克拉玛依市独山子人民医院 新疆 833699
【摘要】目的：探讨孕中期产前血清学筛检在产前诊断及妊娠结局中临床应用。方法：收集我院2012年1月到2014年4月来我院进行产检孕妇2500例，采用时间分辨荧光分析法分别测定孕妇静脉血free-β-HCG、μE3、AFP等生物水平，筛选高危孕妇再次进行临床诊断，随访所有孕妇妊娠结局，根据孕中期血液free-β-HCG、μE3、AFP等生物表达水平，结合孕妇的年龄，计算出孕妇怀有先天缺陷儿危险性。结果：高龄孕妇筛检阳性率为12.34%，正常孕妇为3.07%，差异具有统计学意义（P<0.05），其中NTD和ES阳性筛检率和诊断确诊患者比例差异无统计学意义（P>0.05），高龄孕妇DS筛检阳性率和确诊患者比例分别为9.41%、13.56%，高于正常孕妇的2.03%、1.61%，差异具有统计学意义（P<0.05）。 高风险孕妇体重、free-β-HCG MOM以及AFP MOM高于正常孕妇，μE3MOM低于正常孕妇差异均具有统计学意义（P<0.05）。筛选高危孕妇不良妊娠结局发生率为13.22%，明显高于正常孕妇的1.26%，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：孕中期产前血清学筛检对胎儿染色体异常具有较好预测，并且高龄孕妇发生不良妊娠率明显升高。
【关键词】产前血清筛查；产前诊断；妊娠结局
先天缺陷是指婴儿在出生前即已形成的发育障碍，包括形态结构异常及代谢功能异常的先天畸形和先天性智力低下[1]。胎儿畸形约占活产儿的3%。全球每年大约有500万出生缺陷婴儿出生，85%以上发生在发展中国家[2]。我国先天残疾儿童总数高达80～120万，占我国出生人口总数的4%～6%，严重影响我国胎儿的生命质量。产前血清学筛查是临床应用于筛检先天缺陷的重要措施，具有通过经济、简便和无创伤等特点，主要针对唐氏综合征（Down syndrome，DS），18三体综合征（18-trisomysyndrome，Edwards syndrome，ES）以及先天性神经管畸形（neural tube defects，NTD）的筛查和诊断等方法。本文通过收集我院2012年1月到2014年4月来我院进行产前筛检孕妇2500例，探讨孕中期产前血清学筛查在产前诊断及妊娠结局预测中的临床应用，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集我院2012年1月到2014年4月来我院进行产检孕妇2500例，年龄在20~45岁，平均（32.23±2.37）岁，其中>35岁（高龄产妇）478例，≤35岁（正常产妇）2022例，孕周12~20周，平均（10.78±2.37）周。
纳入标准：①经过B超检查均为单胎孕妇，年龄在20~40岁间。②可以收集到孕妇完整的检测或者用药等，或者疾病史、家族史、是否吸烟、饮酒等各方面资料。③选择依存性好，不会发生失访孕妇等，孕妇可以正确回答预产期、体重、月经日期等。④研究符合家庭伦理道德，家属或者本人签署了知情同意书等。排除标准：①患者孕前就患有严重疾病或者患有孕期合并症者。②双胎或者以上孕妇，年龄在45以上者。③对研究不依从、不配合、容易产生失访的以及拒绝参加试验者。④研究期间未按照规定检查或者转院检查者。程中不按照规定进行检查，或者在调查过程中采用了其他的治疗的措施的患者。
1.2 研究方法
1.2.1 标本采集
抽取孕妇清晨空腹静脉血4ml，3000r/min，离心10min，收集血清，-20℃，保存备用。
1.2.2 检测方法
采用时间分辨荧光分析法（time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA），分别应用游离-β亚基-促绒毛膜性腺激素（Free -βsubunits-promoting human chorionic gonadotropin，Free-β-hCG）试剂盒（广州市达瑞生物技术股份有限公司）、游离雌三醇(Free estriol，μE3)ELISA分析检测试剂盒（广州市达瑞生物技术股份有限公司）、甲胎蛋白（Alpha fetoprotein，AFP）试剂盒（广州市达瑞生物技术股份有限公司）分别在孕妇一周内测定free-β-HCG、μE3、AFP等生物表达水平。
1.2.3 判断标准
MOM为中位数值的倍数，表示产前筛查中，孕妇个体的血清标志物的检测结果是正常孕妇群在该孕周时血清标志物浓度中位数的多少倍，产前筛查化验孕中期血液free-β-HCG、μE3、AFP等生物表达水平，并且结合孕妇的年龄，运用计算机精密计算出每一位孕妇怀有先天缺陷儿危险性，AFP一般范围为0.7-2.5MOM，而free-β-HCG越高，uE3越低胎儿患先天缺陷机会越高，以 1/275为判断先天缺陷危险度切割值，﹥1/275为高风险，≤1/250 为低风险。
DS根据特殊面容、手的特点和智能低下表现以及染色体核型分析和FISH技术，患儿体细胞染色体为47条，有一个额外的21号染色体。ES经过染色体核型分析患者的核型有三种：80%为47，XY(XX).+18；10%为嵌合体，即46，XY(XX)/47，XY(XX)，+18；NTD：妊娠期应用超声波检查胎儿，可准确地查出无脑儿和脊柱裂畸形；妊娠期进行胎儿X线摄片检查可以发现无颅骨。
1.2.4 产前诊断与随访
经过产前筛查出NTD、DS、ES18的高危孕妇，进一步进行进行绒毛活检或羊水穿刺，明确诊断。对于NTD高风险孕妇进行超声结构检测确诊。孕妇进入研究密切跟踪随访，由经过严格专业培训的医护人员两人一组进行，方式主要有电话随访或者上门随访等，密切观察孕妇妊娠情况，随访截止时间为2015年4月胎儿均出生。
1.3 研究指标
孕中期产前筛检情况和阳性者诊断情况；随访妊娠结局
1.4统计学方法
应用SPSS13.0统计软件进行，计量资料以均值±标准差（x±s）表示，检验符合正态分布方差齐性行组间的t检验；计数资料用百分比表示，采用卡方检验（χ2）；对于等级资料利用秩和检验。取P<0.05时差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 孕中期产前筛检情况和阳性者诊断情况
高龄孕妇筛检阳性率为12.34%，正常孕妇为3.07%，差异具有统计学意义（P<0.05），其中NTD和ES阳性筛检率和诊断确诊患者比例差异无统计学意义（P>0.05），高龄孕妇DS筛检阳性率和确诊患者比例分别为9.41%、13.56%，高于正常孕妇的2.03%、1.61%，差异具有统计学意义（P<0.05），见表1。
表1 高龄孕妇和正常孕妇孕中期产前筛检和阳性诊断情况[n(%)]
3讨论
随着社会的发展，人们对于医学知识和认识改善，并且各种诱发因素逐渐被认识，先天性畸形或者缺陷婴儿出生率呈现明显上升趋势，根据WHO统计，胎儿畸形约占活产儿的3%。DS即21-三体综合征，是由染色体异常（多了一条21号染色体）而导致的疾病，60%患儿在胎内早期即流产，存活者有明显的智能落后、特殊面容、生长发育障碍和多发畸形。ES亦称爱德华氏综合征[3]是次于先天愚型的第二种常见染色体三体征，主要包括中胚层及其衍化物的异常（如骨骼、泌尿生殖系统、心脏最明显），此外，接近中胚层的外胚层（如皮肤皱褶、皮嵴及毛发等）及内胚层（如美克尔憩室、肺及肾）也异常。文献报道胚胎5周前发育正常，在妊娠第6～8周开始出现异常[3]。NTD是一种严重的畸形疾病，胚胎的第15～17日开始，神经系统开始发育，至胚胎22日左右，神经褶的两侧开始互相靠拢，形成1个管道，前端称为神经管前孔，尾端称为神经管后孔，胚胎在24、25日及26日时，前孔及后相继关闭。胎儿神经管畸形主要表现为无脑儿、脑膨出、脑脊髓膜膨出、脊柱裂/隐性脊柱裂、唇裂及腭裂等，根据流行病学调查我国神经管畸形发生率约为2.74‰，各种先天性疾病严重威胁胎儿健康和家庭生活质量。
本文根据其他大量研究将2500例待检孕妇分为年龄>35岁者高年龄组和≤35为正常年龄组，通过采用TRFIA法配合相应的试剂盒测定孕妇静脉血free-β-HCG、μE3、AFP等生物水平，根据筛选NTD、DS、ES18的高危孕妇进一步进行进行绒毛活检或羊水穿刺，明确诊断，对于NTD高风险孕妇进行超声结构检测确诊，具体危险性以MOM表示，结果显示高龄孕妇筛检阳性率为12.34%，正常孕妇为3.07%，差异具有统计学意义（P<0.05），随者年龄延长先天性阳性者明显升高，并且以DS在高龄孕妇中筛检灵敏度更高。高风险孕妇体重、free-β-HCG MOM以及AFP MOM高于正常孕妇，μE3MOM低于正常孕妇差异均具有统计学意义（P<0.05），说明free-β-HC MOM、AFP MOM越高和μE3MOM越低，孕妇发生先天缺陷可能就越大，这与其他类似研究结果相同[4]，临床应该更加重视，给予相应的处理措施；随访所有孕妇主要不良妊娠有死胎、新生儿出生后死亡、流产、早产儿、出生缺陷、引产等，筛选NTD、DS、ES等高危孕妇不良妊娠发生率分别为19.23%、10.37%、22.22%，筛选高危孕妇不良妊娠结局发生率为13.22%，明显高于正常孕妇的1.26%，高危人群发生不良妊娠结局危险性最大，与D'Antonio F等研究相同[5]。
综上所述，孕中期产前血清学筛检对胎儿染色体异常具有较好预测，并且高龄孕妇发生不良妊娠率明显升高，应该通过筛检早发现、早诊断、早治疗实现先天缺陷疾病二级预防和发现高危人群预防诱发因素实现一级预防。
参考文献
[1]Liu J,Wang H,Xi H,et al.Application of next-generation DNA sequencing for prenatal testing of fetal chromosomal aneuploidies[J].Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi,2015,32(4):533-537.
[2]Dong Y,Hu H,Hu H,et al.Prenatal diagnosis of a case with combined Wolf-Hirschhorn syndrome and Jacobsen syndrome[J].Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi,2015,32(4):512-514.
[3]Bianchi DW, Chudova D, Sehnert AJ,et al.Noninvasive Prenatal Testing and Incidental Detection of Occult Maternal Malignancies[J].JAMA,2015 ,314(2):162-9.
[4]Ekin A,Gezer C,Taner CE,et al.Fetal abdominal wall defects: six years experience at a tertiary center[J].Clin Exp Obstet Gynecol,2015,42(3):327-30.
[5]D'Antonio F,Virgone C,Rizzo G,et al.Prenatal Risk Factors and Outcomes in Gastroschisis: A Meta-Analysis[J].Pediatrics,2015,136(1):e159-69.
作者信息：党迷，女，1968年4，河南，学士，副主任技师，主要从事免疫学、分子生物学及电化学发光技术的应用方向的研究。
论文作者:党迷,于军
论文发表刊物:《中国医学人文》2016年第10期
论文发表时间:2016/9/9
标签：孕妇论文; 产前论文; 统计学论文; 胎儿论文; 先天论文; 染色体论文; 高龄论文; 《中国医学人文》2016年第10期论文;