徐恰, 阮昕, 汪慎燚, 席浩, 韦文美[1]2018年在《乳源六肽增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性》文中研究指明目的研究乳源六肽(PGPIPN)促进人卵巢癌细胞对顺铂(DDP)的敏感性及其机制。方法体外培养人卵巢癌敏感细胞株COC1和耐DDP的耐药细胞株COC1/DDP,用CCK8法检测其在DDP作用下的细胞增殖抑制率,计算DDP在作用24、48、72 h的半抑制浓度(IC_(50))。不同浓度的PGPIPN联合DDP(IC_(50))分别作用COC1和COC1/DDP 24、48、72 h,CCK8法检测其对生长增殖的影响,用流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响。用RT-PCR和Western blot检测人卵巢癌细胞中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达情况。结果 PGPIPN联合DDP组同单独使用DDP组相比,人卵巢癌细胞敏感株COC1和人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的抑制率与凋亡率均增加,增加的幅度与PGPIPN浓度在一定范围内成正比,PGPIPN对耐药株COC1/DDP效果高于敏感株COC1。PGPIPN增加人卵巢癌细胞对DDP敏感性在作用48 h时效果最好,对COC1/DDP和COC1的抑制率最高分别为76.8%和62.3%,凋亡率最高分别为67.4%和45.4%,显著高于单独DDP作用(P<0.01)。PCR和Western blot检测COC1和COC1/DDP的ERCC1基因的表达,结果显示在DDP联合不同浓度PGPIPN作用下ERCC1基因的表达均低于单独使用DDP组,COC1/DDP中ERCC1基因表达量随着PGPIPN浓度的升高而显著降低,尤其是对耐药细胞株COC1/DDP的ERCC1基因表达最为显著,显著高于单独DDP作用(P<0.05,P<0.01)。敏感细胞株COC1细胞中ERCC1基因的表达受PGPIPN的影响不如COC1/DDP明显,只是在高剂量(1×10~(-2)g/L)时,ERCC1基因表达明显下降。结论 PGPIPN能增加人卵巢癌细胞对DDP敏感性,其可能是通过调低ERCC1的表达来实现的。
谭勇, 虞乐华, 夏新蜀, 于廷和, 白定群[2]2008年在《LED活化MPPa光动力作用对人卵巢癌细胞生长抑制的初步研究》文中认为目的:观察LED活化MPPa介导的光动力作用对人卵巢癌细胞生长的抑制作用。方法:采用倒置显微镜观察和MTT法检测LED活化MPPa光动力作用后人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞的生长状况。结果:LED活化MPPa介导的光动力作用显著抑制人卵巢癌细胞COC1/DDP细胞的生长,在一定浓度的MPPa条件下,细胞生长抑制作用和LED能量密度间呈剂量依赖关系。倒置显微镜下观察到LED活化MPPa介导的光动力作用组癌细胞数量显著减少,细胞固缩,而单纯LED照射组、单纯MPPa光敏剂处理组和假照射组三对照组间无明显差异;MTT法示LED活化MPPa介导的光动力作用组细胞抑制率显著高于单纯LED照射组、单纯MPPa组和假照射组(P<0.01),单纯LED照射组较假照射组有促进细胞增殖作用(P<0.05),而单纯MPPa光敏剂处理组和假照射组间无明显差异(P>0.05)。结论:LED可以作为一种新型的光源活化MPPa等光敏剂介导的光动力作用从而有效抑制人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞生长。
于利利, 王泽华[3]2003年在《Bcl-xL和Caspase3在人卵巢癌细胞株凋亡过程中的调节作用》文中研究说明目的 探讨 Bcl- x L和 Caspase3基因在顺铂诱导人卵巢癌细胞株凋亡过程中的表达及其在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法 应用流式细胞术 ,RT- PCR技术和原位杂交技术 ,分别对顺铂诱导人卵巢癌敏感细胞株 (COC1)及卵巢癌耐药细胞株 (COC1/ DDP)的细胞凋亡及其 Bcl- x L和 Caspase3表达进行研究。结果 1不同顺铂浓度 (3、 6、 9.9μg/m l)作用下 COC1和 COC1/ DDP细胞凋亡率不同 ,COC1/ DDP细胞明显低于 COC1(P<0 .0 5 )。 2 COC1和 COC1/ DDP细胞株中均有 Bcl- x L基因表达 ,但 COC1/ DDP表达明显强于 COC1。在 6μg/ m l顺铂作用下 COC1和 COC1/ DDP细胞株中 Bcl- x L基因表达下调 ,以 COC1下降更明显。3原位杂交结果 ,6μg/ m l顺铂作用后 COC1和 COC1/ DDP细胞 Cas-pase3呈阳性 ,可见到凋亡细胞特征性形态学变化。结论 凋亡抑制基因 Bcl- x L在人卵巢癌多药耐药细胞株 (COC1/DDP)中高表达 ,是导致其细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因 ,Caspase3在顺铂诱导凋亡的过程中被激活 ,促进凋亡
杨敏[4]2004年在《全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化及凋亡的研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化的影响。方法：选用人卵巢癌细胞株COC1进行体外培养，以不同浓度的ATRA处理COC1细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制情况；流式细胞仪进行细胞周期时相分析；光镜及透射电镜进行形态学观察；免疫细胞化学法测定细胞内增殖核抗原Ki-67的表达；酶联免疫法测定培养液CA125水平的变化。结果：①ATRA浓度为10-7~10-5mol/L时，均明显抑制COC1细胞的增殖（P<0.01），并具有时间-剂量依赖性。②ATRA处理COC1细胞后G0/G1期细胞增加，从31.34%上升至56.92%,S期细胞减少,从58.50%下降至32.71%,细胞增殖受阻于G1→S期。③光镜和透射电镜可观察到经ATRA处理的COC1细胞部分发生形态学的良性分化。④免疫组化染色结果显示ATRA作用后，COC1细胞增殖核抗原Ki-67表达减弱。⑤ATRA还可抑制卵巢癌细胞标志抗原CA125的表达，并呈剂量依赖性，<WP=7>同时CA125的分泌量与增殖核抗原Ki-67的表达呈现正相关(rs=0.972，P<0.01)。结论： ATRA能明显抑制人卵巢癌细胞株COC1的增殖并诱导向良性分化，因此可为ATRA应用于卵巢癌的临床治疗提供新的有效的途径。
胡嘉, 刘丝荪[5]2005年在《二氧化硒对卵巢癌细胞系COC1、COC1/DDP的影响》文中研究表明目的探讨二氧化硒对体外培养的人卵巢癌细胞株COC1及其顺铂耐药细胞株COC1/DDP细胞增殖的影响。方法用MTT法检测体外培养的COC1、COC1/DDP细胞在单独SeO2作用下的增殖抑制及与DDP(顺铂)不同顺序联合作用下的增殖抑制,并以VRP(异搏定)为对照剂,对比SeO2与DDP不同顺序联合作用对COC1/DDP细胞的增殖抑制作用。结果①SeO2单独作用时对COC1、COC1/DDP细胞的增殖抑制作用随SeO2浓度升高而明显增强;②与逆转剂对照组VRP+间隔24h+DDP组相比,SeO2+DDP组及DDP+间隔24h+SeO2组抑制率明显高于逆转剂对照组(P<0.05),SeO2+间隔24h+DDP组抑制率与逆转剂对照组无明显差异(P>0.05)。结论在体外单独二氧化硒具有抑制人卵巢癌细胞株COC1、COC1/DDP细胞增殖的作用,二氧化硒与顺铂联合给药能明显增强人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP细胞对顺铂的敏感性。
蒋静[6]2007年在《抑癌基因P53突变及多药耐药基因表达在上皮性卵巢癌多药耐药机制中的研究》文中指出目的:检测抑癌基因P53(突变型)、GST-π、MDR1在卵巢癌中的表达,并将测定结果结合卵巢癌临床参数如临床分期、病理类型、化疗耐药、化疗史等进行比较,了解P53、GST-π、MDR1在卵巢癌中的表达及其生物学行为、预后的关系;在体外细胞水平从细胞凋亡角度探讨卵巢癌多药耐药的发生机制,进一步阐明卵巢癌中细胞凋亡相关基因P53的突变与耐药基因的关系,探讨卵巢癌耐药的机理,为指导临床选择合适的治疗方案、判断预后以及寻找有效的逆转肿瘤耐药的方法提供理论依据。方法:1.采用RT-PCR法及SP免疫组化法检测60例不同性质卵巢组织中耐药基因MDR1、GST-π、P53mRNA及其蛋白P-gP、GST-π、P53的表达水平。2.采用MTT法检测不同浓度DDP对COC1及COC1/DDP细胞的抑制作用。流式细胞仪检测不同浓度DDP作用COC1及COC1/DDP细胞后的凋亡变化。3.RT-PCR半定量法测定不同浓度DDP作用于COC1及COC1/DDP细胞24h后P53、GST-π、MDR1mRNA含量的变化。结果:1.上皮性卵巢癌,良性上皮性肿瘤,正常卵巢组织中三种指标的表达情况:MDR1蛋白依次为9/22、0/20、0/18,GST-л蛋白为16/22、0/20、0/18,p53蛋白为14/22、0/20、0/18;MDR1mRNA依次为12/22、0/20、0/18,GST-πmRNA为17/22、3/20、0/18,p53mRNA为16/22、0/20、0/18,三个指标在上皮性卵巢癌中的表达率显著增高;化疗耐药与MDR1和GST-π相关; P53表达与肿瘤分期和组织分化程度相关;MDR1表达与组织分化程度相关; p53与MDR1表达具有一定相关性。2.不同浓度DDP处理COC1及COC1/DDP细胞后,均有抑制细胞生长及促凋亡作用,且呈时间和剂量依耐性。DDP浓度在2.5～10μg/mL内,敏感细胞株凋亡率明显高于耐药细胞株,差异具有显著性意义(P<0.05)。3.COC1细胞中GST-π、P53mRNA呈弱表达,不同浓度DDP作用24h后,P53、GST-л表达明显减弱,且呈浓度依耐性,MDR1未见表达;COC1/DDP细胞中P53、MDR1mRNA表达较COC1细胞增强,GST-πmRNA变化不明显,不同浓度DDP作用后三者变化无显著性差异。结论:1. P53、GST-π、MDR1在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤及卵巢癌中表达逐渐增强,提示三者均参与卵巢癌的形成,并与耐药有关。卵巢癌化疗耐药与耐药基因GST-π、MDR1过表达及细胞凋亡相关基因P53突变密切相关,突变的P53可能通过调控耐药基因GST-π、MDR1而间接发挥其耐药作用。2. P53蛋白表达与卵巢上皮性肿瘤的良恶性、肿瘤细胞的分化程度、患者的临床分期有关,与恶性肿瘤的病理类型无关。P53蛋白表达可作为卵巢癌预后与耐药的一个指标。3.GST-π、MDR1基因表达与卵巢癌化疗具有一定的相关性,在卵巢癌化疗耐药组GST-π、MDR1基因表达增高。因此在判断临床用药时检测多药耐药相关基因的表达,可得到一定的耐药信息,有助于临床化疗方案的制定。p53的表达与MDR1阳性率存在一定的相关性,卵巢癌耐药可能与细胞凋亡相关。4.不同浓度DDP可抑制COC1、COC1/DDP细胞增殖,并且具有时间-剂量依耐性。DDP对COC1细胞作用更明显。5.诱导细胞凋亡是顺铂作用机制之一,顺铂可诱导卵巢癌COC1、COC1/DDP细胞凋亡,获得性耐药与肿瘤细胞凋亡有关。6. COC1/DDP细胞中P53、MDR1表达较COC1细胞增强,不同浓度DDP作用COC1细胞后,P53表达明显减弱,呈浓度依耐性,而作用COC1/DDP细胞后,P53变化无显著性。卵巢癌顺铂耐药的产生可能与凋亡途径的失活有关。卵巢癌中多药耐药现象常见,检测多药耐药相关基因MDR1、GST-π的表达对临床预测化疗药物的敏感性有较大的应用价值。凋亡相关基因P53(突变型)在人卵巢癌多药耐药细胞中高表达,是导致细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因。
高尚风, 刘婷艳, 刘丽, 闫坤[7]2005年在《三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株COC1发生G_1期阻滞》文中研究表明目的研究三氧化二砷(As2O3)诱导卵巢癌细胞株COC1凋亡的作用机理。方法用不同浓度的As2O3溶液作用人卵巢癌细胞株COC1,于不同时间点收集细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡形态学特征,流式细胞仪检测细胞凋亡率及分析细胞周期的变化。结果随着药物浓度的升高、作用时间的延长,As2O3对COC1细胞的生长抑制率逐渐升高,具有浓度和时间依赖性;COC1细胞在1.5μmol/LAs2O3作用48h就出现了凋亡形态学改变,且随着作用时间的延长凋亡细胞数量增多;在3.0μmol/L、1.5μmol/LAs2O3作用下COC1出现了明显的凋亡峰,细胞周期也出现了随着药物作用时间的延长G1期细胞比例逐渐上升,S期、G2/M期细胞的比例同时降低的现象,提示As2O3对人卵巢癌细胞株COC1有明显周期特异性生长抑制作用。结论As2O3可以诱导卵巢癌细胞株COC1发生凋亡,诱导细胞发生G1期阻滞是As2O3抑制卵巢癌细胞生长作用的可能机制之一。
杨志宏, 王智彪[8]2004年在《聚焦超声诱导卵巢癌细胞株COC1凋亡及其机制的初步研究》文中研究说明目的 :研究低频脉冲聚焦超声波对人卵巢癌细胞株COC1的抗肿瘤作用 ,并探讨其诱导细胞凋亡的分子机制。方法 :以低频脉冲聚焦超声 (超声频率 0 .8MHz ,声强 83.6W /cm2 ,脉肿持续时间 :5 0 μs)辐照卵巢癌COC1细胞 10s ,然后采用MTT法观察超声对COC1细胞增殖的抑制作用 ;流式细胞仪 (FCM )、TUNEL法、荧光染色和光、电镜检测细胞凋亡 ;应用FCM免疫荧光技术观察Bcl- 2、bax基因蛋白表达的变化。结果 :超声可明显抑制存活卵巢癌COC1细胞的增殖 ,辐照后 12h、2 4h、36h、4 8h ,COC1细胞MTT光吸收值与对照组相比显著降低 ;FCM检测超声辐照后 6h的COC1细胞凋亡率达 ( 2 3.5 7± 4 .6 2 ) % ;Bcl- 2蛋白的荧光指数 (FI)降低 ,而bax蛋白FI升高。同时TUNEL法观察到棕褐色着染的凋亡细胞 ;荧光显微镜和电镜下观察到凋亡小体形成等典型的形态学改变。结论 :低频脉冲聚焦超声辐照对人卵巢癌细胞株COC1具有细胞毒作用 ,其机制为诱导辐照后存活的人卵巢癌细胞株COC1凋亡 ,bcl- 2和bax蛋白可能参与了COC1细胞凋亡过程。
熊世钢[9]1993年在《人卵巢癌细胞株COC1 COC2的建立及自分泌TGF-β促生长和对肿瘤免疫的影响》文中研究说明转化生长因子-β(TGF-β)家族是一庞大的多能性因子系统，其参与许多正常细胞、转化细胞和肿瘤细胞的增殖、分化及凋亡等重要生命过程，为目前肿瘤与生长因子关系研究最活跃的领域之一。卵巢癌是现今妇科肿瘤致死的首要原因。本文就二者间的关系做了探讨，本研究主要包括： 一．建立细胞株及动物摸型 1．从人卵巢癌腹水中建成两个卵巢癌细跑株COC1和COC2； 2．用COC1和COC2接种裸鼠建立了高传代成功率的可移植性荷瘤动物模型COC1n和COC2n； 二．体内外观察发现 3．COC2和COC1无血清条件培养液(SFCM2和SFCM1)能促进自身细胞的体外增殖； 4．COC2接种同一动物的不同部位时，不同接种部位的肿瘤细胞能相互促生长； 5．COC1和COC2原患者腹水，COC1n和COC2n血清及SFCM1和SFCM2能抑制PHA和IL-2体外诱导的外周血革个核细胞(PBMC)增殖； 6．SFCM的上述促自身细胞生长及抑制PBMC增殖的作用可被抗TGF-β中和抗体部分阻断； 三．通过对COC1、COC2细胞及SFCM1、SFCM2的分析发现 7．SFCM1和SFCM2能促进TGF-β敏感株NRK-49F软琼脂培养克隆生长； 8．RNA缝隙杂交及细胞原位杂交显示，COC1和COC2均有TGF-β mRNA
谭勇, 虞乐华, 夏新蜀, 于廷和, 白定群[10]2008年在《荧光染色法观察LED活化MPPa介导的光动力作用诱导卵巢癌细胞凋亡》文中指出目的:探讨LED活化MPPa介导的光动力作用诱导人卵巢癌细胞凋亡的光化学生物学效应。方法:应用Hoechst33258细胞核荧光染色法观察LED活化MPPa介导的光动力作用对人卵巢癌细胞凋亡的影响。结果:LED活化MPPa介导的光动力作用组出现核凝聚、凋亡小体的人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞明显多于单纯LED辐照组、单纯MPPa光敏剂处理组和假辐照组,而单纯LED辐照组、单纯MPPa光敏剂处理组和假辐照组三对照组中出现核凝聚、凋亡小体的细胞非常少见。结论:LED可以作为一种新型的光源活化MPPa等光敏剂介导光动力作用从而有效诱导人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞凋亡。
参考文献：
[1]. 乳源六肽增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性[J]. 徐恰, 阮昕, 汪慎燚, 席浩, 韦文美. 安徽医科大学学报. 2018
[2]. LED活化MPPa光动力作用对人卵巢癌细胞生长抑制的初步研究[J]. 谭勇, 虞乐华, 夏新蜀, 于廷和, 白定群. 激光杂志. 2008
[3]. Bcl-xL和Caspase3在人卵巢癌细胞株凋亡过程中的调节作用[J]. 于利利, 王泽华. 华中科技大学学报(医学版). 2003
[4]. 全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化及凋亡的研究[D]. 杨敏. 重庆医科大学. 2004
[5]. 二氧化硒对卵巢癌细胞系COC1、COC1/DDP的影响[J]. 胡嘉, 刘丝荪. 实用临床医学. 2005
[6]. 抑癌基因P53突变及多药耐药基因表达在上皮性卵巢癌多药耐药机制中的研究[D]. 蒋静. 重庆医科大学. 2007
[7]. 三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株COC1发生G_1期阻滞[J]. 高尚风, 刘婷艳, 刘丽, 闫坤. 西安交通大学学报(医学版). 2005
[8]. 聚焦超声诱导卵巢癌细胞株COC1凋亡及其机制的初步研究[J]. 杨志宏, 王智彪. 重庆医科大学学报. 2004
[9]. 人卵巢癌细胞株COC1 COC2的建立及自分泌TGF-β促生长和对肿瘤免疫的影响[D]. 熊世钢. 中国协和医科大学. 1993
[10]. 荧光染色法观察LED活化MPPa介导的光动力作用诱导卵巢癌细胞凋亡[J]. 谭勇, 虞乐华, 夏新蜀, 于廷和, 白定群. 激光杂志. 2008
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