（海南省食品药品检验所海口分所；海南海口 570311）
摘要：目的 通过HPLC方法检定阿莫西林颗粒含量的各色成分和阿莫西林的其他物质。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶作为阿莫西林颗粒测定的辅助剂，主要利用作为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，乙腈为含量测定的流动相，主要分类为A、B两种，乙腈（体积比99：1）为流动相A，乙腈为流动相B，选取210nm为HPLC检定的波长，测试选取最佳温度为30℃，1.0mL/min为流速。结果 阿莫西林颗粒在一定范围内的能够与峰面积线性保持持衡状态，通过三个浓度的回收率对比，可见低、中、高3个浓度都在100.0%左右，其中阿莫西林颗粒的有关物质的检测限为2ng，能够有效的分类阿莫西林中的杂质。结论 通过HPLC方法测定，可以均衡阿莫西林颗粒的药物含量，分离主成分中的杂质，提高复方阿莫西林颗粒的药效。
关键词：HPLC方法；阿莫西林；含量
中图分类号：O657 文献标识码：A
阿莫西林是半合成的青霉素，属于U-内酰胺类抗生素。它的抗菌机理是通过干扰细菌细胞壁的合成，并且降低细菌自身的自溶酶活性，从而引起细菌细胞膜的损伤，起到杀灭细菌的作用。它不仅具有耐酸的特点，口服能够迅速吸收，而且血清中药物浓度高，生物利用度大于同类药物中的氨青霉素一倍，由于疗效确切，广泛受到医生和患者的厚爱。在国内有许多厂家生产不同剂型的阿莫西林，其中以胶囊剂最为常见。在医药行业，为了防止商家追逐暴利而减少投料量以及添加违规试剂，保障广大患者的切身利益，探讨使用有效的方法准确测定阿莫西林胶囊的含量就具有重要意义。
1 仪器与试药
检测阿莫西林颗粒含量的实验仪器主要有两种高效液相色谱仪，一是岛津LC-20AD；另一个是Agilent1260，电子天平。选取中国药品生物制品检定所提供的阿莫西林对照品，纯度为86.6%；阿莫西林颗粒，测定的辅助药剂包括乙腈、磷酸二氢钾、氢氧化钾、氢氧化钠、超纯水。
2 方法与结果
2.1 含量测定
（1）色谱条件
采用十八烷基硅烷键合硅胶作为阿莫西林颗粒测定的辅助剂，主要利用作为填充剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，乙腈为含量测定的流动相，主要分类为A、B两种，乙腈（体积比99：1）为流动相A，乙腈为流动相B，选取210nm为HPLC检定的波长，测试选取最佳温度为30℃，1.0mL/min为流速。
（2）实验检测
采用HPLC法测定阿莫西林颗粒剂的含量主要通过7种试验过程，第一种是专属性试验，将制备好的溶液通过空白辅料进行测定，显示空白辅料对样品测定无干扰。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆然后将60℃温度下保存10天，发现供试品在高温情况下，杂志总数在不断增多，阿莫西林颗粒所含有的主要成分和分解产物完全分离；第二种精密度试验，在上述条件下，用色谱条件连续试样5次，精密度良好的条件就是当测定的峰面积平均值为16025.6，RSD为0.04%（n=5）；第三种稳定性试验，在上述条件下，将阿莫西林颗粒的供试品溶液调配后，保持在0～8h内，如果供试品的溶液能够保持稳定状态，其峰面积RSD为0.1%；第四种重复性试验，阿莫西林的平均含量为104.1%，RSD为0.6%（n=6），表明分析方法重复性良好。第五种回收率试验，空白辅料加入一定量的阿莫西林对照品，充分混合均匀，阿莫西林平均回收率为100.0%，RSD=0.2%，表明本方法准确可靠。
2.2 实验过程
1）精密度实验
准确称取阿莫西林对照品，配制成20、40、60、100μg?mL-1的标准溶液，按照上述色谱条件测定，每次进样10μL，每种浓度标准溶液重复进样6次，测得阿莫西林标准溶液峰面积的RSD为1.85%，表明此色谱系统精密度良好。
2）稳定性实验
准确量取阿莫西林对照品溶液10μL，分别在1、2、3、4、6、10、12、24h在上述色谱条件下进样，记录保留时间和峰面积，其保留时间RSD为0.25%，峰面积RSD为3.87%，结果表明，阿莫西林对照品溶液在配制后12h内比较稳定。
图1 阿莫西林对照品的色谱图 图2 阿莫西林胶囊的色谱图
3）加标回收性实验
准确移取已知含量的阿莫西林样品溶液1mL，然后加50μg?mL-1的阿莫西林对照品溶液4mL，混合均匀后，在上述色谱条件下进样10μL，测定并记录其峰面积，计算回收率，其平均回收率为101.98%，RSD为3.97%。
2.3 色谱分析条件选择
1）流动相的选择
分别选用不同体积比的磷酸二氢钾溶液：乙氰体系为流动相，分析试样的分离效果。发现0.05mol?L-1磷酸二氢钾溶液（用2mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0）：乙氰为97.5：2.5时，阿莫西林的出峰时间较短，并且色谱峰的半峰宽较小。
2）检测波长的选择
将一定浓度的阿莫西林对照品溶液在波长200—380nm范围内使用紫外光谱扫描，结果显示阿莫西林在254nm和210nm处均有最大吸收，但考虑到其他波长下阿莫西林颗粒中所添加的辅料对其半峰宽的影响，故本方法选择210nm为检测波长。
3）柱温的选择
对柱温的选择方面，分别测定了在15、20、25、30、35℃柱温时的色谱图，通过比较各种柱温下的色谱图，发现在25℃的柱温下峰形和半峰宽相对都比较好，因此选择25℃作为检测阿莫西林有效成分的分析柱温。
3 讨论
通过以上的试验结果显示，HPLC测定阿莫西林颗粒剂中阿莫西林的含量更具有专属性和快速性，充分利用HPLC法具有很强的选择性，在测定过程中能够将阿莫西林颗粒的主要成分与其他物质相分离，从而更好的对阿莫西林颗粒的药物含量进行均衡，保持药品的质量，提高阿莫西林颗粒的治疗疗效，对临床用药上起到很大的促进作用。
参考文献：
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[2] 彭中笑,唐洁. HPLC法测定阿莫西林胶囊含量方法的改进[J]. 中国药事,2008,08:682-683.
[3] 姜登军,刘融融. 阿莫西林胶囊含量测定时溶解的讨论[J]. 北方药学,2014,11:16-17.
论文作者:邢征宇 林艳珠
论文发表刊物:《医师在线》2017年7月下第14期
论文发表时间:2017/10/31
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