赵江安[1]2001年在《细胞周期、凋亡相关基因及凋亡在良、恶性多形性腺瘤发病中的作用》文中研究说明通过对良恶性多形性腺瘤临床标本中的细胞周期相关基因，细胞凋亡相关基因的表达和凋亡及DNA含量变化进行检测，并对AgNOR染色颗粒进行计数，旨在探讨这些因素在PA恶变和复发中的作用和意义，为临床研究和预后提供帮助和参考依据。1．良、恶性多形性腺癌中Cyclin D1和CDK4蛋白表达的变化和意义 Cyclin D1作为细胞周期的正性调控因子，通过与CDK4/CDK6结合并使之激活，使Rb发生磷酸化，E2F-1从Rb中解离出来，进一步激活一些基因的表达、启动DNA复制，推动细胞从G1期进入S期。用免疫组化检测良、恶性多形性腺瘤中Cyclin D1和CDK4蛋白的表达变化。结果显示，MPA组中，Cyclin D1和CDK4的表达均显着高于N组和PA组，PA组又显着高于N组。因此，在PA中，Cyclin D1和CDK4的表达在肿瘤细胞的细胞周期循环发生了障碍，Cyclin D1表达产物的堆积使肿瘤细胞的G1期缩短，引起 — ———g＆—— 了细胞的过度增殖。使 PA过度增殖甚至恶变。研究提示，Cyclin DI和 CDK4 参与了 PA和 MPA中的发生过程。CyClin DI和 CDK4免疫组化的染色和定 量分析为PA向MllA的转变研究提供了参考。 2·EZFq和PA恶变的关系 在细胞GI店期，转录因子EZF－l 能与编码细胞周期调节基因的启动子 结合，调控DNA的复制和细胞增殖。EZFI对细胞周期既可起促进作用，又、可起抑制作用。采用兔疫组化的方法观察了EZFI在良、恶性多形性腺瘤中 的定量表达。结果显示，MPA组中，EZF的表达显着高于PA组和N组。EZF－l 可能与一些靶基因如 CyClin DI、CyClin E、C－IyC等基因的启动子结合，激 活了这些与细胞周期相关的基因，进而调节细胞周期。因此EZF－l 在PA和 MPA的发生过程中，表现为对细胞周期的促进作用，而非抑制作用。 3．良、恶性多形性腺瘤中 pZ！一‘o”’转录水平的表达变化研究 pZIW‘门”’是 CKI家族的成员之一，通过抑制多种 CyClinjCDK复合物 的活性来调节细胞周期。本实验应用原位杂交的方法对 pZ！”’门”在良恶性 多形性腺瘤中的表达进行了研究。结果表明，pZI在 MPA的表达强度较 N 组和 PA中低o＜0．05卜 N中，pZIW’”m呈强阳性表达，有效的调节了细胞 周期的进程。PA中，pZI转录水平较高，通过结合并抑制 CDKs和 Cyclins 的活性来控制细胞周期GI期的进程。MPA中，pZI的表达发生了下调，这 可以是山于其基因发生突变、缺失等改变或开放表达的过程受阻所造成。研 究提示，PZI表达的减弱或消失可以造成对肿瘤细胞生长抑制作用的降低。 4．细胞凋亡相关基因 bclZ InRNA的变化及凋亡和良恶性多形性腺瘤的关系 凋亡是生理状态下的一种细胞死亡方式，在许多疾病中都表现出了异常 的病理性作用。本研究采用原位杂交的方法检测了与细胞凋亡调节密切相关 的基因－－－－nlZ在良恶性多形性腺瘤中的表达情况，并用IUNEL法对凋亡细 胞进行了染色。实验中观察到 PA及 MPA中均有 hcf｛ InRNA的表达，但 MPA 组b。12阳性表达明显高于PA组，而凋亡细胞却减少。提示bcIZ基因的高 3 务丛O门坠人井嗷／少人裕义 表达与MPA的发生有关，且bclZ的表达与凋亡指数呈明显的负相关。囚此 hcf－2的作用机理可能是比－2基因阻碍了PA中肿瘤细胞的凋亡，使肿瘤细 胞生存期延长，肿瘤细胞过度增殖，最终恶变。 5．PA及复发病例中 AgNOR和 DNA含量的定量分析及意义 DNA含量可以反映细胞在恶变过程中，细胞的增殖程度和染色体的畸变 程度。AgNOR是 DNA转录的调节者，它的变化反映细胞诱导分化的能力及 d1NA的转录活性。本研究对PA及复发病例中肿瘤细胞作了AgNOR银染计 数和DNA含量测定，并分析了二者之间的关系以及对PA的预后价值。结果 表明，正常腺上皮和腺管上皮细胞，软骨细胞的 DI（DNA Index）值具有显 着性差异，而腺管上皮细胞和粘液样细胞之间的DI值无显着性差异。DNA 含量的高低与细胞的类型密切相关。在复发的病例中，部分细胞核中的DNA 含量非常高，PA和复发组之间有了显着性差异。AgNOR计数与 DNA含量 呈明显的正相关。因此，可以认为 PA中的 AgNOR数量在一定程度卜也反映 了肿瘤细胞的增殖活性。PA中的 DNA含量和 AgNOR数量均可作为估价 PA 增殖状态和预后的参考指标。
郭淑荣[2]2015年在《生长抑制和DNA损伤基因45a在人腮腺肿瘤中的表达》文中指出目的:探讨生长抑制和DNA损伤基因45a mRNA在人腮腺良、恶性肿瘤组织及其对应的瘤旁正常腮腺组织中的表达情况及其临床病理意义。方法:从组织标本中提取总RNA,然后进行cDNA第一链合成,之后使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测30例腮腺良、恶性肿瘤组织及与之相对应的30例瘤旁正常腮腺组织中Gadd45a mRNA的表达量。结果:1.与瘤旁正常腮腺组织相比,Gadd45a mRNA在恶性肿瘤中的表达量为其瘤旁组织的0.214倍,表明Gadd45a mRNA在恶性肿瘤组织中表达降低,差异具有统计学意义。2.与瘤旁正常腮腺组织相比,Gadd45a mRNA在多形性腺瘤中的表达量为其瘤旁组织的0.457倍,在基底细胞腺瘤中的表达量为其瘤旁组织的0.425倍,差异具有统计学意义。3.与瘤旁正常腮腺组织相比,Gadd45a mRNA在腺淋巴瘤中的表达量为其瘤旁组织的1.174倍,表明Gadd45a mRNA在腺淋巴瘤中表达较瘤旁组织轻微升高,但差异无统计学意义。4.Gadd45a mRNA在恶性肿瘤中表达较良性肿瘤(多形性腺瘤和基底细胞腺瘤)降低(P<0.05)。结论:1.实时荧光定量RT-PCR可以特异性且较敏感的检测出腮腺肿瘤中Gadd45a mRNA的表达,方法准确可靠,操作较为方便。2.腮腺良、恶性肿瘤组织中Gadd45a mRNA表达水平明显低于与其对应的瘤旁正常组织,且Gadd45a mRNA在恶性肿瘤中表达较良性肿瘤降低;提示Gadd45a基因可能在腮腺肿瘤的发生发展中具有重要作用,Gadd45a mRNA在恶性腮腺肿瘤中低表达可能诱导了肿瘤细胞的恶性增殖。3.Gadd45a可能成为治疗腮腺恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点。
参考文献：
[1]. 细胞周期、凋亡相关基因及凋亡在良、恶性多形性腺瘤发病中的作用[D]. 赵江安. 第四军医大学. 2001
[2]. 生长抑制和DNA损伤基因45a在人腮腺肿瘤中的表达[D]. 郭淑荣. 青岛大学. 2015