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【摘 要】目的：主要研究结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用效果。方法：选择2013年12月-2015年3月期间在我检验中心接受检验的疑似结核病患者3224例作为研究对象，随机划入A、B、C、D四组，分别接受结核感染T细胞斑点试验、结核菌素试验、结核干扰素试验以及结核干扰素酶免试验，比较四组患者的检出率。结果：A组检验敏感性88.3%，特异性83.7%，PPV、NPV分别为74.4%195.3%，准确度83.7，LR+、LR-分别为6.16±0.28和0.14±0.29，各项指标均优于B、C、D三组，差异有统计学意义，P＜0.05。结论：结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用效果优于结核菌素试验、结核干扰素试验以及结核干扰素酶免试验，值得在临床上应用和推广。
【关键词】结核感染T细胞斑点试验；结核诊断
为了进一步研究结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用效果，选择2013年8月-2015年3月期间在我检验中心接受检验的疑似结核病患者3224例作为研究对象进行临床研究，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选择2013年12月-2015年3月期间在我中心接受检验的疑似结核病患者3224例作为研究对象，排除临床表现、影像学或者病理学检查不支持结核、抗结核治疗无效、非结核性疾病导致、未经抗结核治疗病情改善患者[1]。全部患者随机划入A、B、C、D四组，其中A组806例，男400例，女406例，年龄26-73岁，平均年龄44.6±16.5岁，发热待查220例，胸腔积液189例，肺部感染性病变196例，腹腔积液201例，病程5d-4个月；B组806例，男401例，女405例，年龄25-72岁，平均年龄44.8±16.6岁，发热待查218例，胸腔积液196例，肺部感染性病变182例，腹腔积液210例，病程3d-4个月；C组806例，男403例，女403例，年龄26-74岁，平均年龄44.8±16.7岁，发热待查214例，胸腔积液195例，肺部感染性病变193例，腹腔积液204例，病程7d-5个月；D组806例，男402例，女404例，年龄28-73岁，平均年龄44.4±16.9岁，发热待查212例，胸腔积液191例，肺部感染性病变208例，腹腔积液195例，病程3d-6个月；四组患者性别、年龄、病程、病情等一般资料差异无统计学意义，P＞0.05。
1.2方法
A组接受结核感染T细胞斑点试验，取外周静脉血5ml，分离外周单个核细胞，添加植物血凝素、阳性细胞培养液、分泌靶细胞抗原到微量板孔中，培养箱孵育之前将单核核细胞添加到微量板孔中，孵育2h后洗脱PBS，显色，放大计斑点数目，计数孔点数＞阴性对照2倍或多出阴性5个点为阳性。
B组接受结核菌素检验，进行前臂尺侧皮内Mantoux试验，72h后分析结果，硬核直径超过10mm为阳性[2]。
C组接受结核干扰素检验，抽取外周静脉血，颠倒混匀，常温静置，离析加热分析淋巴细胞，弃上清液取细胞沉淀，培养，显微镜细胞计数。
D组患者接受结核干扰素酶免检验，取新鲜采集肝素钠抗凝血8ml，6h后加刺激物，4℃冰箱过夜，第二天取培养物，置入发光底物液进行光分析，5min后读取发光强度。
1.3观察指标
比较四组患者的敏感性、特异性、PPV、NPV、准确度和LR+、LR-指标。
1.4统计学方法
本次研究使用SPSS15.0统计学软件进行数据的分析和处理，计数资料（n，%）经卡方检验，计量资料（ ±s）经t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2结果
A组检验敏感性88.3%，特异性83.7%，PPV、NPV分别为74.4%195.3%，准确度83.7，LR+、LR-分别为6.16±0.28和0.14±0.29，各项指标均优于B、C、D三组，差异有统计学意义，P＜0.05。
表1 四组患者检验结果比较
附：A-B、A-C、A-D两两比较，差异有统计学意义，P＜0.05。
3讨论
世界卫生组织的统计报告称，全球有0.3亿左右人口受到结核分支杆菌感染，每年新发病例数在800万左右，每年因为结核病死亡例数为300万，我国每年新增结核病人数在150万，感染人群规模为5亿，近些年国家经济发展，人口流动加剧，结核感染发病几率在持续上升[3]。快速诊断与早期治疗是结核病防治的主要方法。结核感染T细胞斑点试验是结核诊断的新方法，在外周血标本中的检测比较常用，灵敏度和特异度都比较理想。机体感染结核杆菌之后，T淋巴细胞致敏，之后在结核菌特异性抗原刺激之后，将产生细胞因子λ干扰素，检测外周血中受结核菌特异性抗原刺激后分泌干扰素的T淋巴细胞水平就能够判断机体是否感染。
结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用敏感度很高，特别是浆膜腔积液和活动性结核病，机体免疫状态对检测结果的影响很小，卡介苗接种也不会对其产生影响，能够检测出活动性肺结核、肺外结核、腹腔结核以及免疫抑制结核，诊断速度快，24h内就能够得出结果，还能够用于早期结核分支杆菌感染诊断[4]。结核分支杆菌被彻底清除之后，效应T细胞随之消失，所以效应T淋巴细胞的检测可以由于临床治疗效果检验。效应T细胞有集中于胸膜腔的趋势，检查胸腔积液中的单个核细胞数就能够比较清晰直观的了解结核分支杆菌状态，从而提高结核性胸膜炎的诊断准确率。当然结核感染T细胞斑点试验也有一定的缺点，检测操作步骤相对繁琐，价格很高，对实验室技术和操作水准要求高，而且客观的临床试验数据相对缺乏，结核分枝杆菌感染免疫反应和结核病之间的关系也尚不清楚，所以结核感染T细胞斑点试验无法鉴别结核病的活动性、陈旧性或者潜伏性[5]。
结核病防治工作的核心是快速诊断和早期治疗，我国有很高的卡介苗接种率，导致TST假阳性率偏高，集体免疫状态对TST结果的影响也比较大，病原学诊断是结核病诊断的金标准，然而标本中细菌数量对诊断结果有很大影响，并且细菌培养耗时长，检测时效性不强，难以满足早期诊断的需求。相关研究资料表明，TST假阳性病例主要和合并免疫抑制剂质量、严重营养不良、结缔组织疾病等有关，在免疫抑制和免疫能力低下时更容易出现，而结核感染T细胞斑点试验的免疫抑制干扰的抗性更强，比TST更适用于免疫低下、严重营养不良和合并免疫抑制患者的结合感染检测[6]。我国人口基数大，人口分布密度高，属于结核病高发国家，这会不可避免的削弱结核感染T细胞斑点试验的特异性，高隐匿性结核发病率的国家，结核感染T细胞斑点试验特异性仅为47%，我国的具体情况因为缺乏相关研究资料尚不得知。
结语：
综上所述，结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用效果优于结核菌素试验、结核干扰素试验以及结核干扰素酶免试验，在结核病防治工作中有着很高的应用与推广价值。
参考文献：
[1] 张瑛，孙亚蒙，徐欣晖等.结核感染T细胞斑点试验在结核性疾病中的诊断价值[J].中华临床医师杂志（电子版），2010，04（12）：2431-2434.
[2] 刘红，黄永杰，王静等.结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值研究[J].中华结核和呼吸杂志，2014，37（3）：192-196.
[3] 周乐亮，沈守荣，何苗等.结核感染T细胞斑点试验对结核性腹膜炎的诊断价值[J].中南大学学报（医学版），2013，38（5）：526-531.
[4] 周晴，胡必杰，黄声雷等.结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的价值[J].中华医院感染学杂志，2013，23（7）：1726-1728.
[5] 曾春艳，张松旺，于长国等.结核感染T细胞斑点试验在肾结核诊断中的应用研究[J].中国人兽共患病学报，2013，29（12）：1199-1202.
[6] 李晓辕，温忠梅，荆蕾等.结核感染T细胞斑点试验诊断老年人肺结核的价值[J].中国老年学杂志，2013，33（17）：4312-4313.
论文作者:陈梅卫,唐浩
论文发表刊物:《航空军医》2016年第12期
论文发表时间:2016/7/22
标签：结核论文; 斑点论文; 细胞论文; 干扰素论文; 结核病论文; 特异性论文; 统计学论文; 《航空军医》2016年第12期论文;