武冈市人民医院 湖南武冈 422400
【摘 要】目的：探讨p27蛋白表达与鼻咽癌临床病理学特征的相关性。方法：选取我院在2015年6月至2016年5月收治的80例鼻咽癌患者组织标本作为鼻咽癌组，选取同期我院40例正常鼻咽组织标本作为正常对照组，采用免疫组化检测p27蛋白在鼻咽癌组织和正常鼻咽组织中的表达，分析p27蛋白表达与鼻咽癌临床病理参数的相关性。结果：p27蛋白在鼻咽癌组织中表达下调（P＜0.05），下调表达与T分级呈负相关（P＜0.05），与家族肿瘤史、吸烟、淋巴结转移和临床分期无显著相关（P＜0.05）。结论：p27蛋白在细胞浆和细胞核中的过低表达会导致鼻咽癌的发生发展，是预测鼻咽癌预后的重要因素。
【关键词】p27蛋白；鼻咽癌；病理学；预测因子
Correlation between expression of p27 protein and clinicopathological features of nasopharyngeal carcinoma
Cheng Bingrong
Wugang people's Hospital，Hunan Wugang 422400
[Abstract]Objective：To investigate the correlation between the expression of p27 protein and clinicopathological features of nasopharyngeal carcinoma（NPC）. Methods：in our hospital in 80 cases of patients with nasopharyngeal carcinoma specimens from June 2015 to May 2016 as the NPC group，select the same period in our hospital 40 cases of normal nasopharyngeal tissue samples as control group. Immunohistochemistry was performed to detect the expression of p27 protein in nasopharyngeal carcinoma tissues and normal nasopharyngeal tissues，analysis the relationship between the expression of p27 protein in nasopharyngeal carcinoma and its clinical pathological parameters the. Results：the expression of p27 protein in nasopharyngeal carcinoma（P < 0.05），down regulated expression was negatively correlated with T grading（P < 0.05），and family history of cancer，smoking，lymph node metastasis and clinical stages（P < 0.05）. Conclusion：the low expression of p27 protein in the cytoplasm and nucleus may lead to the occurrence and development of nasopharyngeal carcinoma.
[Keywords]p27 protein；nasopharyngeal carcinoma；Pathology；predictive factors
鼻咽癌（NPC）是一种常见的恶性肿瘤，在我国南方地区比较常见，大多数患者确诊时已经属于晚期，放化疗等综合治疗是主要的治疗手段，但是预后不良。P27蛋白是细胞浆和细胞核共同表达的因子，能够阻止细胞由G1期进入到S期[1-2]。目前临床上大多数研究p27蛋白与鼻咽癌临床病理参数的相关性研究主要是报道p27蛋白在细胞核中的作用，在细胞浆中的表达作用目前研究还比较少，本文采用免疫组化检测p27蛋白在鼻咽癌组织和正常鼻咽组织中细胞核和细胞浆的表达情况，分析p27蛋白表达与临床病理参数的相关性，结果汇报如下：
1资料与方法
1.1一般资料
选取我院在2015年6月至2016年5月收治的80例鼻咽癌患者组织标本作为鼻咽癌组，男性48例，女性32例，年龄在29~70岁，平均年龄为（50.28±5.92）岁；选取同期我院40例正常鼻咽组织标本作为正常对照组，男性23例，女性17例，年龄在29~71岁，平均年龄为（50.48±5.89）岁。所有患者均未接受生物治疗、放射治疗、化学治疗等，所有样本在获得时均得到医院伦理委员会同意，由2名病理医师采用双盲法对玻片根据WHO制定的标准进行阅片。两组在性别、年龄等一般资料上比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。
1.2研究方法
采用二甲苯将石蜡切片脱蜡，用梯度乙醇（90%、95%、100%）水化，再将柠檬酸盐缓冲液10mmol/L在高温高压抗原修复，用过氧化酶抑制剂（含3%过氧化氢）阻断内源性过氧化酶后，再用p27多克隆抗体（1：100稀释）在4℃温度下孵育过夜，PBS冲洗后，依次用辣根过氧化物酶耦联，DAB显色，苏木素复染，封片，在显微镜下观察。
1.3着色评估
p27蛋白在细胞浆和细胞核中的着色评估主要是根据着色细胞数和着色强度表达水平，根据阳性细胞数评分和染色强度评分综合评分计分。细胞着色强度采用0~3分制评估，阴性无着色计0分，弱阳性淡黄色计1分，阳性黄色计2分，强阳性棕褐色计3分；细胞着色数采用0~3分制评估，阳性细胞数＜10%计0分，10%~25%计1分，26%~75%计2分，＞75%计3分；两者相加为得分情况，细胞浆评分：0~4分为低表达，5分及以上为高表达；细胞核评分：0~3分为低表达，4分及以上为高表达。总表达评估：以上的分相加，0~7分为低表达，7分以上为高表达。
1.4统计学方法
数据处理采用SPSS19.0统计学软件，计数资料用百分率（%）表示，组间比较采用χ2检验，相关性分析采用Logistic多因素回归分析，P＜0.05说明差异显著有统计学意义。
2结果
2.1 p27蛋白在鼻咽癌和正常鼻咽组织细胞核和细胞浆中的表达
p27蛋白是一个细胞核细胞浆共同表达的细胞周期因子，在正常鼻咽组织中，31例（77.5%）显示高表达，只有9例（22.5%）显示低表达；在鼻咽癌组织中，44例（55.0%）显示高表达，36例（45.0%）显示低表达。χ2检验分析显示，p27蛋白在鼻咽癌组织中表达下调（χ2=5.76，P＜0.05）。结果见表1和图1~3。
3讨论
鼻咽癌是我国常见的一种恶性肿瘤，具有明显的地域性和种族聚集性，由于发病部位特殊，术后容易复发，而且预后不良，5年生存率不到50%[3]。肿瘤的形成是一个复杂的过程，需要多因子参与，但是目前鼻咽癌的发病机制尚不清楚。研究证实，p27蛋白在多种肿瘤中表达异常，因而分析p27蛋白与鼻咽癌临床病理学特征的关系有着重要的临床意义[4]。p27蛋白是一种核浆共同表达因子，在鼻咽癌细胞核中的表达已经被大量研究证实[5-6]，笔者从鼻咽癌组织细胞核和细胞浆中分析p27蛋白的表达，旨在弥补以往研究的不足。
细胞周期是细胞生命活动的一个基本过程，p27蛋白作为细胞周期的负性调控因子，是一种抑癌基因，能够有效抑制细胞激酶的活性和细胞周期蛋白[7]。研究证实，p27蛋白表达评估可作为多种肿瘤发生发展及其预后的判断依据，具有重要的临床价值[8]。本研究结果显示，p27蛋白在鼻咽癌组织中高表达率为55.0%（44/80），低表达率为45.0%（36/80），在正常鼻咽组织中高表达率为77.5%（31/40），低表达率为22.5%（9/40），存在显著差异（χ2=5.76，P＜0.05），这提示p27蛋白的表达能够有效预测鼻咽癌的发生和发展，使其发生的可能性明显增加。
以往研究发现，p27蛋白低表达与鼻咽癌淋巴结转移和局部复发有着密切关系，也有研究认为两者无明显关系[9]，本研究结果显示，p27蛋白低表达淋巴结转移无显著相关（P＜0.05），这是基于p27蛋白细胞核、细胞浆共同表达得出的结论。本研究还发现，p27蛋白低表达与家族肿瘤史、吸烟和临床分期无显著相关（P＜0.05），与T分级呈负相关（P＜0.05），这提示随着T分级水平的升高，鼻咽癌组织p27蛋白低表达越不明显，且p27蛋白作为抑癌基因参与了鼻咽癌的发生发展过程。
综上所述，p27蛋白在细胞浆和细胞核中的过低表达会导致鼻咽癌的发生发展，是预测鼻咽癌预后的重要因素，但是本研究中标本数量有限，需要加大样本量，从而完整评估p27蛋白对鼻咽癌患者发生发展过程的作用和影响。
参考文献：
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论文作者:程兵容
论文发表刊物:《中国蒙医药》2017年第7期
论文发表时间:2017/7/18
标签：鼻咽癌论文; 蛋白论文; 细胞论文; 细胞核论文; 组织论文; 鼻咽论文; 相关性论文; 《中国蒙医药》2017年第7期论文;