何健 黄松音 刘勇 冯慧馨 （中山大学孙逸仙纪念医院检验科 510120）
【摘要】目的 探讨分离胶管与肝素锂管对心肌酶谱（AST、LDH、CK、LD-1、HBDH、CK-MB）测定的影响。方法 用三种试管：分离胶促凝管、肝素锂抗凝管与普通干燥管分装全血与混合血清，37℃水浴1.5与3小时后测定心肌酶谱。结果 37℃水浴3小时内, 全血标本随时间延长，肝素锂管组与普通干燥管组心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，分离胶管组则相对比较稳定。同一时间段,混合血清分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05）。全血标本三种试管间AST、CK与CK-MB无显著性差异（P>0.05），LDH、HBDH与LD-1有极显著性差异（P<0.01）。结论 分离胶管与肝素锂管的化学成份对心肌酶谱本身影响不大，但可有效延缓血细胞内心肌酶析出，比较起来，分离胶管因为隔开了血细胞与血清能更接近标本采集时的状况。
【关键词】心肌酶 分离胶 肝素锂
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）33-0096-02
The effect of separation gel tube and Heparin lithium tube for myocardial enzymes measurements
He Jian, Huang Songyin, Liu Yong, Feng Huixin
Department of clinical laboratory, Sun Yat-Sen Memorial Hospital. 510120
【Abstract】 Objective: To investigate the effect on determining the concentration of myocardial enzymes (AST, LDH, CK, LD-1, HBDH, CK-MB included) between separation gel coagulation promoting tubes and heparin lithium coagulation promoting tubes. Methods: The samples of whole blood and pooled serum were respectively collected by using separation gel coagulation promoting tubes, heparin lithium coagulation promoting tubes and traditional drying tube, then analysis the measurements of myocardial enzymes in three kinds of tubes after water bath heating in 37℃ with 1.5 and 3 hours . Results: The measurement results of LDH, HBDH and LD-1 in whole blood increased with prolong of time in both heparin lithium coagulation promoting tubes and traditional drying tube in water bath heating in 37℃ with 3 hours. However, it’s comparatively more stable in separation gel coagulation promoting tubes. There were NO significant differences （P>0.05）in the same time period among the results of determining the concentration which of myocardial enzymes in pooled serum both in three kinds of tubes neither among the results of AST, CK and CK-MB in whole blood. Nevertheless, there were highly significant differences （P<0.01）among the results of LDH, HBDH and LD-1 in whole blood on the condition mentioned above. Conclusion: Though chemical components of both separation gel and heparin lithium tube’s do not have much effect on the determining of myocardial enzymes itself, it can effectively slow down the precipitation of myocardial enzymes from cells. By comparison, separation gel tube is more accessible to the state of blood specimen collection cause separation blood cells and serum.
【Key Words】 myocardial enzymes separation gel Heparin lithium
随着科学技术的发展，各种先进的仪器的出现，临床生化项目对于血液的采集与分离提出了更高的要求，它不仅要求发出快速的结果，而且也要求我们能够保证各项目结果的准确。过去医院多使用普通干燥管分装血液标本，近来由于相关技术的发展，很多医院开始使用肝素锂抗凝管与分离胶促凝管分装标本，离心后对其血浆（血清）进行测定分析，本文对两种试管测定心肌酶谱的影响的进行研究并报告如下。
材料与方法
一、材料
1、试管：分离胶促凝管，可加全血2.5ml；肝素锂抗凝管，可加全血3ml；普通干燥管即洁净干燥玻璃试管，可加全血2.5ml。
2、仪器与试剂：日立7170A全自动生化分析仪及其配套试剂：LDH、CK、LD-1与HBDH由上海长征医学科学有限公司提供；CK-MB由英国Randox公司提供；AST由上海科华-东菱诊断用品有限公司提供。
3、标本来源：随机抽取30例健康献血员，每人采静脉血8ml，另用本院病人（心肌酶谱正常）前日做生化项目剩余的血清（4℃冷藏）配成30份不同血清，每份4.5ml。
二、 方法
1、配好30份混合血清，每份4.5ml，三种管平均分装后37℃水浴，1.5与3小时后各测定心肌酶谱一次。
2、随机抽取30例献血员，空腹采静脉血8ml,同一条件下按试管要求需血量分装于三种试管中，分离胶促凝管与肝素锂抗凝管加塞混匀，普通干燥管加塞。
3、肝素锂抗凝管即刻离心分离血浆，测定心肌酶谱，加塞后三种管拿去37℃水浴，1.5小时后取出三种管，分离胶管与干燥管拿去离心分离血清，再测定三种管心肌酶谱。
4、三种管继续37℃水浴1.5小时，然后测定各管心肌酶谱。
5、统计学处理：采用excel统计软件进行配对t检验。
结果
1、37℃水浴3小时内,同一时间段,混合血清的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05），见表1。
表1 三种管混合血清心肌酶谱的测定结果（单位：U/L）
讨论
2、37℃水浴3小时内,全血标本随时间延长，肝素锂管组与普通干燥管组心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，而分离胶管组则相对比较稳定。以LDH为代表列图见下。同一时间段,全血AST、CK与CK-MB的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间无显著性差异（P>0.05），而全血的却有极显著性差异（P<0.01），见表2。
表2 三种管分时间段全血心肌酶谱的测定结果（单位：U/L）
讨论
实验显示，37℃水浴3小时内,同一时间段,混合血清的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05），说明分离胶管与肝素锂管中的化学成分对心肌酶谱的测定影响不大。而对于全血标本，37℃水浴3小时内随时间增长，肝素锂管组与普通干燥管组的心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，而分离胶管组则相对比较稳定，这与分离胶管中的分离胶离心后分开血细胞与血清[1]，抑制血细胞释放心肌酶谱有很大关系。
水浴过程中，全血的AST、CK与CK-MB三种管几乎不变，而LDH、HBDH与LD-1上升幅度却很大，同一时间段,全血AST、CK与CK-MB的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间无显著性差异（P>0.05），但全血的LDH、HBDH与LD-1却有极显著性差异（P<0.01），这与血细胞中心肌酶谱的分布及分离胶管肝素锂管的作用机制有关。有文献提到红细胞和血小板中含有丰富的LDH，红细胞LDH是血浆的180倍[3]，而且红细胞中也含大量的HBDH，HBDH实际上是H型LDH的活性，另外LD-1为LDH的同工酶，红细胞中AST、CK与CK-MB相对较少，血液从早晨采集到实验室上机测定，一般要在室温放置2-3小时，这期间细胞代谢活动并没有终止，随着放置时间的延长，细胞内外物质发生转移[2]。血清分离胶是一种粘性流体，比重1.05，介于血清（1.02）与血块（1.08）之间，其结构中含有大量氢键，由于氢键的缔合作用形成网状结构，而这种具有网状结构的粘性液体具有触变性，当分离胶与凝固后的血液同在一个试管中离心时，在离心力的作用下，网状结构被破坏，变成粘度低的流体，发生回转现象，比分离胶重的血块转移到试管底部，分离胶便在血清和血块之间形成胶状的隔离层，阻断和减少了血细胞影响血清成分的通道，从而起到对血清中物质的稳定作用[5]。[4]37℃水浴1.5小时肝素锂管组的LDH、HBDH与LD-1比分离胶管组低，而水浴3小时则反之，并且分离胶管组与肝素锂管组均比普通干燥管组低，这与肝素锂管抗凝能保持细胞完整性，延缓红细胞胞内心肌酶谱析出[6]，以及分离胶管快速促凝使血细胞释出一部分心肌酶谱，离心后分开血细胞与血清有一定关系。
总之，心肌酶谱的测定受红细胞内物质析出影响比较大，分离胶管与肝素锂管具有析出血清或血浆快速，减少样品放置造成误差，出现溶血现象较少，对结果影响小，结果更真实等优点。相对来说，分离胶管因隔开血细胞与血清使结果更接近采血时状况。因此，在条件允许的情况下，我们应该尽可能使用分离胶管或肝素锂管来分装心肌酶谱标本，如果使用普通干燥管来分装心肌酶谱标本，则应采血后尽快分离血清。
参考文献
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[4]叶应妩，王毓三, 主编.全国临床检验操作规程.第二版.南京：东南大学出版社，1997.237-239.
[5]赵立飞，徐建华，解传芬，等.临床应用分离胶采血管需注意的问题[J].临床检验杂志2012, 30 (7):543-545.
论文作者:何健,黄松音,刘勇,冯慧馨
论文发表刊物:《医药前沿》2013年11月第33期供稿
论文发表时间:2014-1-13
标签：肝素论文; 心肌论文; 血清论文; 胶管论文; 水浴论文; 干燥论文; 血细胞论文; 《医药前沿》2013年11月第33期供稿论文;