（1.北部战区总医院 检验科；2.沈阳二四五医院 检验科）
摘要：目的 掌握IgG、IgA、IgM测定方法及临床意义。方法 采集标本，运用免疫散射比浊法测定血清中IgG、IgA、IgM，送检。结论 测定免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）能够提供有关体液免疫状态的重要信息，预见原发性免疫缺陷病，具有重大的临床意义。
关键词：IgG；IgA；IgM；测定方法；临床意义
IgG、IgA、IgM是三种免疫球蛋白，也就是抗体。三种抗体结构不同，功能亦不同。IgG是主要的再次免疫反应抗体，IgM是主要的初次免疫抗体，IgA是粘膜免疫中的主要分泌型抗体。
1测定方法
1.1检测原理
免疫球蛋白是由浆细胞分泌的，是免疫系统与抗原接触后的体液免疫反应物。采用免疫散射比浊法检测，检测原理为人体液标本中的蛋白与特异性的抗体形成免疫复合物。这些免疫复合物会使穿过标本的光束发生散射。散射光的强度与标本中IgA／G／M的浓度成正比。与已知的标准浓度对比即可得出结果。计算公式为：IgA／G／M浓度（g／L）=A样品／A标准×标准液浓度。
1.2标本采集
1.2.1采血方法：空腹不抗凝静脉血、肝素或EDTA抗凝血浆2～3ml、脑脊液。新鲜的尿液也适用于IgG测定，如要分析对应的血清和脑脊液样品，则应同时抽取。
1.2.2标本处理：以2500～3000r／min离心6～10min，分离血清上机测定[1]。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏于2～8℃的冰箱内保存。
1.2.3标本保存：使用新鲜或冰冻的血清样本或脑脊液，2～8℃保存不超过8d，-20℃条件下保存不超过3个月。
1.2.4注意事项：血清标本必须彻底凝固，并在离心沉淀后绝不能含有任何颗粒或残存的纤维蛋白。脂血样本或冷冻样本如果在融化后已变得浑浊不清，则必须在测试前通过离心沉淀加以澄清（在约tjl5 000g下10min）。随机和定时采集的尿是测试尿中IgG的合适标本。禁止使用经冷冻储存的尿和脑脊液样品。尿液和脑脊液样本在测试前必须经过离心沉淀。
1.3试剂
1.3.1采用SIEMENS原装配套试剂
（1）试剂组成：N抗血清为液体动物血清，是用高纯度人免疫球蛋白（IgG、IgA或IgM）免疫兔子而制成的。抗体滴度（T）由放射免疫扩散法测定并印在瓶身标签上。滴度表明用lml对应抗血清在琼脂糖凝胶中沉淀的抗原的量（以mg为单位）。叠氮钠＜1g／L。
（2）试剂准备：直接使用。
（3）试剂保存：原包装试剂2～8℃储存可保存至标签上失效期。开封后2～8℃储存，可储存4周。不得冰冻。在储存期间，N抗血清可能会出现沉淀或浑浊，这不是由微生物污染引起的，也不影响其活性[2]。在这种情况下，抗血清应经过滤后再使用。建议使用孔径为0.45μm的一次性过滤器。上机稳定性至少3d（按每天8h计算）。
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1.4操作步骤
1.4.1检测流程：签收标本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
1.4.2标本签收：严格按标本接收程序签收标本。
1.4.3标本检测
（1）手工编排测试项目：适用于无双向条形码标本或标本复查，主菜单一点击工具栏Routine loading或点击loading图标一打开Loading对话框一从Rack identifICation框中选择样本架一将样本装载到所选的样本架一在右侧Sample identifier列表框中选择放在试管架上的样本一左侧样本架区域选择要装载样本的位置一点击Take确认，或点击Autoload，系统自动依次将尚未装载的样本分配到选择好的架子上。将装好样本的样本架从6～15号任一通道推入。
（2）双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
（3）运行：确认样本置于样本架上，且条码朝样本架缺口处。将装好样本的样本架从6～15号任一通道推入。
1.4.4检验后标本保存：标本检验完后保存于标本冰库内，按日期放好，保存期为7d。
1.5质量控制
1.5.1质控品准备和贮存：质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品2～8℃可保存到瓶身有效期，不得冷冻。开启后2～8℃可保存l4d。
1.5.2质控品水平和分析批长度：每24h至少进行l批，每批l个浓度水平。
1.6.3质控操作程序：将达到室温后的质控品置于编号l0开始的专用质控／定标架上，且条码朝缺Ll处。主菜单→点击工具栏Routine-Request controls→选中相应质控项目一点击Measure按钮。将架子插入6～15号通道，开始测量质控。查看当天质控结果：主菜单一点击工具栏Result-Con-trol journal一显示当天质控结果。
1.6操作性能
本法线性范围为IgA血清0.25～8.Og／L；脑脊液1.25～41.5mg／L。IgG血清l.4～46g／L；脑脊液3.6～115mg／L；尿液3.6～58mg／L。IgM血清0.2～6.4g／L；脑脊液0.13～4.2mg／L。不准确度允许范围＜10%，不精密度CV＜6.67%。对于超过测定线性范围的结果，可选择新的稀释度重新测定。
1.7生物参考区间
1.7.1血清：IgA 0.7～4.0g／L；IgG 7～16g／L；IgM 0.4～2.3g／L。
1.7.2脑脊液：IgA＜5mg／L；IgG＜34mg／L；IgM 0～13mg／L。
1.7.3尿液：IgG＜9.6mg／L。
2临床意义
2.1血清免疫球蛋白浓度降低
见于原发性免疫缺陷疾病，以及晚期恶性肿瘤、淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤和瓦尔登斯特伦病等继发性免疫缺陷疾病[3]。
2.2血清免疫球蛋白浓度升高
是由于多克隆或寡克隆免疫球蛋白增殖，如肝脏疾病（肝炎、肝硬化）、急性或慢性感染、自体免疫疾病，以及子宫内和围生期感染的新生儿脐带血中[4-5]。
2.3单克隆免疫球蛋白增殖
发生在浆细胞瘤、瓦尔登斯特伦病和重链疾病等情形下。对于单克隆免疫球蛋白血症，除了做定量测定外，还需要详细的鉴别诊断研究。
2.4脑脊液中免疫球蛋白水平升高
中枢神经系统的局部免疫反应会导致脑脊液中免疫球蛋白水平升高，尤其是IgG的含量升高。
2.5尿中IgG浓度升高
患有非选择性肾小球蛋白尿患者的尿中IgG浓度升高。
3小结
免疫球蛋白是由浆细胞分泌的，是免疫系统与抗原接触后的体液免疫反应物。首次接触后的初步反应是形成IgM类抗体，随后形成IgG和IgA抗体。定量测定免疫球蛋白能提供有关体液免疫状态的重要信息，能够预见原发性免疫缺陷病，具有重大的临床意义。
参考文献
[1]韩红霞，郭海龙，侯佳宜，任建平.两种免疫球蛋白检测系统检测结果的一致性评价[J].中国药物与临床，2018，18（4）.
[2]周博，范霞，赵连爽，康辉.免疫散射比浊法检测 IgG 的性能验证[J].现代检验医学杂志，2015，（3）.
[3]王晓洪.恶性肿瘤患者血清免疫球蛋白检测结果分析[J].中国民康医学，2015，（1）.
[4]蔡勇进.乙型肝炎患者血清免疫球蛋白水平的变化及其临床意义[J].中外医疗，2015，（23）.
[5]陈益泉.浅谈对慢性乙肝所致肝衰竭患者进行血清IgG、IgM及IgA检测的意义[J].当代医药论丛，2016，（19）.
论文作者:张英辉1,富荣威2（通讯作者）
论文发表刊物:《航空军医》2019年7期
论文发表时间:2019/9/9
标签：血清论文; 标本论文; 免疫论文; 脑脊液论文; 样本论文; 免疫球蛋白论文; 抗体论文; 《航空军医》2019年7期论文;