康文摘》2013年第44期供稿论文;